高效液相色譜法測定泮托拉唑在健康人血中的濃度

蔡穎 羊強 符策浩

（海南醫學院附屬醫院國家藥物臨床試驗機構 海南海口 571101）

本品為泮托拉唑為一種人工合成的質子泵抑制劑，主要用于治療胃、十二指腸潰瘍，也可以治療胃泌素瘤導致的潰瘍。本文采用的HPLC外標法測定泮托拉唑血漿藥物濃度，方法簡便，重現性好，可用于泮托拉唑人體藥代動力學研究。

1 儀器與試劑

Waters1525液相色譜儀、Waters2487檢測器(美國)；TL-16R臺式高速冷凍離心機(上海市離心機械研究所),XW-80A旋渦混合器(上海醫科大學儀器廠),島津AX200型電子天平(日本)，SZ-Ⅲ型自動三重純水蒸餾器（上海嘉鵬科技有限公司），PHS 3C精密pH計（上海精密科學儀器有限公司）等。

泮托拉唑鈉對照品由國家藥品生物制品檢定所提供(100575-200301含量:95.1%)。乙腈(美國Fisher公司生產,色譜純),磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉(均為廣州化學試劑廠,AR)，磷酸（廣州化學試劑廠），純化水（自制）。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

流動相：乙腈：磷酸鹽緩沖液（磷酸氫二鈉1.25g，磷酸二氫鈉0.3g，加純化水至1000mL，用磷酸調pH值至5.6）(33:67)，色譜柱：依利特Spherisorb C8,5um ，4.6mm×150mm，柱溫為30℃，紫外檢測波長288nm，流速為1.2mL/min。

2.2 血漿樣品處理

取肝素化血漿0.2mL，加入乙腈0.3mL,渦旋1min，10000rpm/min，溫度25℃，離心5min,吸取上清液50uL定量環進樣，用峰面積進行定量分析。在上述色譜條件下，泮托拉唑的出峰時間約為4.6min，與血漿中內源性物質分離良好。

2.3 血漿標準曲線制作

用空白血漿配制相當于泮托拉唑濃度分別為0.05、0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0ug/mL的樣品，按“血漿樣品處理”項下操作，記錄對照品峰面積，以泮托拉唑峰面積對樣品濃度(ug/ml)作直線回歸，線性方程：Y=27705X-882.85，線性范圍為0.05～5.0ug/mL,相關系數R2＝0.9996。

2.4 方法精密度和回收率

配制含泮托拉唑0.1、1.0、5.0ug/mL血漿標準品數份，分別于1d內每個濃度平行5份按血漿樣品處理方法處理并測定，評價本法測定血漿中泮托拉唑含量的回收率及日內精密度。連續3d配制并測定上述濃度樣品，考察方法日間精密度。3個濃度的萃取回收率在66.3%～73.6%之間，方法的回收率均在96.40%～111.6%之內，日內RSD<3%、日間中、高濃度RSD均<11%，低濃度<20%。符合生物等效性研究的方法學要求。

2.5 穩定性考察

按照標準曲線制備方法，制備低、中、高濃度樣品數份，分別置室溫、凍存、凍融條件下存放不同時間后，按“2.2”項下方法處理并測定，考察樣品放置穩定性，并考察了處理完的溶液的室溫穩定性，結果表明泮托拉唑血漿樣品在室溫條件下至少能穩定12h；凍存條件（-20℃）下至少能穩定30d；在凍融4周期內含量沒有下降。

3 討論

本品為泮托拉唑為一種人工合成的質子泵抑制劑，主要用于治療胃、十二指腸潰瘍，也可以治療胃泌素瘤導致的潰瘍。口服后吸收迅速、完全，單次口服40mg后,2～3h左右即可達到血藥濃度峰值，其口服制劑的絕對生物利用度為77%。80%的代謝產物通過腎臟排出，其余經膽汁進入糞便排出。泮托拉唑血藥濃度檢測方法國內外均有文獻報道，大多采用HPLC內標法[1～3]，本文用HPLC外標法測定人血漿中泮托拉唑濃度，結果表明它與內源性雜質分離良好，樣處理簡便，完全可以滿足臨床藥代動力學以及藥物代謝的要求。

[1]師少軍,李忠芳,陳華庭,等.泮托拉唑鈉腸溶片在中國男性健康志愿者體內的藥動學和相對生物利用度研究[J].中國臨床藥理學與治療學,2005,10(11):1236～1239.

[2]李佐軍,雷建平,吳翠芳,等.泮托拉唑鈉腸溶膠囊在健康人體中的生物等效性研究[J].中國藥師,2006,9(9):797～799.

[3]王永慶,吳春勇,張靜,等.泮托拉唑腸溶膠囊人體生物利用度及生物等效性研究[J].中國藥業，2009,18(3):3～4.