維藥榅桲提取物對大鼠實驗性血栓形成的影響

烏蘭巴依爾， 周文婷， 楊永新， 王雪飛， 阿不來提·阿布力孜， 依巴代提·吐呼提， 艾尼瓦爾·吾買爾*

(1.新疆巴州衛生學校，新疆庫爾勒841000;2.新疆醫科大學，新疆烏魯木齊830054)

榅桲(Cydonia oblanga Miller，COM)在我國有著悠久歷史，是薔薇科(Rsaceae)榅桲屬(Cydonia)的果樹［1］，是維吾爾醫應用歷史悠久的常用藥材之一。維文名為比葉(Biye)，別名為蠻檀，英文名Quince。據《新疆維吾爾藥志》及《維吾爾常用藥材學》記載，榅桲Cydonia oblanga Miller除了降血壓、調血脂等作用外，還有補血、補腦、補腎、止咳、止瀉、利尿、治胃病、肝病、頭暈、心慌、治療月經不調、心臟病等功效，其溫中解暑、消食除脹，治療中暑吐瀉，消化不良、關節疼痛等疾病［2］。

本課題組前期通過對榲挬提取物的藥理實驗研究，發現COM具有強大的抗凝血和纖溶作用。本實驗進一步研究榲挬提取物的抗動、靜脈血栓作用和對大鼠血漿中6-酮-前列腺素 F1a(6-keto-PGF1a)，TXB2的影響。

1 儀器、材料、動物

1.1 藥品與試劑 榅桲提取物(新疆醫科大學藥學院藥理教研室提供)，阿司匹林(Sigma，No 2000641)，銀杏葉片(天津天士力制藥有限公司，批號259)，6-keto-PGF1a放免試劑盒(北京普爾偉生物科技有限公司，批號S 10950216)，TXB2放免試劑盒(北京普爾偉生物科技有限公司，批號 S 10950213)。

1.2 儀器 BL1500電子天平(北京賽多利斯儀器系統有限公司)，KH-120M型臺式高速離心機(上海安亭科技儀器廠)，秒表(上海秒表廠)，分析天平(梅特勒-托利多儀器廠)，SK8210HP超聲儀(上海科導儀器廠)，自動放免儀(中國科大中佳公司)。

1.3 動物 Wistar大鼠，♂性，49只，體重300～350 g，清潔級，均由新疆醫科大學實驗動物中心提供，動物合格證字號(SYXK2003-0001)。

2 試驗方法

2.1 榅桲水提取物對大鼠頸動脈栓塞的影響［3-5］Wistar大鼠，♂性，49 只，體重300 ～350 g，隨機分為7個組:生理鹽水組(假手術組)，模型組，榅桲提取物小、中、大劑量(20、40、80 mg/kg)組，阿司匹林組(5 mg/kg)和銀杏葉片組(20 mg/kg)，連續灌胃給藥14 d，在末次給藥1 h后，后腹腔注射3%巴比妥0.5 mL/100 g，將麻醉大鼠，在無菌條件下，將大鼠仰臥位固定于解剖架上，頸部剪毛，常規碘酒酒精消毒，鋪巾后沿頸前正中線做長約3 cm切口，分離其左頸總動脈2 cm，其下置小片塑料薄膜(3 cm×1.5 cm)用于保護血管周圍組織，將血管測溫儀置于已分離的頸動脈遠心端，記錄其溫度后將吸有40%FeCl3溶液的小濾紙片(1 cm×1 cm)敷于左頸動脈上［6-9］。

假手術組用吸有生理鹽水的小濾紙片敷于左頸動脈上。記錄從敷上濾紙片開始頸總動脈表面溫度突降所需時間，即頸總動脈血栓形成時間，即為堵塞時間(occluson time，OT)。用濾紙吸取殘血，稱血栓重量及計算血栓抑制率。

表1 榅桲提取物對FeCl3致大鼠頸動脈栓塞形成的影響(±s，n=7)

表1 榅桲提取物對FeCl3致大鼠頸動脈栓塞形成的影響(±s，n=7)

與模型組比較，*P＜0.01。

/%生理鹽水組組別 動物數/只 劑量/(mg/kg) OT/min 血栓重量/mg 抑制率7----模型組 7 - 8.71±1.20 15.15±0.59 -銀杏葉片組 7 20 15.77±4.07* 7.14±1.23* 52.90*阿司匹林組 7 5 19.49±2.52* 6.40±1.53* 57.76*小劑量組 7 20 26.96±3.85* 9.93±1.72* 34.44*中劑量組 7 40 33.28±5.98* 6.96±1.62* 54.04*大劑量組 7 80 40.74±5.80* 5.37.±1.48* 64.52*

