子宮內膜異位癥患者血清中VEGF的表達及意義

[摘要] 目的 檢測血管內皮生長因子(Vascular endothelial growth factor，VEGF)在子宮內膜異位癥(endometriosis，EMs)患者血清中的表達水平，以探討其在子宮內膜異位癥發病機制中的作用及其與患者痛經的關系。方法 應用酶聯免疫吸附法(enzyme-linked immunosobent assay，ELISA)檢測48例(I、II期22例，III、IV期26例)EMs患者及40例非EMs患者血清中VEGF的表達水平，分析其與EMs以及患者痛經嚴重程度的關系。結果 EMs患者血清中VEGF的表達水平明顯高于非EMs患者(P<0.05);Ⅲ、Ⅳ期EMs患者血清VEGF的水平高于Ⅰ、Ⅱ期患者(P<0.05);血清中VEGF的表達水平與患者痛經嚴重程度無明顯相關性(P>0.05)。結論 VEGF在EMs患者血清中呈高表達，且與患者病情呈正相關，提示其在EMs的發生、發展中可能具有促進作用;血清中VEGF的水平無法反映痛經的嚴重程度。

[關鍵詞] 子宮內膜異位癥; 血管內皮生長因子; 酶聯免疫吸附試驗; 痛經

[中圖分類號] R711.71[文獻標識碼] A [文章編號] 1673-9701(2010)05-48-02

Expression of Serum Vascular Endothelial Growth Factor in Endometriosis and Its Significance

LI Fengmei MA Nan LIU Jia

Department of Obstetrics and Gynecology，the Second Affiliated Hospital of Zhengzhou University，Zhengzhou 450014，China

[Abstract] ObjectiveTo investigate the expression level of serum vascular endothelial growth facter(VEGF)in endometriosis and explore its role in the pathogenesis of endometriosis，and the relationship between the VEGF level and dysmenorrheal. MethodsThe expression level of serum VEGF was measured by enzyme-linked immunosobent assay(ELISA)in 48 patients with endometriosis(22 at stages I and II and 26 at stages III and IV)and 40 women without endometriosis. The relationship between the level and endometriosis as well as between the level and dysmenorrheal was analyzed. ResultsThe expression level of serum VEGF was significantly higher in endometriosis than that in non- endometriosis(controls)(P<0.05). The expression level of serum VEGF was significantly higher at stages III and IV than that at stages I and II in endometriosis(P<0.05). The expression level of serum VEGF showed no significant correlation with the severity of dysmenorrhea(P>0.05). ConclusionThe increased expression level of serum VEGF in endometriosis suggests that VEGF may play an important role in the pathogenesis of endometriosis. The serum VEGF level has no significant correlation with dysmenorrhea.

[Key words]Endometriosis; Vascular endothelial growth factor; Enzyme-linked immunosobent assay; Dysmenorrhea

子宮內膜異位癥(endometriosis，EMs)是育齡女性的常見病、多發病，近年來發病率呈上升趨勢。目前子宮內膜異位癥的發病機制尚不十分明確，但異位病灶的生存與發展必須有新生血管的建立才能得以維持[1]。可見新生血管的生成是子宮內膜異位癥發病的中心環節。血管內皮生長因子(VEGF)是一種高度特異性的血管內皮細胞有絲分裂原，能夠促進新生血管的形成，并增加血管的通透性[2]。本研究應用ELISA方法檢測子宮內膜異位癥患者血清中VEGF的表達水平，并分析其與患者痛經程度的關系，旨在研究VEGF在子宮內膜異位癥發病機制中的作用，進而為子宮內膜異位癥的診治提供理論依據。

1 資料與方法

1.1 研究對象

子宮內膜異位癥組:2008年6月～2009年6月在鄭州大學第二附屬醫院婦科行腹腔鏡或開腹手術治療，術后病理診斷為子宮內膜異位癥患者48例。按1987年美國生育協會修正標準(R-AFS)分期，Ⅰ、Ⅱ期22例，Ⅲ、Ⅳ期26例。所有子宮內膜異位癥患者均進行痛經評分，評分標準參照文獻[3]，其中0分16例，1分18例，2分4例，3分10例。對照組:同期術后病理診斷為子宮肌瘤患者40例。病例組及對照組患者子宮均為內膜增生期，年齡23～52歲，平均年齡37歲，無內科合并癥。所有研究對象半年來均未行激素治療。

