2型糖尿病腎病患者血清同型半胱氨酸和脂聯素檢測的臨床意義

李桂苓，張師梅，王 倩

（天津醫科大學總醫院檢驗科，天津 300052）

糖尿病腎病（diabetic nephropathy,DN）是糖尿病（diabetes mellitus,DM）嚴重的全身性微血管并發癥之一，其病情多隱匿，腎臟病理改變可出現在DM早期階段[1]，而臨床上出現蛋白尿時，腎臟多已有明顯改變，且疾病大多已進入臨床糖尿病期，腎臟病理改變已不能恢復。目前腎臟病的實驗室診斷多以尿蛋白、尿素、肌酐作為主要檢測指標，然而這些項目難以發現早期腎損傷，腎組織學檢查雖然比較靈敏，但必須做有創性的腎活檢，難以推廣。本文通過檢測2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus，T2DM)患者血清同型半胱氨酸(homocysteinemia，HCY)、脂聯素(adiponectin，ADPN)水平，以探討其在DN發生、發展中的變化及作用。

1 資料與方法

1.1 研究對象

1.1.1 對照組（normal control group，NC組）51例，均為我院健康體檢者，口服75 g葡萄糖耐量試驗正常，無心、肝、肺、腎等重要臟器疾病。

1.1.2 T2DM組169例，均為我院2007年6月~2009年4月腎科、內分泌及代謝病科住院患者，按24 h尿微量白蛋白排泄率（UAER/24 h），分為單純糖尿病組（SDM組，UAER/24 h<30 mg)67例，早期糖尿病腎病組（EDN組，30 mg≤UAER/24 h≤300 mg)57例，臨床糖尿病腎病組（CDN組，UAER/24 h>300 mg）45例。

T2DM的診斷均符合1999年WHO糖尿病診斷標準。所有研究對象均無各種急慢性感染性炎癥，無嚴重心臟病如急性心肌梗死、不穩定心絞痛、嚴重心功能不全等，無肝功能受損，既往未應用他汀類調脂藥及血管緊張素轉換酶抑制劑等藥物史。

1.2 研究方法

1.2.1 標本采集 受試者均于隔夜空腹抽肘靜脈血3 ml于試管中靜置30 min，3000 r/min離心10 min后分離血清，置于-20℃冰箱待測，所有血清統一編號保存，一批完成測定。在采血前一周內囑受試者準確留取24 h尿(甲苯10 ml防腐)，混勻后記錄總尿量，留取3 ml置于-20℃冰箱待測尿微量白蛋白，2次測定取均值。

1.2.2 檢測試劑 尿微量白蛋白采用比濁法測定（北京康思潤業尿微量白蛋白測定試劑盒），UAER/24h＝尿微量白蛋白含量×尿量/24 h；HCY采用循環酶法進行測定（北京九強公司同型半胱氨酸測定試劑盒）；血糖采用葡萄糖氧化酶法測定（北京利德曼生化技術有限公司血糖試劑盒）；脂聯素測定采用酶聯免疫吸附法測定（深圳依諾金科技有限公司生產試劑盒）。所有試劑盒均嚴格按照說明書操作。

1.2.3 本實驗所有項目采用日本日立7170A自動生化儀測定。

1.3 統計學分析 采用SPSS10.0軟件進行統計學分析。各參數用±s表示，采用單因素方差分析，方差分析組間均數按檢驗水準有差異者進行兩兩比較，相關分析采用簡單相關分析，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 T2DM各組及NC組一般資料比較 性別、年齡、體重指數、收縮壓、舒張壓在4組間差異無統計學意義（P>0.05）。EDN和CDN組病程長于SDM組（P<0.05），見表 1。

表1 T2DM各組及NC組一般資料比較 （±s）

表1 T2DM各組及NC組一般資料比較 （±s）

◎與SDM組比較P<0.05

病程（年）—4.9±2.88.3±5.2◎9.7±6.2◎舒張壓（mmHg）83.2±10.684.8±11.487.1±8.389.2±10.2年齡（歲）61±860±961±863±8組別NC組SDM組EDN組CDN組n 51675745性別（男/女）25/2636/3129/2822/23收縮壓（mmHg）131.2±10.9146.5±17.5149.9±16.7148.7±16.5體重指數（kg/m2）22.1±4.723.5±4.524.1±4.723.9±4.3

