西藏林芝地區市售家禽禽流感免疫狀況調查

摘要:為了解林芝地區市售家禽禽流感免疫狀況，于2008年10~12月間采集了5種家禽的249份血清樣本，采用HA和HI試驗進行了禽流感血清抗體的檢測，發現在5種家禽的249份血清中檢出了179份AIV陽性抗體，其中H5陽性數32份，陽性率為12.9%;H9陽性數43份，陽性率為17.3%;H1陽性數19份，陽性率為7.6%;H3陽性數85份，陽性率為34.7%。表明林芝地區市售家禽禽流感免疫狀況仍需進一步改進。

關鍵詞:家禽;禽流感;免疫狀況;林芝;西藏

中圖分類號:S852.5+2文獻標識碼:A文章編號:1007-273X(2010)06-0025-02

禽流感是由A型禽流感病毒引起的一種從呼吸系統到全身的嚴重敗血癥等多種癥狀的禽類烈性傳染病[1]。禽流感病毒(Avian influenza virus，AIV)根據核蛋白(NP)和基質膜蛋白(M)的抗原性不同分成甲、乙、丙3個血清型。根據病毒表面糖蛋白血凝素(HA)的抗原性不同，可以分為16個H亞型(H1～H16);根據病毒表面糖蛋白神經氨酸酶(NA)抗原性不同，可分為9個N亞型(N1～N9)。禽流感病毒分高致病性和低致病性兩種，目前已發現的高致病性禽流感病毒主要有H5N1和H7N7兩種[2]。2004年初，由高致病性H5N1亞型AIV引起越南、泰國、日本、中國等地區的大批禽類死亡，給亞洲地區的畜禽業帶來了巨大的經濟損失[3]。蘭玲等[4]對新疆塔城市高致病性禽流感流行病學調查，檢出H5亞型禽流感病毒。程小雯等[5]對深圳地區人和雞H9N2亞型禽流感病毒進行調查，發現H9N2亞型禽流感病毒能感染人，并且分布較廣。鑒于目前還沒有西藏地區家禽禽流感流行病學調查的研究報道，我們于2008年10~12月間對西藏林芝地區市售家禽禽流感免疫狀況進行了調查，以期了解該地區市售家禽禽流感免疫狀況，為防止禽流感疫情在西藏林芝地區發生、傳播、蔓延擴散，保障當地的畜牧業生產提供依據。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1試劑血凝試驗(HA)和血凝抑制試驗(HI)診斷試劑由華中農業大學農業微生物學國家重點實驗室提供。

1.1.2阿氏液取葡萄糖2.1g，枸櫞酸鈉0.8g，NaCl 0.4g，溶解于100mLddH2O中，用10%枸櫞酸鈉調節pH值至6.1，過濾除菌或高壓滅菌后，置4℃保存備用。

1.1.3紅細胞懸液配制紅細胞均來源于無禽流感和新城疫等抗體的健康雞的血液與等體積的阿氏液混合，4℃保存。使用前吸取紅細胞懸液至50mL離心管中，用生理鹽水洗滌3～5次，每次以1 000r/min離心5min，將血漿和白細胞充分洗去。最后一次于

1 200 r/min離心10 min，棄上清，將洗滌好的紅細胞配成1%細胞懸液，置4℃保存備用。

1.2方法

1.2.1樣品的采集及處理2008年10~12月間，經林芝農林局批復同意，在西藏林芝地區的幾個家禽屠宰點采集了家禽的血液樣本。共在林芝、米林、工布江達、墨脫、波密、察隅、朗縣等地區采集到249份家禽的血樣樣品。其中，土雞126只，土鴨106只，藏雞11只，烏雞4只， 綠頭鴨2只(表1)。所采集的血樣均于3 000r/min離心約15 min，收集血清移入2 mL的冷凍管中，置于-20℃的冰箱中保存待測。

