張玲,夏文,韓恩吉,夏作理(.泰山醫學院生命科學研究所,泰安市7000;.山東大學齊魯醫院腦血管病科,濟南市 500)
海風藤為胡椒科植物風藤Piper kadsura(Choisy)Ohwi的干燥藤莖,具有祛風濕、通經絡的功能,傳統中醫用海風藤治療哮喘、關節痛[1]。近年來報道海風藤在治療腦梗死方面有一定效果,其有效使用劑量為3~9 g[2,3]。目前,臨床上以海風藤干燥全草入藥。《中國藥典》收載的海風藤為胡椒科植物風藤P.kadsura(Choisy)Ohwi的干燥藤莖[4],而廣東省歷來習用的海風藤為木蘭科南五味子屬植物海風藤(別名大葉過山龍)Kadsura heteroclite(Roxb.)Craib的干燥藤莖。另外,對全國的中藥市場調查發現,海風藤的來源比較復雜,主要原植物有風藤P.kadsura(Choisy)Ohwi及山藥P.hanceiMaxim.;部分地區尚有用腺鱗茍P.hanceiMaxim.var.squamiglanduferumFan、石南 藤P.walliehii(Miq.)Hand.-Mazz.及 毛 藥P.pu-bemlum(Benth.)Maxim.的莖葉。本試驗用的細葉青蔞藤為《中國藥典》記載的胡椒科植物風藤的別名[1]。
微量元素與人體健康、疾病及中醫藥的關系十分密切,藥材中各種微量元素的含量是決定植物類中藥寒、涼、溫、熱四性的主要因素之一[5]。因此,筆者用電感耦合等離子發射光譜法測定海風藤不同部位微量元素的含量并對其進行比較。
Iris intrepidⅡXSP型電感耦合等離子發射光譜儀(美國熱電公司);十萬分之一電子天平(梅特勒-托利多儀器有限公司);可調溫控電熱板、電熱恒溫鼓風干燥箱(天津市中環實驗電爐有限公司);通風櫥(泰安岱興通風設備有限公司);電熱恒溫水浴鍋(北京市長風儀器儀表公司)。
硝酸、高氯酸為國產優級純,水為超純水;混合標準樣品由北京有色金屬研究總院提供(濃度為100 μg·mL-1,編號為GSB 04-1767-2004)。海風藤由山東大學齊魯醫院中藥房提供,經山東大學藥學院生藥教研室李允堯教授鑒定為細葉青蔞藤P.kadsura(Choisy)Ohwi的干燥全草。
分別挑選出海風藤的粗莖、細莖和葉,用水沖洗后置電熱恒溫鼓風干燥箱烘干至恒重(95℃,前后2次質量差<2 mg),粉碎,過100目篩。用電子天平準確稱取0.2 g(精確至0.000 01 g),置于100 mL耐熱三角瓶中,加入5 mL混合酸(HNO3∶HClO4=4∶1),并放置防爆玻璃珠3~5個,上端放一小玻璃漏斗,在通風櫥中用電熱板130℃加熱消化樣品,并將混合酸蒸干;若樣品還帶有黃色,再加入適量混合酸繼續消化,直至樣品粉末完全消解變白為止;然后在80℃電熱恒溫水浴鍋中用1%硝酸充分溶解1 h,定容。
載氣:氬氣;載氣流量:0.5 mL·min-1;射頻功率:1 150 W。調整好儀器的各項參數,選擇16種元素的最佳譜線,用1%硝酸作為空白溶液,調整儀器的檢測限和靈敏度;將混合標準樣品溶液用1%硝酸稀釋100倍,作為工作溶液,驗證儀器的準確性和精密度;在空白溶液中加入不同水平的標準工作溶液,混勻,按照測定混合標準樣品溶液的方法重復測定5次,計算加樣回收率。
在上述儀器條件下,同法測定樣品中16種元素的含量,結果見表1。

表1 海風藤不同部位微量元素的含量測定結果Tab 1 Content determination of trace elements in different parts of P.kadsura

