骨髓鐵染色三種復染劑的方法學比較

張姝 劉詠酶 黃健

(貴陽醫學院醫學檢驗系臨床檢驗教研室,貴州貴陽 550004)

骨髓鐵染色三種復染劑的方法學比較

張姝 劉詠酶 黃健

(貴陽醫學院醫學檢驗系臨床檢驗教研室,貴州貴陽 550004)

目的探討不同的復染試劑對骨髓鐵染色效果的影響。方法每例患者收集三張骨髓涂片,分別用瑞氏、沙黃、核固紅三種復染劑進行鐵染色,觀察骨髓小粒及幼紅細胞中鐵的分布情況。結果三種染色方法進行比較,細胞外鐵的陽性率相同,細胞內鐵染色結果無顯著性差異。結論三種復染方法中推薦采用瑞氏復染,因其鐵顆粒較易觀察,且染色時間較短、操作簡便。

復染試劑 鐵染色

骨髓鐵染色是評估鐵缺乏最實用的方法,臨床常被用作鑒別貧血類型。鐵染色對診斷缺鐵與非缺鐵、鐵負荷增加及鐵利用障礙等貧血具有重要價值[1]。臨床上常用核固紅作為鐵染色的復染試劑,而對其他復染試劑的相關報道較少見。為了探討不同的復染試劑對骨髓鐵染色效果的影響,現將我院2007年11～12月的30份骨髓標本分別采用核固紅、瑞氏和沙黃三種不同的染液進行復染結果報告如下。

1 對象與方法

1.1 對象 2007年11～12月在我院就診的30例血液病患者的骨髓標本,男15例,女15例,年齡9～76歲,平均40.5歲。

1.2 方法

1.2.1 先將載玻片去鐵處理,分別采集患者骨髓液,制備三張骨髓涂片,用酸性的亞鐵氰化鉀染色,然后再用核固紅、瑞氏和沙黃三種不同的復染劑進行復染,最后用顯微鏡觀察骨髓內鐵和外鐵,將三種方法所得的結果分組記錄,診斷標準參考《臨床血液學和血液學檢驗》[2]。

1.2.2 干燥骨髓涂片用甲醇固定10 min,待干;玻片上滴酸性亞鐵氰化鉀20滴,37℃染色30 min;用蒸餾水沖洗后分別用瑞氏染液、沙黃染液和核固紅染液復染;流水沖洗,待干,鏡檢。

1.3 統計學方法 采用t檢驗

2 結果

2.1 30例骨髓標本分別用瑞氏、沙黃和核固紅三種復染試劑進行復染后細胞外鐵的染色結果基本相同(表1)。

表1 三種復染方法細胞外鐵染色結果比較(例)

2.2 30例骨髓標本細胞內鐵陽性率通過t檢驗進行比較,P值均＞0.05,故三種方法的細胞內鐵染色結果差異均無顯著性意義(表2)

表2 三種復染方法細胞內鐵染色結果比較

3 討論

骨髓內外鐵染色是進行貧血分類的常用組織化學染色方法,是評估鐵缺乏最實用的方法,儲存鐵(主要位于骨髓組織,又稱細胞外鐵)、幼紅細胞鐵(又稱細胞內鐵),由于二者可通過染色識別,故被稱為可染鐵,臨床上常被用作鑒別貧血類型[3];缺鐵性貧血時骨髓外鐵陰性、內鐵陽性率低,而巨幼細胞性貧血時外鐵陽性、內鐵陽性率高[4];鐵染色對貧血的鑒別診斷有非常重要的作用。因此,選擇比較好的染色方法,對結果觀察有一定的影響。

本組資料表明,使用三種復染液細胞外鐵結果相同,細胞內鐵陽性率差異無顯著意義。目前臨床上采用的復染液為核固紅,使用核固紅復染液在有些情況下鐵顆粒較小不易辨認,就會使陽性率降低,并且核固紅復染所需時間長,在氣溫較低時需要更長的時間,這樣就會耽誤診斷;本研究使用沙黃進行復染,發現沙黃染液效果與核固紅大致相同,但沙黃復染的時間較難控制,復染一般只需2～3 min,需嚴格控制時間,否則時間稍長就會導致細胞結構不明顯,影響觀察結果。另外,使用瑞氏染液進行復染,這種方法所需要的時間較短,操作簡便,提高了工作效率,根據實驗觀察,使用瑞氏染液可將細胞胞核、胞漿染得非常清晰,細胞很容易區別開,特別是在觀察細胞內鐵時,幼紅就非常明顯,藍色鐵顆粒容易辨認。此外,臨床上如果使用鐵染色和常規瑞氏染色瑞氏復染,可以將兩者合二為一,這樣可大大提高工作效率。

[1]周建中.巨幼細胞貧血與再生障礙性貧血鐵染色特征[J].國際輸血及血液學雜志,2007,30(1):20-21.

[2]譚齊賢,張樹干.臨床血液學和血液檢驗[M].第3版.北京:人民衛生出版社,2006:58.

[3]張英波,萬樹棟.鐵染色在鑒別幾種形態相似貧血中的應用[J].實用醫技雜志,2007,14(6):718.

[4]郝影蘭,盧玉霞.骨髓鐵染色在疾病診斷中的應用[J].中國臨床醫藥雜志,2005,4(3):66-67.

Complex reagent Stained Iron stain reagent

張姝(1980-),女,本科,碩士,助教,從事臨床檢驗工作

R472,R446.1

B

1002-6975(2010)02-0164-02

2009-08-19)