卵巢上皮性癌組織中磷酸化信號轉導及轉錄活化因子3和 K i 67蛋白的表達

馬洪濤,史艷平,封全靈

鄭州大學第三附屬醫院婦產科鄭州 450052

△男,1963年生,本科,副主任醫師,研究方向:婦科腫瘤,E-mail:mahongtaohn@163.com

信號轉導及轉錄活化因子(signal transducers and activators of transcription,STAT)是一類DNA結合蛋白,STAT3信號轉導通路直接影響細胞的增殖、分化及凋亡過程,尤其是磷酸化的STAT3(p-STAT3)調控著細胞異常增殖和惡性轉化,在多種腫瘤組織中存在異常表達,其基因被確認為癌基因[1]。Ki67是一種與細胞增殖相關的核抗原,能準確反映細胞增殖狀態,與惡性腫瘤的發生、轉移及預后密切相關[2]。作者采用免疫組織化學法檢測了卵巢上皮性癌組織中p-STAT3和Ki67蛋白的表達,探討 2者在卵巢上皮性癌發生發展中的作用。

1 材料與方法

1.1 標本來源 收集河南省腫瘤醫院和鄭州大學第三附屬醫院 2007年 7月至 2008年 6月行手術切除的卵巢組織共 85例,患者年齡 32～68歲。85例中卵巢上皮性癌 35例 (高分化 11例,中分化 12例,低分化 12例;有淋巴結轉移 20例,無淋巴結轉移15例;FIGO分期:Ⅰ期9例,Ⅱ期10例,Ⅲ期13例,Ⅳ期3例),良性卵巢上皮性腫瘤20例(漿液性10例,黏液性 10例),正常卵巢組織 30例,均經病理學檢查證實。所有病例術前均未接受放、化療或免疫治療。

1.2 p-STAT3和Ki67蛋白檢測 兔抗人p-STAT3和Ki67單克隆抗體均購自北京中杉生物科技有限公司。組織標本經中性甲醛液固定,常規石蠟包埋切片。采用免疫組織化學SP法,p-STAT3和Ki67一抗工作液濃度均為 1∶50,操作步驟按照試劑盒說明書進行。以人乳癌和食管癌組織標本為陽性對照,以PBS代替一抗作為陰性對照。陽性著色呈棕色或棕褐色。20倍鏡下應用上海山富科學儀器有限公司的Biosens Digital Imaging System圖像分析儀進行灰度計算,采用平均灰度值表示 2種蛋白的染色強度。

1.3 統計學處理 采用SPSS 13.0處理數據。采用單因素方差分析比較3種組織中p-STAT3和Ki67表達的差異,采用單因素方差分析或 t檢驗分析卵巢上皮性癌組織中p-STAT3和Ki67的表達與臨床病理因素的關系,采用Spearman相關分析判斷卵巢上皮性癌組織中p-STAT3和Ki67表達的相關性,檢驗水準α=0.05。

2 結果

2.1 3種卵巢組織中p-STAT3和Ki67的表達

結果見圖 1、表 1。

圖1 3種組織中p-STAT3和K i67蛋白的表達(SP,×400)上排:p-STAT3蛋白;下排:Ki67蛋白;A,D:正常卵巢組織;B,E:良性卵巢上皮性腫瘤組織;C,F:卵巢上皮性癌組織。

表1 3種卵巢組織中p-STAT 3和K i67蛋白的表達

2.2 卵巢上皮性癌組織中p-STAT3和Ki67蛋白的表達與臨床病理因素的關系 見表 2。可知,卵巢上皮性癌組織中p-STAT3和Ki67的表達與臨床分期、分化程度及淋巴結轉移有關。

2.3 卵巢上皮性癌組織中p-STAT 3和Ki67蛋白表達的相關性 卵巢上皮性癌組織中p-STAT3和Ki67的表達水平呈正相關(rS=0.563,P＜0.001)。

表2 卵巢上皮性癌組織中p-STAT 3和K i67蛋白的表達與臨床病理因素的關系

3 討論

STAT3是近年來研究的熱點之一,當細胞因子或生長因子激活其上游Janus激酶時,STAT3激活并形成p-STAT3,兩分子p-STAT3相互作用形成二聚體進入胞核,調節靶基因轉錄[3-4]。研究[5]表明肺癌、胰腺癌、惡性黑色素瘤、前列腺癌、胃癌及淋巴瘤等多種腫瘤組織與細胞系中STAT3異常表達和激活,提示STAT3在腫瘤進展中起著重要作用。該研究結果顯示,卵巢上皮性癌、良性卵巢上皮性腫瘤和正常卵巢組織中均有STAT3的活化,但卵巢上皮性癌組織和良性卵巢上皮性腫瘤組織中p-STAT3蛋白的表達水平高于正常卵巢組織,提示其異常活化可能促進了細胞過度增殖和惡性轉化。此外,該研究結果還顯示,p-STAT3的表達可能與卵巢上皮性癌的臨床分期、分化程度及淋巴結轉移有關,提示p-STAT3的表達水平與卵巢上皮性癌的發生及惡性生物學行為密切相關,惡性程度越高,臨床分期越晚,則p-STAT3的表達水平越高。

Ki67是增殖細胞核相關抗原,與細胞的有絲分裂密切相關。近來的研究[6]發現多種人類惡性腫瘤組織中有 Ki67的過度表達。有學者[7]認為ki67本身并不是原癌基因,它只是腫瘤過度增殖要求并導致了Ki67的過度表達,即Ki67的過度表達僅僅是惡性腫瘤的特征表現;Ki67作為標記細胞增殖狀態的抗原,與惡性腫瘤的發生、轉移及預后密切相關,被認為是反映細胞增殖活性的理想指標。該研究結果顯示,正常卵巢組織、良性卵巢上皮性腫瘤組織和卵巢上皮性癌組織中 Ki67的表達水平呈升高的趨勢,且Ki67的表達水平與卵巢上皮性癌的臨床分期、分化程度及淋巴結轉移有關,提示 Ki67與卵巢上皮性癌的發生、發展與轉移密切相關。

此外,相關分析結果顯示,卵巢上皮性癌組織中p-STAT3和Ki67的表達呈正相關,即p-STAT3表達水平越高,腫瘤細胞增殖越活躍,分析原因為STAT3異常活化后通過調控凋亡抑制基因、促腫瘤生長基因以及細胞周期素等的表達,直接或間接促進細胞異常增殖和惡性轉化,存在過度增殖的腫瘤細胞則表現出 Ki67過度表達[5]。

總之,卵巢上皮性癌組織中存在STAT3的異常活化與Ki67表達增加,聯合檢測2者有助于判斷卵巢上皮性癌的惡性程度和預后。

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