1.2 方法

1.2.1 標本收集 患者入院后或手術前采取靜脈血3mL，室溫靜置2h后，2000r/min離心10min，取上層血清小管分裝，-80℃保存待測。

1.2.2 血清VEGF水平的測定 采用雙抗體夾心ELISA法檢測子宮內膜異位癥患者血清中VEGF水平。ELISA試劑盒購自美國ADL生物科技公司，VEGF最小可測濃度為1.0pg/mL，批內及批間變異小于10%。測量方法嚴格按照說明書操作步驟進行，所有樣本均經復孔檢驗以減少誤差。經全自動酶免儀在450nm波長處讀取吸光度值，VEGF的濃度通過標準曲線讀取。

1.2.3 統計學分析 采用SPSS13.0統計學軟件包進行統計學分析，計量資料以χ±s表示。多組間定量資料的比較采用單因素方差分析，兩組間顯著性比較采用t檢驗。相關性分析采用統計學Pearson相關分析處理，求出r值。以P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 子宮內膜異位癥組與對照組VEGF水平比較

四組資料血清VEGF水平經單因素方差分析差異有統計學意義(F=9.237，P<0.05)。經q檢驗進行兩兩比較結果顯示，EMs組、III+Ⅳ期EMs組血清中VEGF水平與對照組相比差異均有統計學意義(P<0.05);EMs組中III、Ⅳ期與Ⅰ、Ⅱ期相比亦具有統計學差異(P<0.05)。數據見表1。

2.2 子宮內膜異位癥組VEGF水平與痛經嚴重程度的相關性分析

采用統計學Pearson相關分析探討子宮內膜異位癥患者血清中VEGF表達水平與患者痛經嚴重程度的相關性。結果顯示，r=0.043，t=0.29，P>0.05。因此，子宮內膜異位癥患者血清VEGF水平與痛經嚴重程度無明顯相關性。

3 討論

子宮內膜異位癥近年來在育齡婦女中的發病率有逐年上升的趨勢，且發病年齡逐漸年輕化，嚴重影響中青年女性的健康和生活質量。雖然子宮內膜異位癥是一種良性婦科疾病，但它卻有組織侵襲和血管生成等惡性腫瘤的生物學行為。關于子宮內膜異位癥的發病機制，目前存在多種學說，其中Sampson的經血逆流種植學說最受廣大學者認可。但經血逆流現象很普遍，發生率可高達80%~90%，而臨床上只有10%～15%的育齡婦女罹患子宮內膜異位癥[4]，說明經血逆流并不一定能夠引起子宮內膜異位癥的發生，可能只是誘因。近年來研究表明[5]，子宮內膜異位癥的發生、發展與新生血管的形成密切相關，血液供應的建立和支持是子宮內膜異位種植存活的基礎。

VEGF是一種主要來源于巨噬細胞的有絲分裂原，對血管內皮細胞具有高度的特異性，可促進毛細血管增生，并能增加微血管的通透性。高水平的VEGF通過自分泌和旁分泌的方式與血管內皮細胞的特異性受體結合，刺激毛細血管增生，為異位生長的腺上皮細胞提供營養支持，從而促進子宮內膜異位癥的發生、發展。子宮內膜異位癥患者組織和腹腔液中VEGF的高表達已經被證實，但關于VEGF在子宮內膜異位癥患者血清中表達水平的研究相對較少。本研究采用ELISA方法檢測EMs組與對照組患者血清中VEGF的水平。其中對照組為患有良性疾病的子宮肌瘤患者，這兩種疾病均為以雌激素影響為主的激素依賴性疾病，以此減少因激素對兩組之間造成的VEGF水平的差異。結果顯示，子宮內膜異位癥組的VEGF水平高于對照組，與國內外學者相關報道[6，7]一致。研究結果同時顯示，Ⅲ、Ⅳ期患者VEGF濃度高于Ⅰ、Ⅱ期患者，表明VEGF的高表達在子宮內膜異位癥發生發展中具有重要作用，且與子宮內膜異位癥嚴重程度密切相關。

子宮內膜異位癥痛經的發生可能與異位內膜的增生、岀血、局部刺激及前列腺素的異常表達有關。本研究結果顯示，子宮內膜異位癥患者血清中VEGF的表達水平與痛經嚴重程度無明顯相關性，說明子宮內膜異位癥疼痛的程度可能不取決于病灶免疫反應的程度，而與病變浸潤的解剖位置及異位內膜種植所致的滲出、粘連及對盆腔腹膜下神經的壓迫有關[8，9]。

綜上所述，VEGF在子宮內膜異位癥患者血清中呈高表達，與疾病的嚴重程度密切相關。因此，檢測子宮內膜異位癥患者血清中VEGF的表達水平可能有助于子宮內膜異位癥的診斷。另外，VEGF主要通過促進新生血管形成而導致子宮內膜異位癥的發生，以VEGF為靶點進行阻斷血管生成的研究可能為子宮內膜異位癥的治療提供新的途徑。

[參考文獻]

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(收稿日期:2009-11-10)