妊娠期高血壓與抗滋養細胞抗原關系研究

[摘要] 目的 探討妊娠期高血壓與抗滋養細胞抗原的關系。方法 采用ELISA法測定正常組與妊娠期高血壓組母血及臍血中抗滋養細胞抗原IgG、IgM，測定兩組產婦血清中抗心磷脂抗體陽性率。結果 與正常組比較，妊娠期高血壓組母血抗滋養細胞抗原IgG、IgM陽性率具有顯著性差異;與正常組比較，妊娠期高血壓組臍血抗滋養細胞IgG、IgM陽性率具有顯著性差異(P<0.01);妊娠期高血壓產婦抗心磷脂抗體陽性率顯著高于正常組，陽性表達23例，達到42.9%，對妊娠期高血壓危險性較高。結論 妊娠期高血壓母血及臍血抗滋養細胞抗原IgG、IgM升高以及抗心磷脂抗體陽性率增加是妊娠期高血壓發病主要因素。

[關鍵詞] 妊娠期高血壓; 滋養細胞; 抗心磷脂抗體

[中圖分類號] R714.24+6 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-9701(2010)05-142-02

Study on the Relationship Between Gestational Hypertension and Trephocyte Antigen

CHENG Hong

Wuhan University of Science and Technology Medical College，Wuhan 430000，China

[Abstract] ObjectiveTo discuss relationship between gestational period hypertension and anti-trephocyte antigen. MethodsDetect IgG and IgM of maternal blood and cord blood and serum anticardiolipin antibody in normal group and gestational period hypertension group by ELISA method. ResultsPositive ratio IgG and IgM of maternal blood and cord blood were significant different compared with normal group; Positive ratio IgG，IgA and IgM of anticardiolipin antibody were significant different compared with normal group，and positive were 23，42.9%. ConclusionIncreasing IgG and IgA of anti-trephocyte antigen and anticardiolipin antibody level in gestational period hypertension group，which is the major factor in gestational period hypertension.

[Key words]Gestational period hypertension; Trephocyte; Anticardiolipin antibody

世界衛生組織定義妊娠期高血壓疾病(HDCP)為收縮血壓(SBP)≥140mmHg或舒張壓(DBP)≥90mmHg，與孕前或妊娠期第一個三個月血壓相比，SBP升高超過25mmHg或DBP升高超過15mmHg。HDCP是影響母嬰健康、孕產婦和圍生兒發病率及病死率的主要原因。我國發病率為9.4%，國外報道7%～12%[1]。臨床上妊娠期高血壓包括妊娠期高血壓、子癇前期、子癇、慢性高血壓并發子癇前期以及慢性高血壓。妊娠期高血壓發病機制至今尚未完全闡明。胚胎的外層即合體滋養層是直接與母體循環相接觸的部分，胚胎能夠確保胎兒成活作用機制是合體滋養層不表達任何HLA或ABO抗原，但是合體滋養層漿膜上卻明顯存在抗原系統，影響著孕婦與胎兒之間的免疫平衡。母體和胎兒之間免疫失調是影響妊娠期高血壓的主要原因。所以檢測滋養細胞膜特異性抗原，研究抗滋養細胞膜抗原抗體在妊娠期高血壓孕婦母血及臍血中IgG和IgM水平，來探討母血和臍血中抗體變化的差異性以及與妊娠期高血壓之間的關系。

1 臨床資料

1.1 一般資料

選擇我院2007年3月～2008年12月住院分娩產婦96例作為研究對象，其中正常產婦40例，年齡22～32歲，平均年齡(27.5±3.2)歲，平均孕齡(39.3±2.1)周，平均新生兒體重(3679±351)g;妊娠期高血壓產婦56例，年齡24～35歲，平均年齡(28.2±2.7)歲，平均孕周(38.0±1.5)周，平均新生兒體重(3122±456)g。妊娠期高血壓產婦包括妊娠期高血壓25例、子癇前期14例、子癇17例。兩組產婦均為初產婦。兩組產婦在年齡、孕周、新生兒體重上無顯著性差異。排除自身免疫性疾病、肝腎疾病，采血之前均未接受輸血及免疫治療。妊娠期高血壓診斷標準[2]:妊娠期高血壓，患者于妊娠期首次出現高血壓(在140/90mmHg以上)，化驗尿蛋白(-)，并于產后12周內血壓恢復正常;子癇前期，輕度為血壓≥140/90mmHg，尿蛋白(+)，有輕度上腹不適和頭痛癥狀，重度為血壓≥160/110mmHg，尿蛋白(++)以上，同時，血液檢查可能有血小板降低、溶血征象、肝腎功能異常等，可感覺到明顯的頭痛、持續的上腹不適及視覺障礙;子癇，孕婦出現抽搐(抽風)、短時意識喪失。

1.2 測定方法

1.2.1 采血 孕婦準備分娩前空腹采集外周靜脈血5mL，在胎兒分娩出后剪斷臍帶前取臍靜脈血5mL，取血后，自然凝固10～20min，分離血清，-20℃冰箱保存備用。

1.2.2 ELISA測定 檢測采用ELISA法測定母血及臍血中滋養細胞抗原IgG和IgM，試劑盒由德國歐蒙醫學實驗診斷有限公司提供，嚴格按照說明書操作。

ELISA操作時，先配置所需各種試劑，96孔板家養，設置空白孔，加入高純度滋養細胞抗原混勻，室溫撫育60min，特異性結合樣本中抗體，加入酶標記的抗人γ球蛋白，酶標儀450nm波長處測各孔吸光度，按說明書計算。

