急性非ST段抬高心肌梗死患者血漿ADAMTS-7水平研究

吳文靜,程勁松,王 慧,柯元南,鄭金剛*

(1.北京協和醫學院 研 究生院,北京 100730;2.中日友好醫院 心 內科,北京 100029)

急性非ST段抬高心肌梗死患者血漿ADAMTS-7水平研究

吳文靜1,2,程勁松1,2,王 慧1,2,柯元南2,鄭金剛2*

(1.北京協和醫學院 研 究生院,北京 100730;2.中日友好醫院 心 內科,北京 100029)

目的檢測急性非ST段抬高心肌梗死(non ST elevated myocardial infarction,NSTEMI)患者血漿ADAMTS-7水平的變化,以探索ADAMTS-7與心肌缺血的關系。方法選擇86例確診NSTEMI患者及52例通過冠脈造影排除冠心病患者,取外周血離心、分離血漿,使用ELISA法檢測血漿ADAMTS-7水平。結果兩組受試者在年齡、吸煙史、高血壓病史、冠心病家族史、血脂水平、體重指數方面無統計學差異;NSTEMI組男性患者居多,有糖尿病史患者明顯高于對照組(P＜0.05);NSTEMI組與對照組血漿ADAMTS-7水平分別為(37.38±19.61)ng/ml、(18.54±10.51)ng/ml,NSTEMI組較對照組明顯升高,與高敏C反應蛋白、TIMI評分變化一致,組間差異有統計學意義(P＜0.05)。結論血漿ADAMTS-7水平可能作為NSTEMI患者早期識別指標之一,血漿ADAMTS-7可與高敏C反應蛋白、TIMI評分一起對判斷預后提供幫助。

ADAMTS-7;NSTEMI;心肌缺血

(Chin J Lab Diagn,2010,14:1396)

ADAMTS(a disintegrin-like and metalloproteinase with thrombospondin type 1 motifs)意為含Ⅰ型血小板結合蛋白基序(TSP)的解聚蛋白樣金屬蛋白酶,是繼基質金屬蛋白酶MMPs后新發現的一類Zn2+依賴的分泌型金屬蛋白酶。關于ADAMTSs家族的研究才剛剛開始,已有研究表明其參與了極其復雜多樣的生物學和疾病過程,與疾病有著密切的關系,可能在體內多種疾病中發揮著關鍵性作用,也可能為疾病的診斷和治療提供新的靶點。其中ADAMTS-7是第一個被發現的直接與軟骨基質蛋白(Cartilage oligomeric matrix protein COMP)結合并降解COMP的蛋白酶[1],我們最近研究發現ADAMTS-7參與了血管損傷后內膜的增生[2],但其與心血管疾病的關系并不明確,本研究擬進一步研究ADAMTS-7表達與心肌缺血的關系。

1 材料與方法

1.1 觀察對象 病例選擇2008年12月-2009年2月收治的疑似缺血性胸痛的患者138例,男性75例,女性63例,年齡(64.33±10.97)(40-82)歲,開始出現胸痛癥狀至采血(302.63±282.28)小時。每位患者采血6 ml,置于使用EDTA抗凝的采血管中保存于4℃,半小時之內以1 000 g離心15分鐘,將上清取出,保存于-80℃備檢。本研究用冠脈造影法確定病例分組,NSTEMI診斷根據《2007ACC/AHA不穩定型心絞痛與非ST段抬高心肌梗死治療指南》:至少有一項心肌生化標志物(優選肌鈣蛋白)升高超過99%正常參考值上限,同時至少有下列一項改變①有典型心肌缺血癥狀②心電圖改變提示新發生的心肌缺血。所有患者簽署了知情同意書,研究方案經過中日友好醫院倫理委員會批準。

1.2 血漿ADAMTS-7檢測 通過酶聯免疫吸附法(ELISA),試劑盒購自中美合資?武漢中美科技有限公司(USENLIFE),靈敏度為0.039 ng/ml,測量線性范圍0.156-10 ng/ml,酶標儀為Molecular Devices公司生產的spectramax M2型。試驗步驟按產品說明書進行。

