N F-κ B p65在子宮腺肌病中的表達及與其痛經相關性的研究

呂敬媛,趙東旭,盧北燕,吳雅冬

(佳木斯大學附屬第一醫院婦產科,黑龍江 佳木斯 154003)

當子宮內膜腺體及間質侵入子宮肌層時,稱為子宮腺肌病 (Adenomyosis,AM)。近年來 ,由于此病的發病率不斷上升,已成為婦科常見病。其中,繼發性痛經為最主要的臨床表現以及就診原因。AM藥物治療效果不理想且易復發,如手術切除子宮,患者將喪失生育功能,這已成為婦科的熱點和難點問題。本文用免疫組化的方法研究 N F_κ B p65與子宮腺肌病及其痛經的關系,希望對子宮腺肌病非手術治療提供新思路。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2007— 01～ 2010— 01在我院婦 科病房行 子宮切除術 ,術后經病理檢查證實為子宮腺肌病患者共62例。患者均不合并子宮內膜異位癥;術前半年未使用過激素類藥物及宮內節育器;術前半年無孕產史;不合并免疫及代謝性疾病;不合并內分泌疾病;不合并全身其他系統惡性腫瘤;不合并神經系統疾病及心理障礙;年齡 35～ 53歲,平均(44.19±5.51)歲。對照組為因子宮肌瘤行子宮切除術的住院病人,術后病理證實為子宮肌瘤 ,年齡 30～ 59歲 ,平均 (45.45±8.11)歲。

1.2 疼痛分級

所有患者術前按照疼痛問卷調查評分法對疼痛嚴重程度進行評分：無痛 (0分);輕度疼痛 (1～ 3分)：雖有疼痛但可忍受,并能正常生活,睡眠不受影響;中度疼痛 (4～ 6分)：疼痛明顯,不能忍受 ,要求使用鎮痛藥,睡眠受到干擾;重度疼痛(7～ 9分 )：疼痛劇烈,不能忍受,必須使用鎮痛藥 ,睡眠受到嚴重干擾,可伴有植物神經功能紊亂表現或被動體位。

子宮腺肌病病理分級：

按照術后病理提示子宮內膜侵入子宮肌層的深度分三度：I度：距子宮內膜基底層下一個低倍視野中發現內膜間質或腺體;II度：侵入深度超出 I度范圍到子宮肌層中部;III度：侵入深度超過子宮肌層中部[1]。

按照術后病理提示子宮內膜間質和腺體在肌層中的密度將子宮內膜的侵入深度分為三級：輕度：每一個低倍視野下可見1～ 3個宮內膜腺體小島;中度：每一個低倍視野下可見 4～ 9個;重度：每一個低倍視野下可見≥10個宮內膜腺體小島[1]。

1.3 方法及步驟

病理切片后 SABC法進行免疫組化染色;對照：陰性對照為 N F_kB PBS緩沖液代替一抗 ,陽性對照選取已知組織陽性片

1.4 結果判定

觀察陽性反應,以細胞質或細胞核中出現棕黃色顆粒為其陽性判定標準。根據著色的程度將強度表達為：陰性(-)：細胞無著色,記分為 0分。弱陽性 (+ )：細胞輕度著色染成淡黃色 ,陽性細胞數 ＜25%,記分為1分。陽性(++)：細胞著色染成黃色,陽性細胞數25%～ 50%,記分為2分。強陽性 (+++)：細胞明顯著色,呈棕黃色,陽性細胞數＞ 50%,記分為 3分。

1.5 統計學處理

采用檢驗秩和檢驗和多層分析 Cochran-Mantel-Haenszel法檢驗。所有數據統計均在 SAS9.1.3軟件上進行。

2 結果

2.1 N F_κ B p65在子宮腺肌病中的表達

子宮腺肌病組 62例,陽性率為74.19%,對照組陽性率32.50%,NF_κB p65在子宮腺肌病中的陽性表達率顯著高于對照組,說明 NF_κB p65在子宮腺肌病中特異性高。

表1 NF_κB p65在子宮腺肌病中的表達

2.2 N F_κ B p65在子宮腺肌病在位內膜不同月經周期中的表達

子宮腺肌病組中增生期38例,分泌期24例,增生期陽性率36.36%,分泌期陽性率33.3%,無顯著差異,提示 NF_κ B p65的表達無周期性變化,不受卵巢激素的調節。

表2 NF_κ B p65在子宮腺肌病在位內膜不同月經周期中的表達

2.3 N F_κ B p65在子宮腺肌病不同程度痛經中的表達

子宮腺肌病組中不同痛經程度中陽性率分別為：無疼痛組16.67%、輕度疼痛組80.77%、中度疼痛組93.75%、重度疼痛組100%,隨著疼痛程度的增高表達增強 ,NF_κB p65與子宮腺肌病不同程度痛經正相關。

表3 NF_κ B p65在子宮腺肌病不同程度痛經中的表達(問卷)

2.4 N F_κ B p65在不同病理分級的子宮腺肌病中的表達

按浸潤深度的病理分級中浸潤深度越深,陽性表達越強,即 N F_κB p65與子宮腺肌病不同浸潤深度的病理分級正相關。

表4 NF_κ B p65在不同病理浸潤深度的子宮腺肌病中的表達

按浸潤密度的病理分級中浸潤密度越大,陽性表達越強,即 N F_κ B p65與子宮腺肌病不同浸潤密度的病理分級正相關。

表5 NF_κ B p65在不同病理浸潤密度的子宮腺肌病中的表達

3 討論

在本研究中,NF_κB p65在子宮腺肌病病灶中高表達,與對照組相比,差別有顯著性 (P ＜0.01)。這與預計結果相符合 ,這可能與 N F_κB上調多種細胞因子的表達[2]有關,如細胞因子、黏附分子、細胞外基質蛋白水解酶、趨化因子及血管內皮生長因子、生長因子等,這些因子的過度表達參與了炎性疾病及腫瘤發生的病理過程。而子宮腺肌病是一種具有腫瘤特性的良性疾病。另外,受 NF_κ B調控的因子如TN F_ α、IL_1B、GM-CSF、MM P2、MM P9、INF- γ等都已證實與子宮腺肌病的發生密切相關[1]。在本研究中,在位內膜的增生期、分泌期都有 N F_κB的表達,但表達差異無統計學意義 ,說明 NF_κ B的表達與月經周期無關。在本研究中,NF_κBp65在不同程度痛經中的表達隨疼痛程度加重而表達增強,N F_κ Bp65表達強度與痛經程度正相關的機理可能與此有關。NF_kB p65在不同病理分級中亦隨病理分級增高表達增強,提示可能在子宮腺肌病發生、發展過程中N F_kB p65發揮了一定作用。另外 ,病理閱片過程中發現有些痛經程度嚴重的病例異位病灶的腺腔巨大,可能過度擴大的腺腔導致的機械張力增大而導致痛經嚴重。我們可以以N F_κ B p65抑制劑如 NF_Κb ASODN為切入點,在臨床探尋非手術治療子宮腺肌病的新方法。

[1]王世閬.子宮肌瘤與子宮腺肌病 [M].北京：人民軍醫出版社,2007,163-164

[2]Bours V,Dejardin E.The N F-kappaB transcription factor and cancer.H igh ex pression of NF-kappaB And I kappaB-related proteins in tumor cell lines[J].Biochem Pharmcol,1994,47(1)：145-152