不同培養基對硫酸慶大霉素注射液含量的影響

何作民，申 放，黃旺潮

（廣東省佛山市藥品檢驗所，廣東 佛山 528000）

硫酸慶大霉素為氨基苷類抗生素，2005年版《中國藥典（二部）》規定[1]其含量測定方法為抗生素微生物檢定法，包括管碟法和濁度法。管碟法是目前最常用的方法。由于管碟法測定抗生素效價的影響因素較多，除檢驗操作技術、抑菌圈的測量、供試品與標準品溶液的配制等人為因素外，培養基的質量也是重要的影響因素之一。鑒于目前生產干粉培養基的廠家較多，為探討培養基對檢定結果的影響情況，筆者對使用的干粉培養基進行了比對檢測分析，報道如下。

1 儀器與試藥

ZY-300IV型多功能微生物自動測量分析儀（北京先驅威鋒技術開發公司）；Metlier AE240型電子天平；HHBⅡ420型電熱恒溫培養箱。硫酸慶大霉素注射液（規格為2 mL∶4萬單位，批號為0601022，市售品）；慶大霉素標準品（中國藥品生物制品檢定所，批號為130326-200314）；培養基為干粉抗生素檢定培養基I號（A廠產品批號分別為 050304，060328，060613，060614；B 廠產品批號為20060213）；磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉均為分析純；短小芽孢桿菌[CMCC（B）63202]（中國藥品生物制品檢定所）。

2 方法與結果

2.1 溶液制備

精密量取硫酸慶大霉素注射液，精密稱取慶大霉素標準品適量，分別加滅菌水定量制成每1 mL中約含1 000單位的溶液，臨用前用滅菌磷酸鹽緩沖液（pH=7.8）稀釋至每1 mL含5單位和10單位的溶液，作為供試品溶液和標準品溶液。

2.2 培養基配制

稱取干粉抗生素檢定培養基I號適量，按說明書配制，調節最終pH為7.9～8.0。

2.3 檢驗方法

按照《中國藥典（二部）》抗生素微生物檢定法（附錄ⅪA）管碟法的二劑量法，以短小芽孢桿菌為試驗菌，以干粉抗生素檢定培養基I號為檢定培養基，用ZY-300 IV型多功能微生物自動測量分析儀測量抑菌圈，硫酸慶大霉素注射液按慶大霉素計算標示量的百分含量，將符合藥典要求的試驗結果進行數據統計分析。

2.4 檢驗結果

采用不同廠家及同一廠家不同批號的培養基檢測硫酸慶大霉素注射液的含量，比較不同批號間的結果差異，結果見表1。兩人采用同一批號培養基，在相同條件下檢測硫酸慶大霉素注射液的含量，比較不同人員測定結果的重現性，結果見表2。

表1 采用不同廠家及同一廠家不同批號培養基的測定結果

表2 不同操作人員檢測結果

3 討論

從測定結果可見，不同廠家與同一廠家生產不同批號的培養基檢測結果均有差異，其中A廠家060613批與B廠20060213批產品的平均含量相差超過5%；同廠家生產的不同批號培養基測定的結果也有明顯差異，其中050304批與060613批產品的平均含量相差4%。不同人采用同一批號培養基在相同條件下檢測同一批的供試品，結果差異不明顯，重現性較好。

目前，培養基生產廠家較多，各廠家所選用的原料、生產工藝和條件、控制培養基的pH等不同，即使同一廠家不同批次的產品也會有差別，這將會導致不同廠家或同一廠家生產不同批號的培養基質量會有一定的差異。由于培養基質量的差異會直接影響抗生素效價檢測結果的準確性，尤其對仲裁或判斷邊緣產品是否符合規定時加大了難度。因此，筆者認為，培養基除用于藥品檢驗外，還廣泛用于醫院臨床檢驗、預防醫學、動植物檢驗、微生物學等各領域，為了減少由培養基引起的實驗誤差，建議對各種培養基特別是用于含量測定的培養基制訂國家質量標準。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（二部）[M].北京：化學工業出版社，2005：731，附錄Ⅺ.