1.3 統計分析方法 應用SPSS13.0軟件分析。計量資料采用均數±標準差表示,組間比較采用t檢驗,率的比較采用 χ2檢驗,P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 入選患者基本情況如表1所示,兩組患者在性別、糖尿病史、高敏C反應蛋白、TIMI評分上有統計學差異(P＜0.05)。

表1 患者基本情況

2.2 NSTEMI組及對照組的ADAMTS-7水平比較NSTEMI組與對照組血漿ADAMTS-7水平分別為(37.38±19.61)ng/ml、(18.54 ±10.51)ng/ml,組間差異有統計學意義(P＜0.05)。(見圖1)

3 討論

基質的合成和降解參與了一系列生理和病理生理過程,包括血管生成、細胞凋亡、腫瘤轉移、炎癥發生等,而降解基質的蛋白酶在其中起著關鍵性的作用。目前已知的參與基質重構的蛋白水解酶包括絲氨酸蛋白酶、酪氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、金屬蛋白酶等。ADAMTSs家族與解聚蛋白樣金屬蛋白酶ADAMs及基質金屬蛋白酶MMPs同屬于金屬蛋白酶家族,其主要結構特點是羧基端含有至少一個TSP基序。ADAMTSs屬于分泌型蛋白酶,可由巨噬細胞、血管內皮細胞、平滑肌細胞、成纖維細胞等多種細胞合成和分泌,通常結合于基質上。目前人類已找到19個ADAMTSs成員,部分成員的特異性底物及重要功能正逐步被人們認識,如ADAMTS-1可能通過裂解ECM蛋白聚糖加速動脈粥樣硬化形成[2]。ADAMTS-1的227Pro多態性與冠心病事件增加2倍相關[3]。ADAMTS-4和 -8也被認為是人類粥樣硬化斑塊中富含巨噬細胞區域的炎性調節酶[4]。其中ADAMTS-7定位于人15號染色體,人和小鼠的ADAMTS-7蛋白分別包含1686和1641個氨基酸,分子量大小大約為181和178KD。它可以經過多次的弗林蛋白酶依賴的剪切過程,無論全長還是剪切形式均表現出水解活性。ADAMTS-7在人心臟、胰腺、腎臟、軟骨、骨骼肌和肝臟中均有高表達,呈現分布的廣泛性,ADAMTS-7是第一個被發現的直接與COMP結合并降解COMP的蛋白酶。

圖1 兩組受試者血漿ADAMTS-7水平

急性冠脈綜合征的發生多是在不穩定斑塊出現裂縫、糜爛及破裂的基礎上,血管內血栓形成以至管腔閉塞所致。目前認為斑塊的生物學特征是決定其穩定性的主要因素。外力對斑塊的作用主要由纖維帽承受,纖維帽變薄是不穩定動脈粥樣硬化斑塊的特征之一。纖維帽由膠原纖維、蛋白多糖、彈性蛋白等組成。纖維帽的完整性及對破裂的抵抗力主要靠細胞外基質來維持,最主要的是基質中的膠原纖維[5]?，F在認為COMP是人類血管細胞外基質的組成成分,與平滑肌細胞的黏附和趨觸性相關[6],其可以通過結合在其他細胞外基質成分,如Ⅰ、Ⅱ、Ⅸ型膠原和胞外基質蛋白來維持細胞外基質內穩態[7]。Hala′sz等認為COMP是膠原原纖維生成過程的催化劑[8]。

本研究首次比較了NSTEMI與對照組之間血循環中ADAMTS-7表達的區別,發現NSTEMI組較對照組循環ADAMTS-7水平顯著升高(分別為37.38±19.61 ng/ml、18.54 ±10.51 ng/ml,P＜0.05)。NSTEMI組高敏C反應蛋白水平與TIMI評分均明顯高于對照組,與ADAMTS-7變化趨勢一致。已知高敏C反應蛋白水平與冠心病的預后有密切關系,提示ADAMTS-7的水平與NSTEMI患者遠期預后密切相關。心臟嚴重缺血時ADAMTS-7表達顯著升高的原因尚不明確,可能與以下機制有關:(1)已知ADAMTS-7作為基質降解酶,可能是引起動脈斑塊破裂的原因[5-8],從而引起心肌缺血;(2)心臟缺血后,缺血區ADAMTS-7表達升高,引起心臟的重構。因此,進一步分析ADAMTS-7表達升高的原因對在NSTEMI患者的診治可能具有重要意義。

