西咪替丁原料藥中有機溶劑殘留量的測定

吳瓊詩，李光耀（1.海南省人民醫院，海口市570311；.海南三葉制藥公司，海口市570311）

藥品中的殘留溶劑是影響藥品質量的重要指標之一。為保證用藥安全，對藥物原料藥或制劑中有機溶劑殘留量必須進行檢測[1，2]。

西咪替丁在臨床上主要用于治療十二指腸潰瘍、胃潰瘍、上消化道出血等疾病，其在生產過程中，可使用環已烷、丙酮、甲醇和乙醇作為合成和重結晶溶劑，根據《中國藥典》規定[3]，其中環己烷、甲醇為第二類溶劑，丙酮和乙醇為第三類溶劑，因此，需要對這些溶劑進行限度檢查和控制。為此，筆者建立了頂空氣相色譜法測定西咪替丁中這幾種溶劑殘留量的方法。結果表明，所建立的方法靈敏、可靠，重復性好，結果準確，可用于西咪替丁原料藥中有機溶劑殘留量的測定。

1 儀器與試藥

HP-6890N氣相色譜儀，配有HP7694 E頂空進樣器和氫火焰離子化檢測器（FID）及Agilent原裝化學工作站（美國Agilent公司）。

西咪替丁原料藥（由某藥廠提供，批號：20090112、20090202、20090226，純度：均為99.9%以上）；溶劑對照品環己烷、丙酮、甲醇和乙醇以及其它試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件和系統適用性研究

色譜柱：鍵合聚乙二醇HP-INNOWAX毛細管柱（0.53 mm×30 m×1.0 μm）；程序升溫：柱溫40 ℃保持5 min，以每分鐘10℃的速率升至100℃，再以每分鐘35℃的速率升至200℃，保持5 min；進樣口溫度：150℃，FID溫度：220℃；分流進樣，分流比1∶1；載氣：氮氣，流速：5.0 mL·min－1；尾吹（氮氣）：30 mL·min－1；頂空進樣器參數：平衡溫度：80℃，傳輸管溫度：110℃，進樣環溫度：105℃，平衡時間：30 min。

2.2 對照品混合溶液的制備

精密量取環己烷、丙酮、甲醇和乙醇適量，加入N，N-二甲基甲酰胺溶解并稀釋制成每1 mL中分別含環己烷0.5 mg、丙酮0.5 mg、甲醇0.3 mg、乙醇0.5 mg的對照品混合溶液。

2.3 供試品溶液的制備

取本品，研細，取約0.3 g，精密稱定，置于10 mL頂空進樣器中，精密加入N，N-二甲基甲酰胺3 mL，密封，即得。

精密量取上述對照品混合溶液、供試品溶液及空白溶液（N，N-二甲基甲酰胺溶液）各3 mL，置于10 mL頂空進樣器中，密封，氣體進樣。色譜結果見圖1。

由圖1結果可見，在環己烷、丙酮、甲醇、乙醇等色譜峰處無干擾峰出現。

2.4 檢測限和定量限

分別精密量取環己烷、丙酮、甲醇和乙醇適量，用N，N-二甲基甲酰胺溶解并稀釋制成一定濃度的對照品溶液。精密量取3 mL，置于頂空進樣器中，密封，氣體進樣；根據信噪比，分別計算各有機溶劑的最低檢測限和定量限。經測定，環己烷、丙酮、甲醇、乙醇的最低檢測限分別為0.05、0.80、0.8、1.2 μg，定量限分別為1.55、1.54、1.56、2.458 μg。

2.5 線性范圍

圖1 氣相色譜圖A.對照品混合溶液；B.空白溶液；C.供試品溶液；1.環己烷；2.丙酮；3.甲醇；4.乙醇Fig 1 GC chromatogramsA.reference mixture；B.blank solution；C.test sample；1.cyclohexane；2.acetone；3.methanol；4.ethanol