1.2.2血凝和血凝抑制試驗HA和HI試驗參照GB/T 18936-2003《高致病性禽流感診斷技術》進行。

2結果與分析

由表2、表3可見，經HI試驗對不同亞型AIV抗體(H5/H9/H1/H3)的檢測，在受檢的5種家禽的249份血清中共檢出不同亞型AIV陽性抗體179份，陽性率為71.9%。其中，H5陽性數32份，陽性率為12.9%;H9陽性數43份，陽性率為17.3%;H1陽性數19份，陽性率為7.6%;H3陽性數85份，陽性率為34.1%。

3討論

3.1藏東南地區禽流感免疫狀況

目前，禽流感是威脅我國養禽業最嚴重的疾病。一旦禽流感暴發，不僅直接造成養殖戶的巨大經濟損失，還會引起消費者恐慌，造成禽、蛋消費減少，銷售價格下降，繼而導致全行業的經濟損失。尤其重要的是，市售家禽是禽流感傳染給人的主要載體[6]，因此世界各國對家禽禽流感免疫十分重視，均制定相關的規章制度強化家禽的禽流感免疫。目前，我國推出了多種禽流感疫苗，如NDV-AIV重組二聯活疫苗、H5滅活疫苗(H5N2、H5Re-1、H5Re-4、H5Re-5)和H5-H9二價滅活疫苗[7]。這些疫苗必須科學使用，才能達到防治效果。

通過對西藏林芝地區的7個縣市售家禽禽流感病毒血清學檢測情況調查，所采集的樣品檢測到有AVI抗體存在。結合采樣時對免疫情況的調查，表明家禽對禽流感病毒(H5、H9、H1、H3)產生了良好的免疫應答，說明該地區進行了禽流感的免疫預防。

3.2藏東南地區禽流感免疫的改進

農業部規定，禽流感的免疫率要達到100%才能抵抗高致病性禽流感的流行。林芝地區的7個縣市售家禽禽流感病毒血清學檢測情況表明，只有藏雞的免疫率較高，其他家禽漏免情況嚴重。考慮到家禽品種、免疫時間等因素[8]，林芝地區禽流感的免疫率仍然很低。本次試驗所采集的血清均來源于林芝東南地區市售家禽，而據了解，市售家禽大部分來自本地區散養戶和養殖場，有一小部分是來自四川地區，一旦高致病性禽流感流行將造成嚴重的后果，因此建議相關單位加大免疫預防督察的力度，提高禽流感的免疫率。

參考文獻:

[1]CHEN H，SMIT H G J，ZHANG S Y，et al.Avian Flu:H5N1 virusout break in migratory waterfowl[J]. Nature，2005，436:191-192.

[2]KHAWAJA J Z，NAEEM K，AHMED Z，et al. Surveillance of avian influenza viruses in wild birds in areas adjacent to epicenter of an outbreak in Federal Capital Territory of Pakistan[J]. International Journal of Poultry Science，2005，4(1):39-43.

[3]ARZEY G.The role of aquatic wild birds in the epidemiology of avian influenza in Aust- ralia[J]. Aust Vet J，2004，82(6):377-378.

[4]蘭玲，盛卓君，冉多良，等.新疆塔城市高致病性禽流感流行病學調查[J]. 畜牧與獸醫，2008，40(1):107-108.

[5]程小雯，劉建軍，何建凡，等.深圳地區人和雞群中H9N2亞型流感病毒病原學和血清流行病學調查[J].中華實驗和臨床病毒學雜志，2002，16(4):3l9-321.

[6]WANG M，DI B，ZHOU D H，et al. Food markets with live birds as source of avian influenza[J]. Emerg Infect Dis，2006，12(11):1773-1775.

[7]簡瑞清.我國高致病性禽流感免疫現狀與分析[J].山東畜牧獸醫，2009(30):34-35.

[8]王存波，常國斌，雷黎麗. 不同雞種對新城疫和禽流感的免疫性能差異分析[J]. 中國動物檢疫，2009，26(2):54-55.