2.2 榅桲提取物對大鼠靜脈栓塞的影響［6-10］Wistar大鼠，♂性，49只，體重300～350 g，動物分組，給藥，麻醉方法同2.1項。在無菌條件下，將大鼠仰臥位固定于架上，腹部剪毛，常規碘酒酒精消毒，鋪巾后沿腹部正中切開大鼠腹壁，分離下腔靜脈，并于左腎靜脈下方預置絲線，備結扎用。結扎下腔靜脈關閉好腹腔，結扎后4 h重新打開腹腔，于結扎線下方2 cm處夾閉血管，同時結扎靜脈側枝，縱行剖開血管，觀察有無血栓形成，若血栓形成，用濾紙吸取殘血，稱血栓重量及計算血栓抑制率。結果見表2。

表2 榅桲提取物對大鼠靜脈栓塞的影響(±s，n=7)

表2 榅桲提取物對大鼠靜脈栓塞的影響(±s，n=7)

與模型組比較，*P＜0.01。

抑制率/%生理鹽水組組別 動物數/只劑量/(mg/kg)血栓重量/mg 7---模型組 7 - 19.35±9.51 -銀杏葉片組 7 20 7.76±2.43* 59.88*阿司匹林組 7 5 6.53±1.77* 66.27*小劑量組 7 20 10.89±4.02* 43.74*中劑量組 7 40 7.46±2.20* 61.43*大劑量組 7 80 4.96±2.13* 74.35*

2.3 榅桲提取物對對大鼠TXB2和6-kato-PGF1a含量的影響［11-12］Wistar大鼠，♂性，49只，體重300～350 g，動物分組，給藥，麻醉及手術方法同2.2項。在無菌條件下，造模90 min后，快速分離腹主動脈，取一次性1 mL注射器吸取消炎痛-EDTA.Na2液約1 mL備用，取一次性3 mL抽血管快速腹主動脈穿刺取血3 mL，即刻將消炎痛-EDTA.Na2液0.2 mL注入抽血管內，顛倒混勻，4℃離心3 500 r/min，15 min，分離血漿，-20℃保存。采用放射免疫法檢測大鼠血漿中的6-酮-前列環素(6-keto-PGF1a)、血栓素B2(TXB2)含量。結果見表3。

表3 榅桲提取物對大鼠血漿中TXB2和6-kato-PGF1a含量的影響(±s，n=7)

表3 榅桲提取物對大鼠血漿中TXB2和6-kato-PGF1a含量的影響(±s，n=7)

與模型組比較，*P＜0.05。

組別 動物數/只劑量/(mg/kg)6-keto-PGF1a/(pg/mL)TXB2/(pg/mL)7 - 593.96±357.89 242.20±117.40模型組 7 - 267.22±255.05 717.32.±299.21銀杏葉片組 7 20 498.80±30.98* 255.25±199.68*阿司匹林組 7 5 170.60±103.77 78.21±42.47*小劑量組 7 20 558.52±314.22 411.01±225.02中劑量組 7 40 334.77±156.02* 191.55±154.36*大劑量組 7 80 384.42±334.22* 91.59.±62.04生理鹽水組*

3 結果

3.1 榅桲水提取物對大鼠頸總動脈栓塞的影響結果如表1顯示，與模型組相比，榲桲提取物各劑量組均顯著延長OT，顯著減輕動脈血栓重量(P＜0.01)。榲桲提取物小、中、大劑量組的血栓抑制率為34.44%、54.04%、64.52%。表明榅桲提取物能延長OT，抑制動脈血栓形成。

3.2 榅桲提取物對大鼠靜脈栓塞形成的影響 結果如表2顯示，與模型組相比，榲桲提取物各劑量組顯著減輕靜脈血栓重量(P＜0.01)。榅桲提取物小、中、大劑量組靜脈血栓抑制率分別為43.74%、61.43%、74.35%。表明榅桲提取物能顯著抑制靜脈血栓形成，且呈較好的量效關系。