另測定母血中抗心磷脂抗體，采用ELISA，測量時根據ELISA試劑盒說明書，首先將所有試劑充分混勻，避免產生泡沫。96well孔板加樣，設置空白孔，加檢測抗體后混勻，蓋上封板膜，37℃溫育90min。加入washing buffer，停留1min后棄去孔內液體。重復4次，最后一次在濾紙上扣干。加入稀釋后的Streptavidin- HRP。蓋上封板膜，37℃溫育30min。加入washing buffer，停留1min后棄去孔內液體，重復5次，最后一次在濾紙上扣干。加入TMB，37℃避光溫育5～30min，根據孔內顏色的深淺來判定終止反應，迅速加入Stop solution 終止反應。終止后10min內用酶標儀在450nm測量吸光度。將TMB空白顯色孔設為對照，所有的標準品和樣品的吸光值減去空白孔的吸光值后，按說明書進行計算。

1.3 數據處理

實驗數據用GraphPad Prism 程序(GraphPad Software，Inc.，San Diego，USA)進行統計，采用均數±標準差(χ±s)表示，所有數據用One-way ANOVA 和Tukey’s multiple comparison testes進行比較，P<0.05為具有顯著性差異。

2 結果

2.1 母血與臍血抗滋養細胞IgG、IgM陽性率比較

測定正常組與妊娠期高血壓兩組母血與臍血中抗滋養細胞抗體陽性率，其中妊娠期高血壓組母血抗滋養細胞IgG、IgM分別為45例(80.4%)和37例(66.1%)，與正常組比較，具有顯著性差異;妊娠期高血壓組臍血抗滋養細胞IgG、IgM分別為41例(73.2%)和34例(60.7%)，與正常組比較，具有顯著性差異(P<0.01)。結果見表1。

2.2 抗心磷脂抗體陽性率比較

測定正常產婦與妊娠期高血壓產婦血中抗心磷脂抗體水平，發現妊娠期高血壓產婦抗心磷脂抗體陽性率顯著高于正常組，陽性表達23例，達到42.9%，對妊娠期高血壓危險性較高。結果見表2。

3 討論

妊娠期高血壓是妊娠期特有的疾病，是一種胎盤疾病，目前發病機制尚不清楚。妊娠是一種成功的自然半同種異體移植，有賴于母胎間免疫平衡，平衡一旦失調就可能引起免疫排斥反應，導致病理妊娠。妊娠期高血壓疾病的發生主要有免疫機制、遺傳因素、血管內皮細胞受損、內皮型一氧化氮合成酶表達異常、子宮胎盤滋養細胞浸潤過淺、子宮螺旋動脈重鑄障礙導致子宮胎盤缺血、一些細胞因子的表現異常、基因突變或基因多態性、炎癥反應等為探討妊娠期高血壓與胎盤抗滋養細胞抗原抗體水平的關系。

本研究采用ELISA方法測定正常產婦與妊娠期高血壓產婦母血及臍血抗滋養細胞抗原和母血中抗心磷脂抗體。結果發現妊娠期高血壓組母血及臍血中抗滋養細胞IgG、IgM 陽性率比顯著高于正常組，母血中抗心磷脂抗體陽性率在妊娠期高血壓組與正常晚孕組相比具顯著性差異。

孕婦體內不排斥胎兒的主要原因，是依靠母體對胎兒特殊的免疫調節，這種免疫調節可以消除或改變對胚胎不利的免疫因素，以達到免疫平衡，一旦免疫平衡失調，則體系遭到破壞。胚胎的外層即合體滋養層是直接與母體循環相接觸的部分，免疫組論證合體滋養層不表達任何HLA或ABO抗原，是確保胎兒成活的一種保護機制之一，但是合體滋養層漿膜上卻明顯存在有抗原系統，并且可被母體識別。至于這些抗原的性質尚無統一定論，但它們卻不容置疑的影響著孕婦與胎兒之間的免疫平衡。目前有些學者認為，在滋養層表面存在有滋養葉淋巴細胞交叉反應抗原，這是一種同種異型抗原，產生保護性的封閉抗體，通過與胎兒-胎盤滋養葉抗原結合或與母體淋巴細胞結合，防止胚胎或胎兒父系抗原被母體免疫系統識別和殺傷。而滋養細胞膜特異性抗原可以準確地檢測，且具有自身免疫傾向的婦女血中可能存在的抗磷脂抗體，而這種抗體的增高與妊娠期高血壓之間有著密切的聯系，很可能就是導致妊娠期高血壓的主要因素之一[3]。抗心磷脂抗體易引發流產已得到醫學界的公認。妊娠高血壓綜合征產婦亦可檢測到抗心磷脂抗體。有研究表明，抗心磷脂抗體可通過爭奪胎盤血管的磷脂受體，導致胎盤梗死，從而參與并加重妊高征的發病過程。

[參考文獻]

[1] 傅靜，高眉揚. 妊娠高血壓綜合征患者IgG類抗體水平的測定[J]. 中華婦產科雜志，2003，38(4):241.

[2] 樂杰. 婦產科學[M]. 第4版. 北京:人民衛生出版社，1996:114.

[3] 張新宇，蓋銘英，徐蘊華. 抗磷脂抗體及抗磷脂綜合征與妊高征[J]. 中華婦產科雜志，1996，31(8):506.

(收稿日期:2009-11-17)