[1]Liu C,Kong W,Xu K,et al.ADAMTS-12 associated with and degrades cartilage oligomeric matrix protein[J].J Biol Chem,2006,281(23):15800.

[2]Jonsson-Rylander AC,Nilsson T,Fritsche-Danielson R,et al.Role of ADAMTS-1 in atherosclerosis:remodeling of carotid artery,immunohistochemistry,and proteolysis of versican[J].Arterioscler Thromb Vasc Biol,2005,25:180.

[3]Sabatine MS,Ploughman L,Simonsen KL,et al.Association between ADAMTS1 matrix metalloproteinase gene variation,coronary heart disease,and benefit of statin therapy[J].Arterioscler Thromb Vasc Biol,2008,28:562.

[4]Wagsater D,Bjork H,Zhu C,et al.ADAMTS-4 and-8 are inflammatory regulated enzymes expressed in macrophage-rich areas ofhuman atherosclerotic plaques[J].Atherosclerosis,2008,196:514.

[5]楊新春,李延輝,王樂豐.急性冠脈綜合征[M].北京,人民衛生出版社,2009.29-30.

[6]Riessen R,Fenchel M,Chen H,et al.Cartilageoligomeric matrix protein(thrombospondin-5)is expressed by human vascular smooth muscle cells[J].Arterioscler Thromb Vasc Biol,2001,21:47.

[7]Thur J,Rosenberg K,Nitsche DP,et al.Mutations in cartilage oligomeric matrix protein causing pseudoachondroplasia and multiple epiphyseal dysplasia affect binding of calcium and collagen I,II,and IX[J].J Biol Chem,2001,276:6083.

[8]Hala′szK,KassnerA,Morgelin M,et al.COMP acts as a catalyst in collagen fibrillogenesis[J].J Biol Chem,2007,282:31166.

PlasmaADAMTS-7 in acute non ST elevated myocardial infarction patients

WU Wen-jing1,2,CHENGJin-song1,2,WANG Hui1,2,et al.(1.Graduate school of Peking Union Medical College&Chinese Academy of Medical Science,Beijing100730,China;2.China-Japan FriendshipHospital,department of Cardiology,Beijing100029,China)

ObjectiveDetecting level of plasma ADAMTS-7 in patients suffering from acute non ST elevatedmyocardial infarc-tion to explore the relationship between ADAMTS-7 and myocardial ischemia.MethodsELISA was used to measure level of plasma ADAMTS-7 in 86 NSTEMI patients and 52 control patientswithout coronary heart disease confirmed by coronary angiography.ResultsTwo groups had no difference in age,smoking history,hypertension history,coronary heart disease family history,serum lipid level and body mass index.There were more male patients in ADAMTS-7 group and more patients in this group had diabetes.Plasma ADAMTS-7 in NSTEMI patients and control groupwere(37.38±19.61)ng/ml and(18.54±10.51)ng/ml respectively.NSTEMI had significantly higher ADAMTS-7 level,higher high-sensitivity C reactive protein level andhigher TIMI score.(P＜0.05).ConclusionADAMTS-7 may be a new index for the early recognizing of NSTEMI patients.It can help to evaluate prognosis together with high-sensitivity C reactive protein and TIMI score.

ADAMTS-7;NSTEMI;myocardial ischemia

R541.4

A

1007-4287(2010)09-1396-03

國家自然科學基金資助項目(30770865;30670849)

*通訊作者

吳文靜(1979-),女,碩士,主要從事冠心病發病機制研究;鄭金剛(1970-),男,副主任醫師,博士后,主要從事冠心病介入研究。

2009-12-04)