3.3 榅桲提取物對大鼠血漿中TXB2和6-kato-PGF1a含量的影響［13，14］結果如表 3 顯示，與生理鹽水組相比，模型組6-keto-PGF1a含量顯著降低(P＜0.05)，且TXB2含量顯著升高(P＜0.05);與模型組相比，榲桲提取物小、中、大劑量組均明顯降低TXB2含量，升高6-keto-PGF1a的含量(P＜0.05)。

4 討論

FeCl3可損傷血管內皮損傷誘發血小板黏附和聚集，促進血栓形成。靜脈結扎使局部血流瘀滯都能引起血管內皮細胞損傷，低氧，可激活凝血因子和凝血酶在局部達到凝血過程所需的濃度，啟動內源性凝血系統，內皮細胞變性壞死，使血管內皮下的膠原暴露于血流，可激活內源性和外源性凝血途徑使凝血酶、凝血因子活化，使凝血功能亢進。因血管內皮細胞損傷使PGI2合成減少，血漿TXA2合成增加，進一步促進血小板黏附和聚集，TXA2-PGI2間平衡失調，可引起血管收縮，血小板聚集，促進血栓形成。

榅桲提取物各劑量組與模型組比較，均顯著延長了OT(P＜0.01);顯著減輕動脈和靜脈血栓重量(P＜0.01)。均明顯降低TXB2含量(P＜0.05)，升高血漿中6-keto-PGF1a的含量(P＜0.05)。實驗結果充分證明，榅桲提取物具有抗血栓作用，其作用可能是通過抑制TXA2合成酶，從而使TXA2生成減少，提高6-kato-PGF1a而產生PGI2的途徑增強，從而維持TXA2-PGI2間平衡，促進血管擴張，抑制血小板聚集而抑制血栓形成。榅桲提取物抗動脈血栓作用與抑制血小板黏附和聚集有關;抗靜脈血栓形成作用與抑制凝血酶、凝血因子有關。榅桲提取物具有較強的抗動、靜血栓作用，在抗血栓方面有一定的開發利用價值。

［1］茹克婭·沙德克.維吾爾常用藥材學(上冊)［M］.烏魯木齊:新疆科技衛生出版社，1993:233.

［2］新疆維吾爾自治區衛生廳，維吾爾藥材標準(上冊)［M］.烏魯木齊:新疆科技衛生出版社，1991:183.

［3］kurz K D，Main B W，Sandusky G E Ratmodel of arterial thrmbosis induced by ferric chloride［J］.Throm B Res，1990，60(4):269-280.

［4］劉小光，徐理納.一種能評價溶栓和抗栓藥的大鼠大腦中動脈血栓模型［J］.藥學學報，1995，30(9):622-667.

［5］張玉珍.銀杏葉提取物(EGB)對大鼠局部腦缺血及頸靜脈血栓形成的保護作用［J］.藥學學報，1998，33(12):901-905.

［6］劉 瑜，董小黎.血栓動物模型的建立［J］.首都醫科大學學報，2002，23(3):871-872.

［7］張 浩.血栓形成動物模型研究進展［J］.浙江中西醫結合雜志，2007，17(4):462-464.

［8］Reyer L.Failure of asprin at different doses to modify experimental thrombsis in rat［J］.Thromb Res，1980，18(5):669-674.

［9］蔣 辛，趙良中，張海龍，等.原花青素對大鼠實驗性血栓形成的影響［J］.中國實驗血液學雜志，2007，15(3):617-620.

［10］Rhodes J M，Cho J S，Gloviczld P，et al.Throm bo lysis for experimental deep venous throm bo sis maintains valvular competence and vasoreactivtiy［J］.Vasc Surg，2000，31(6):1193-1205.

［11］徐叔云，卞如源，陳 修主編.藥理學實驗方法［M］.第3版.北京:人民出版社，2005:1270-1273.

［12］Shan CW，Lin J H，Jin YH lnhibitory effects of prcainamide on rabbit plaelet aggregation and thromboxane B2production in vitro［J］.J Acta Pharmacol Sin，1991，19:164-166.

［13］金云海，單春文，程遠遠，等.花椒油素滴肺血栓及6-酮-前列腺素F1a和血栓素 B2的影響［J］.中藥新藥與臨床藥理，2000，11(2):88-98.

［14］鄧偉峰，趙偉杰，呂 莉，等.烏蘇瑞寧的抗血栓作用［J］.中草藥，2007，38(12):1836-1838.