2.2 T2DM各組及NC組生化指標比較 NC、SDM、EDN、CDN 4組血清HCY和ADPN水平呈遞增趨勢，見表2。

2.3 HCY和ADPN分別與UAER水平間的相關分析 經相關分析表明NC、SDM、EDN、CDN 4組受試者HCY、ADPN水平與UAER呈正相關 (rHCY＝0.49，PHCY<0.05；rADPN＝0.56，PADPN<0.05)。

表2 T2DM各組及NC組生化指標比較 （±s）

表2 T2DM各組及NC組生化指標比較 （±s）

☆與NC組比較P<0.01，＃與NC組比較P<0.05,▽與SDM組比較P<0.01，※與SDM組比較P<0.05,△與EDN組比較P<0.05

餐后2 h血糖（mmol/L）6.8±1.314.5±3.4＃15.6±4.4＃16.5±3.9＃空腹血糖（mmol/L）4.9±0.68.8±3.1＃10.3±4.4＃11.7±2.7＃組別NC組SDM組EDN組CDN組UAER/24 h（mg）3.3±5.919.9±8.8＃245.8±29.5☆▽401.3±78.7☆▽△ADPN（mg/L）9.69±1.2616.92±1.36＃21.34±1.67＃※26.21±1.95＃※△HCY（μmol/L）7.9±2.610.5±2.9＃13.9±3.5＃※17.6±4.8＃※△

3 討論

DM是一種全身代謝性疾病，DN是DM常見的慢性并發癥之一，在DM人群中的發病率約為20.0%～40.0%，基本病理改變是腎臟高灌注、高濾過、腎小球基底膜增厚和系膜細胞增生及細胞外基質成分增生，導致慢性或結節性硬化，出現蛋白尿、高血壓、腎功能衰竭等變化[2]。隨著DM發病率在全球范圍內迅速增加，DM患者生存時間的延長，DM導致的慢性腎臟疾病的患病比例也逐年增加[3]。UAER/24 h仍是目前判斷DM患者發展為DN臨床應用的指標，DM患者一旦出現大量蛋白尿，即使血糖控制正常也無法延緩腎功能衰竭的發生，但在DM早期，良好的血糖控制及血壓控制可延緩蛋白尿的出現。

HCY是蛋氨酸生成半胱氨酸過程中的中間代謝產物，在正常血中大部分形成蛋白結合體，僅小部分以游離狀態存在。有研究證實，在一般人群輕中度增高的HCY水平是動脈粥樣硬化性疾病及DM大血管并發癥的獨立危險因素[4-5]。HCY是一種血管損傷性氨基酸，與血管損傷有關，可通過血管內皮細胞損傷導致糖尿病患者腎臟病變。有研究表明，HCY水平甚至比血肌酐更能反映腎功能的程度[6]。近年來的研究證實HCY與T2DM的發生發展有關，更多的臨床資料顯示，T2DM患者HCY水平高于對照組，且HCY的濃度隨著DN的進展而明顯升高[7]。本文的實驗結果與文獻報道相符。

ADPN是1995年發現的由脂肪細胞分泌的一種特異性蛋白質，在循環中約占血漿蛋白的0.01%，血濃度為（5～30）μg/ml[8]。ADPN 作為一種脂肪細胞因子，與肥胖、胰島素抵抗、T2DM緊密相關[9]。ADPN是一種保護性激素，可以通過不同的機制影響T2DM進程，并在一定程度上預防或減少部分并發癥的出現，目前已有關于ADPN涉及糖尿病大血管病變的報道[10]。Looker等[11]對1069名T2DM患者進行血清脂聯素水平的檢測，發現大量白蛋白尿組脂聯素水平較正常及微量白蛋白尿組顯著升高。本文研究結果也表明ADPN隨著T2DN的進展而升高。Koshimura等[12]對不同階段DN患者進行ADPN水平的檢測，發現大量白蛋白尿組不僅血ADPN顯著升高，尿ADPN水平也顯著升高，這說明其增加的原因可能是脂聯素在脂肪組織中的合成增加，以減輕DN大量白蛋白階段的微血管病變，這可能是一種自身保護機制。

總之，本研究發現T2DN患者血清ADPN、HCY水平隨著腎臟損害程度的加重而增高，血清ADPN、HCY水平增高與UAER呈正相關，提示ADPN、HCY可能是反映糖尿病腎病早期內皮損害及腎功能進展的生物標記物，值得進一步深入研究。

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［9］Barbora V,Norbort S,Robert S,et al.Low plasma adiponectin concentrations do not predict weight gain in humans[J].Diabetes,2002,51(10):2964

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［11］Looker HC,Krakoff J,Funahashi T,et al.Adiponectin omcentration are influencedby renal function and diabetes duration in Pima Indians with type 2 diabetes[J].J Clin Endocrinol Metab,2004,89(10):4010

［12］Koshimura J,Fujita H,Narita T,et al.Urinary adiponectin excretion is increased in patients with over diabetic nephropathy[J].Biochem Biophys Commun,2004,316(2):168