取各對照品適量，精密稱定，用N，N-二甲基甲酰胺溶液溶解并稀釋制成環己烷濃度為0.148 8、0.297 6、0.446 4、0.595 2、1.190 4、2.381 mg·mL－1，丙酮濃度為0.182 6、0.365 2、0.547 8、1.095、2.191、3.287 mg·mL－1，甲醇濃度為 0.149 6、0.299 2、0.448 8、0.897 6、1.752、2.693 mg·mL－1，乙醇濃度為0.144 8、0.289 6、0.434 4、0.579 2、1.158、2.317 mg·mL－1的溶液，各精密量取3 mL置于頂空進樣器中，密封，氣體進樣。測定峰面積，以濃度（X）為橫坐標，峰面積的平均值（Y）為縱坐標，繪制標準曲線，計算回歸方程及相關系數，結果見表1。

表1 線性關系試驗結果Tab 1 Linear range of organic solvents

2.6 儀器精密度試驗

分別取環己烷、丙酮、甲醇和乙醇適量，精密稱定，按對照品溶液的制備方法制備對照品溶液，精密量取3 mL，置于頂空進樣器中，密封，氣體進樣；平行測定5份對照品溶液，分別測定其校正因子，結果RSD分別為0.78%、0.21%、0.22%、0.31%。

2.7 精密度試驗

日內精密度：于同日內精密稱取同一批樣品（批號：20090112）5份，測定樣品中殘留溶劑的含量，結果環己烷和甲醇未檢出，丙酮和乙醇含量的RSD分別為0.29%、0.46%。

日間精密度：分別于1～5 d，精密稱取同一批樣品（批號：20090112）5份，測定樣品中殘留溶劑的含量。結果環己烷和甲醇未檢出，丙酮和乙醇含量的RSD分別為0.68%和1.06%。

2.8 回收率試驗

對照品溶液的制備：取環己烷、丙酮、甲醇和乙醇適量，精密稱定，用N，N-二甲基甲酰胺溶解并稀釋制成每1 mL中分別含環己烷 0.496 mg、丙酮 0.612 mg、甲醇 0.313 2 mg、乙醇0.490 5 mg的對照品溶液，精密量取3 mL，置于10 mL頂空進樣器中，密封，氣體進樣。加樣回收率測定：精密稱取已測知各殘留溶劑含量的樣品（批號：20090112，環己烷和甲醇含量均為0，丙酮和乙醇含量分別為0.030、0.048 mg·g－1）約0.3 g，置于頂空進樣器中，精密加入上述對照品溶液3 mL，使溶解，依法測定。計算回收率，結果見表2。

表2 回收率試驗結果Tab 2 Results of recovery test

2.9 樣品中有機溶劑殘留量測定

取3批樣品，按“2.3”所述方法制成供試品溶液，取樣置于頂空進樣器中，依法測定，結果見表3（“-”表示未檢出）。

表3 3批樣品中有機溶劑殘留量測定結果（mg·g－1）Tab 3 Content determination of residual organic solvents in 3 batches of samples（mg·g－1）

3 討論

3.1 分流比的選擇

經大量試驗證實，4種溶劑在不同濃度范圍內應采用不同的分流比，以使柱容量和分辨率相適應。綜合考慮分流比、分辨率及進樣誤差，本文選擇1∶1分流比，可獲得較好的結果。

3.2 頂空測定條件的選擇

3.2.1 平衡溫度的選擇。取4種溶劑的混合對照品溶液，置于頂空瓶中，分別在60、65、70、75、80、85和90 ℃溫度下平衡后頂空進樣分析。結果發現，隨著平衡溫度的升高，峰面積有所增大。這是由于組分的飽和蒸氣壓隨平衡溫度的升高而變大所造成的。但由于平衡溫度過高，會引起頂空瓶的耐壓和氣密性等問題，故本文選取80℃作為平衡溫度。

3.2.2 平衡時間的影響。將4種溶劑的對照品混合溶液置于頂空瓶中，在80 ℃分別平衡20、30、40、50、60 min后進樣分析。結果表明，響應信號隨著平衡時間的延長而增大。綜合考慮各種溶劑分析結果，本試驗選擇為最佳平衡時間為30 min。

[1]周海鈞主譯.藥品注冊的國際技術要求·質量部分[M].北京：人民衛生出版社，2000：82.

[2]李珂珂，譚豐蘋.毛細管氣相色譜法測定拉米夫定中有機溶劑的殘留量[J].中國藥房，2007，18（19）：1 502.

[3]國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典（二部）[S].2005年版.北京：化學工業出版社，2005：附錄54.