表2 16種元素的回收率試驗結果Tab 2 Results of recovery test of 16 kinds of trace elements
重復測定混合標準樣品溶液10次,計算RSD。16種元素的RSD見表2。
從表2可看出,只有元素鈦的RSD=7.320 0%,其它15種元素的RSD均小于2%,表明該測定方法的精密度很高。
重復測定加標空白溶液10次,計算回收率。16種元素的回收率試驗結果見表2。
從表2可看出,只有鐵和鍶2種元素的回收率偏低(分別為88.40%和87.14%),其余14種元素的回收率均在90%~110%范圍內,表明測定結果準確、可靠。
電感耦合等離子發射光譜法測定各種元素的準確性和精密性的關鍵在于譜線的選擇。一種元素往往有多條特征光譜,在不同激發條件下,其靈敏度和檢測限不同。因此,測定一種新的元素和樣品,需要根據試驗條件選擇靈敏度高、檢測限低的譜線。例如,在本試驗條件下,元素鎂選擇了2條波長分別為277.669 nm和285.213 nm的特征譜線,分別重復測定空白溶液5次,其中波長為277.669 nm的測定結果的檢測限為0.009 μ g·mL-1,RSD=1.071% ,誤 差 為 0.089;而波長為285.213 nm時,測定結果的檢測限為0.085μg·mL-1,RSD=1.415%,誤差為0.186 7。可見在本試驗條件下,測定鎂元素時選擇波長277.669 nm的發射譜線,靈敏度較高,檢測限較低。
由表1可見,海風藤不同部位礦物元素的含量有較大差別,其葉中含有大量的鎂、鐵、錳、鋅、鈦、鍶、鋇、硼和銅等元素,其中鎂、鐵、錳、鋅、鈦、硼和鉛等元素的含量遠遠大于細莖和粗莖。鎂、鐵、錳、鋅和銅等都是人體必需的有重要生理功能的礦物元素,在平衡人體的正常新陳代謝中均起到重要作用[3]。可見,海風藤的葉有重要的藥用價值,從而為臨床上將海風藤的干燥全草入藥提供了一定的理論依據。另外,海風藤的葉中還含有大量對人體有害的重金屬元素鉛,由于鐵和鋅對鉛有拮抗作用,因此海風藤葉中大量的鋅和鐵可能會對鉛產生抑制作用,從而減少它對人體的危害。
海風藤葉中所含的微量礦物元素中,鎘的含量大約是細莖和粗莖的10倍;鎳和鉻的含量大約是細莖和粗莖的2倍。而鎳是人體必需的微量元素之一,鉻離子(Cr3+)是葡萄糖耐量因子的活性中心,它們在人體中均具有多種重要的生物學功能。海風藤葉中含較多的鎳與鉻,預示海風藤的葉在治療糖尿病等疾病方面可能會有一定作用。值得注意的是,海風藤的粗莖中含有大量在人體內具有類似胰島素功能的微量元素釩;細莖中含有較多微量元素錫,表明海風藤的葉和莖具有互補的藥理作用。
采用電感耦合等離子發射光譜法測定海風藤不同部位16種礦物元素含量的精密度和準確性都很高,測定結果準確、可靠。從測定結果可知,海風藤的全草均可入藥,特別是海風藤的葉含有大量的鎂、鐵、錳、鋅、鈦、鍶、鋇、硼和銅等元素,可能具有重要的藥用價值。
[1]王貞佐,呼海濤,孟慶繁,等.海風藤的研究進展[J].時珍國醫國藥,2006,17(7):1 305.
[2]韓恩吉,胡洪濤,何秀全,等.海風藤對β-APP基因表達的影響[J].山東大學學報(醫學版),2003,41(1):87.
[3]李吉瑩,劉艷菊,邴飛虹,等.海風藤抗炎作用的實驗研究[J].湖北中醫雜志,2006,28(12):17.
[4]國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典(一部)[S].2005年版.北京:化學工業出版社,2005:206.
[5]管竟環,李恩寬.中醫藥理論量化與微量元素[M].武漢:湖北科學技術出版社,1998:16.