C-myc基因和 P16基因在結腸癌中的表達及其臨床意義

陸 毅

(長春市人民醫院普外科,吉林 長春 130051)

在惡性腫瘤的發生發展過程中,原癌基因的激活和(或)抑癌基因的失活起著重要作用,結腸癌的發生和演變過程同樣伴隨著多種分子事件的發生〔1〕。原癌基因 C-myc可以使細胞無限增殖,獲得永生,并能促進細胞的分裂,與多種腫瘤發生發展有關〔2,3〕。而 P16基因作為一個重要的腫瘤抑制基因,直接參與細胞周期的調控,負調節細胞增殖及分裂。本研究檢測 60例結腸癌患者的 C-myc基因和P16基因的表達情況,并探討其臨床意義。

1 材料與方法

1.1 研究對象 收集 2003年 3月至 2007年 9月我科行結腸癌根治術的結腸癌標本 60例,其中男 45例,女 15例,年齡35～86(平均 67)歲。全部病例均由組織學病理確診,術前均未行放療及化療。原發灶組織學分級:中高度分化 45例,低分化 15例。腫瘤分期:Ⅰ期 5例,Ⅱ期 12例,Ⅲ期 25例,Ⅳ期 18例。轉移情況:淋巴結轉移 35例,無淋巴結轉移 25例。選擇 40例距腫瘤邊緣 ＞5 cm、病理組織檢查為正常的癌旁組織為對照組。

1.2 試劑與方法 C-myc基因及 P16基因單克隆抗體和免疫組化(SABC法)試劑盒均購自美國 California Biotech Inc公司。免疫組化方法按試劑盒說明書操作。PBS代替第一抗體作為陰性對照,已知肝癌組織作為陽性對照。

1.3 結果判定 細胞核和/或細胞質呈明顯棕黃色反應即為陽性。陽性細胞計數:每個標本切片選取 5個高倍視野(400倍)作陽性細胞計數;以超過 10%細胞呈清晰棕褐色為陽性(+),超過 50%細胞呈清晰棕褐色為強陽性(?),低于10%表達或細胞無棕黃色染色為陰性(-)。

1.4 統計學處理 數據用率或百分比表示,采用SPSS11.5進行統計學處理,組間比較用χ2檢驗。

2 結 果

2.1 結腸癌組織中 C-myc基因和 P16基因的表達 C-myc基因在結腸癌組織中的表達 40例(66.7%),明顯高于癌旁組織12例(30.0%)(P＜0.05);P16基因則在癌旁組織中表達 32例(80.0%)明顯高于結腸癌組織 24例(40.0%)(P＜0.05)。

2.2 C-myc基因和P16基因表達與結腸癌臨床特征的關系見表 1。C-myc、P16基因的表達與結腸癌浸潤深度、淋巴結轉移、腫瘤分期密切相關(P＜0.05);與年齡、性別、腫瘤大小、組織學類型和分化程度無關(P＞0.05)。

表1 C-myc基因和 P16基因表達與結腸癌臨床特征的關系

3 討 論

C-myc可以在多種腫瘤組織中存在,作為一種轉錄因子,是正常細胞生長和增殖所必需的。它影響基因表達的能力是其促進腫瘤發育的手段,同時它也可以通過影響DNA的復制而影響腫瘤的發生與發展。本研究顯示 C-myc基因在結腸癌組織中高度表達,癌旁組織中的表達明顯下降;C-myc基因的表達與結腸癌浸潤深度、淋巴結轉移、腫瘤分期密切相關,與年齡、性別、腫瘤大小、組織學類型和分化程度無關。這提示 C-myc基因的表達增強與結腸癌的發生發展有著密切關系,同時可以作為判斷結腸癌有否轉移的指標之一。

正常情況下抑癌基因產物可以抑制細胞增殖,促進細胞分化和抑制細胞遷移〔4,5〕。當人體收到大多數的環境致病因素如飲食、病毒、化學物質、射線等致癌因素的影響后,P16基因的抑癌作用減弱,則可引發腫瘤。本研究結果顯示,P16基因在結腸癌組織中表達的陽性率明顯低于癌旁組織,說明結腸癌與癌旁組織在 P16蛋白表達水平上存在差異。另外 P16陽性率與 TNM分期也存在一定的相關性,這與文獻報道一致〔6〕。淋巴結轉移組 P16陽性率明顯低于無淋巴結轉移組,提示P16異常在結腸癌轉移過程中可能起著不可忽視的作用。本實驗還發現癌組織浸潤深度越深P16表達陽性率越低,說明 P16蛋白的表達與癌組織浸潤深度可能有相關性。

結腸癌的惡性轉化是由一系列細胞周期調控蛋白基因的遺傳性改變引起的,聯合檢查C-myc與 P16基因表達對預測結腸癌淋巴結轉移情況、評價預后具有指導價值。

1 Calvert PM,Frucht H.The genetics of colorectal cancer〔J〕.Ann Intern Med,2002;137(7):603-12.

2 Jonas JC,Laybutt DR,Steil GM,et al.High glucose stimulates early response gene c-myc expression in rat pancreatic beta cells〔J〕.J Biol Chem,2001;276(38):35375-81.

3 Fields WR,Desiderio JG,Putnam KP,et al.Quantification of changes in c-myc mRNA levels in normal human bronchial epithelial(NHBE)and lung adenocarcinoma(A549)cells following chemical treatment〔J〕.Toxicol Sci,2001;63(1):107-14.

4 Kamb A,Gruis NA,Weaver-Fdldhaus J,et al.A cell cycle regulator potentially involved in genesis of many tumor types〔J〕.Science,1994:264-436.

5 Nobefi T,Miura K,Wu DH,et al.Deletion of the cyclin dependent kinase inhibitor gene in multiple human cancers〔J〕.Nature,1994;368:763.

6 Andres A,Maria J.Double versus single renal allografts from aged donors〔J〕.Transplatation,2000;69:2060.