江國榮 張露蓉 嚴 煒 任光榮 南京中醫藥大學附屬蘇州市
中醫醫院藥劑科,中藥研究所(蘇州215003)
酒精性肝病在我國的發病率迅速增加,已成為危害國民健康的重大疾病。M ANN.R.E[1]等調查顯示:重度飲酒者中80%有一定程度的酒精性脂肪肝,其中10%~ 35%可發展成酒精性肝炎和酒精性肝硬化[2]。酒精性脂肪肝肝臟損傷初期,也是臨床防止該病病情進一步發展的重要環節,目前對酒精性脂肪肝的治療仍以戒酒、營養支持為主。本文在中醫臨床驗方保肝湯對酒精性脂肪肝具有防治作用的基礎上,進一步從肝脂質過氧化和 CYP2E1表達角度,探討保肝湯防治酒精性脂肪肝的作用機制,從而為提高臨床療效提供進一步的依據。
1 材 料 1.1 儀器 5810R型高速冷凍離心機(德國Eppendorf公司);FSH-2A可調高速均漿機(江蘇金壇市醫療儀器廠);GeneAmP2400型 PCR儀 (美國 Perkin Elmer公司);Power PAC2000電泳儀 (Biorad公司);數碼凝膠圖像處理系統(GIS2008H)(上海天能科技有限公司)。
1.2 試藥 保肝湯(丹參、山楂、葛根、決明子、三七等 ,飲片由蘇州春暉堂飲片廠提供,由本實驗室提取為相當于 1g生藥?mL-1的提取液);硫普羅寧片(河南省新誼藥業股份有限公司 ,國藥準字號 H10980086);丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶 (SOD)試劑盒 (南京建成生物工程研究所);兔抗鼠 CYP2E1試劑盒(武漢博士德生物工程有限公司);免疫組化生物二抗試劑盒(上海基因科技有限公司);Trizol(美國 Invitrogen公司);RevertAidTM First Strand cDNA Synthesis Kit(Fermentas公司);自制飼料:采用普通飼料:豬油=85:15,充分混勻,制成成型飼料。
1.3 動物 清潔級 Wistar大鼠 ,雄性,體重 180±20g,購于浙江省實驗動物中心。
2 方 法 2.1 大鼠酒精性脂肪肝模型的建立 參照文獻[3]建立酒精性脂肪肝大鼠模型:前 3d以 15% (體積比 )白酒代替水給予飲用 ,第4天起按15mL? kg-1灌服52%(體積比)白酒,每日 1次;同時給予自制飼料,自由飲水。……