化學(xué)試劑帶法與單克隆金標(biāo)法測(cè)定糞便隱血試驗(yàn)的評(píng)價(jià)

劉亮 周清

742200 甘肅省禮縣第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 (劉亮 周清)

糞便隱血主要是指消化道出血量少，肉眼不見(jiàn)得血色，而且少量紅細(xì)胞又被消化分解，以至顯微鏡下也無(wú)從發(fā)現(xiàn)的出血狀況而言，糞便隱血試驗(yàn)已被臨床視為消化道出血的重要檢測(cè)指標(biāo)[1]，其檢測(cè)的方法有多種，主要分為化學(xué)法和免疫學(xué)法兩大類，以前是以化學(xué)法為主，近年來(lái)為了此項(xiàng)目試驗(yàn)準(zhǔn)確性和特異性，免疫學(xué)法已經(jīng)得到了進(jìn)一步的肯定，因此本文對(duì)化學(xué)試劑帶法與單克隆金標(biāo)法在臨床上進(jìn)行了試驗(yàn)對(duì)比，對(duì)臨床治療有一定的意義[2]。

1 材料與方法

1.1 試劑

1.1.1 化學(xué)試劑帶法 由廣州市越秀東方科技研究所提供批號(hào)，Q/19G2DF01—1997。

1.1.2 單克隆金標(biāo)法 由萬(wàn)華普曼生物工程有限公司(“速而準(zhǔn))批號(hào)，(1998)京萬(wàn)S～01號(hào)。

1.2 糞便隱血的操作法

1.2.1 化學(xué)試劑帶的操作方法見(jiàn)試劑盒的說(shuō)明。

1.2.2 單克隆金標(biāo)糞便隱血一步檢驗(yàn)法，操作方法見(jiàn)試劑說(shuō)明書。

1.3 標(biāo)本來(lái)源 150例糞便標(biāo)本為西安市第一醫(yī)院住院病人送檢標(biāo)本，特異性試驗(yàn)的血紅蛋白及肌紅蛋白懸液均由人、豬、牛、雞、兔、魚的血液及肌肉制成。

2 結(jié)果

2.1 敏感性對(duì)比試驗(yàn) 用化學(xué)試劑帶法與單克隆金標(biāo)法同時(shí)檢測(cè)150例病人糞便標(biāo)本結(jié)果見(jiàn)表1。

化學(xué)試劑帶法的糞便隱血陽(yáng)性總數(shù)為58例，占39%，單克隆金標(biāo)法陽(yáng)性總數(shù)35例，占23%。

統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：U＝2.87＞2.58(P＜0.01)P＜0.01,兩種方法測(cè)定陽(yáng)性率有顯著差異。

2.2 準(zhǔn)確性與特異性的試驗(yàn)對(duì)比 取人及5種動(dòng)物各3份(表2)分別用其血液及肌肉組織制成含有血紅蛋白及肌紅蛋白的懸液按其規(guī)定的方法同時(shí)進(jìn)行試劑帶法和單克隆金標(biāo)法的血隱實(shí)際測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表2。

表1 兩種方法測(cè)定糞便隱血試驗(yàn)結(jié)果比較

表2 化學(xué)試劑帶法與單克隆金標(biāo)法糞便隱血試劑敏感性及特異性的比較

3 討論

糞便隱血檢查對(duì)消化道出血診斷有重要的價(jià)值，在消化道潰瘍時(shí)陽(yáng)性率為40%～70%，消化道癌癥時(shí)陽(yáng)性率可達(dá)95%，糞便隱血試驗(yàn)是作為消化道惡性腫瘤有重要意義，此外在流行性出血熱的糞便中，其隱血試驗(yàn)陽(yáng)性率占84%，也是該病的重要憑證，所以糞便隱血試驗(yàn)作為常規(guī)檢驗(yàn)是非常重要的，從而能使其得到早期的診斷與治療。

化學(xué)試劑帶法：是基于聯(lián)苯胺的方法使血紅蛋白中的血紅素促使H2O2分解，釋放出新生態(tài)氧，方法簡(jiǎn)便但缺乏特異性及準(zhǔn)確性，此外有不穩(wěn)定的缺點(diǎn)，久置后可使反應(yīng)減弱，出現(xiàn)假陽(yáng)性，近年來(lái)已逐漸被淘汰。

單克隆金標(biāo)法：它是近年來(lái)為解決糞便隱血試驗(yàn)的一種免疫學(xué)方法，所采用的抗體有兩種，一種是抗人血紅蛋白抗體，另一種是紅細(xì)胞基質(zhì)抗體，是檢測(cè)消化道出血的一種較理想的檢測(cè)方法[3]。

本文采用糞便隱血試驗(yàn)單克隆抗體為抗人血紅蛋白抗體，能特異性與人血紅蛋白抗原結(jié)合，而不能與其他種類的血紅蛋白抗原結(jié)合(如豬、羊、雞、兔、魚等)，所以糞便中含有人血紅蛋白時(shí)才能與單克隆抗體結(jié)合出現(xiàn)陽(yáng)性，其他則為陰性，用此方法做糞便隱血試檢測(cè)時(shí)不受其他因素的干擾，病人在做此項(xiàng)檢查時(shí)，無(wú)需3天前禁肉類和含有過(guò)氧化物酶的蔬菜，也無(wú)需限制服用維生素C、鐵劑等藥物，比較之后從中可以看出試劑帶法特異性很差，它不僅是人的血紅蛋白隱血試驗(yàn)為陽(yáng)性，而且使5種動(dòng)物的血紅蛋白、肌紅蛋白試驗(yàn)均為陽(yáng)性，這就說(shuō)明了化學(xué)試劑帶法試驗(yàn)的假陽(yáng)性高于單克隆金標(biāo)法的根本所在。

本文結(jié)果表明：糞便隱血單克隆金標(biāo)法特異性強(qiáng)、靈敏度高、快速簡(jiǎn)便，適合臨床廣泛應(yīng)用。

其中有3例標(biāo)本為柏油便臨床確為消化道出血，單克隆金標(biāo)法測(cè)試均為陰性，考慮病人是否出血量過(guò)多，抗原量過(guò)剩的原因所致而出現(xiàn)的前帶現(xiàn)象，之后將標(biāo)本進(jìn)行了稀釋，重做為陽(yáng)性。

免疫學(xué)隱血試驗(yàn)主要是檢測(cè)下消化道出血，有部分下消化道出血不能檢出，原因：①血紅蛋白或紅細(xì)胞經(jīng)過(guò)消化酶降解變性或消化殆盡已不具有原來(lái)的免疫原性。②過(guò)量的大出血而致反應(yīng)體系中的抗原過(guò)剩出現(xiàn)前帶現(xiàn)象。③病人的血紅蛋白抗原與抗體不匹配。

[1] 潘國(guó)宗,曹世植.現(xiàn)代胃腸病學(xué)[M].北京:科學(xué)出版社,1994:227-235.

[2] 葉應(yīng)嫵.王毓三.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].南京:東南大學(xué)出版社,1997:142-143.

[3] 叢玉隆,馬俊龍,秦曉玲.當(dāng)代體液分析技術(shù)與臨床[M].北京:中國(guó)科學(xué)技術(shù)出版社,2002:295-299.