轉化生長因子-β1在大腸癌中的表達及其臨床意義

轉化生長因子-β1在大腸癌中的表達及其臨床意義

張 梁1,鄧益斌1,鄧巧瑩1,黃永秩2
(右江民族醫學院附屬醫院 1 .檢驗科;2.病理科,廣西 百 色533000)

轉化生長因子-β1(TGF-β1)是一類功能復雜的多肽類細胞因子,構成一個多功能的細胞因子超家族,體內幾乎所有細胞都能產生并存在其受體。TGF-β1是其成員之一,有資料表明TGF-β1在腫瘤發生、發展及轉移過程中起著重要作用[2-4],但TGF-β1由抑癌作用轉變成促癌作用的機制尚未十分清楚。因此,本文通過對大腸癌TGF-β1的表達進行研究,探討TGF-β1在大腸癌診療中的臨床應用價值。

1 材料與方法

1.1 材料 2005年8月-2008年8月在我院住院手術的62例大腸癌患者為病例組,男48例,女14例,年齡43-81歲,其中結腸癌40例,結腸腺癌22例,對照組為大腸癌患者自身癌旁正常組織,兔抗人TGF-β1一抗及即用型非生物素免疫組化ElivisionTM super試劑盒(福州生物技術開發有限公司)。

1.2 方法 所有標本均經過10%福爾馬林固定,常規石蠟包埋,4 μ m厚連續切片,切片經二甲苯脫蠟和梯度酒精水化,蒸餾水洗,經檸檬酸鹽高溫修復,冷卻后用PBS沖洗3次,每次3 min,滴加過氧化酶阻斷溶液,室溫下孵育10 min,PBS沖洗3次,每次3 min,分別滴加一抗(濃度1∶100;兔抗人TGF-β1),37℃孵育10 min,PBS沖洗3次,每次 3 min,加多聚酶結合物(試劑B)37℃孵育10 min,PBS沖洗3次,每次3 min,DAB室溫顯色3-5 min,自來水沖洗,蘇木素復染,經梯度酒精脫水,二甲苯透明后中性樹脂封片,光鏡下觀察,陰性對照以PBS代替-抗,陽性對照為已知陽性切片。

1.3 染色結果判定 TGF-β1主要位于細胞漿內,部分位于細胞膜上。細胞內具有棕黃色或黃褐色顆粒者為陽性。每例隨機觀察5個視野,每個視野100個細胞,計數500個細胞中染色細胞陽性數。陰性(-):陽性細胞數＜20%或無陽性細胞,與背景顏色一致;陽性(+):陽性細胞數 20%-70%;強陽性(++):陽性細胞數＞70%。

1.4 統計學處理 使用統計學軟件SPSS13.0進行統計學處理分析,采用 χ2檢驗,P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 TGF-β1在大腸癌及自身癌旁正常結腸組織中的表達比較 免疫組織化學染色后,兩組結果見表1。兩組數據比較有顯著性意義(P＜0.05)。

表1 TGF-β1在大腸癌及癌旁正常結腸組織中的表達比較(%)

2.2 TGF-β1表達與淋巴結轉移關系 在50例淋巴結轉移組中,TGF-β1表達見表2。兩組比較有顯著性意義(P＜0.05)。

表2 TGF-β1表達與淋巴結轉移關系

3 討論

TGF-β1在胚胎生長發育、細胞分化、增殖及凋亡的調節中發揮重要作用,同時參與細胞外基質的分泌和發育分化等多種生理過程。TGF-β1與腫瘤的發生,腫瘤細胞的浸潤及轉移有密切關系,并在不同階段所起的作用不同。在腫瘤的早期階段,TGF-β1在細胞生長及分化過程中起重要的調節因子作用,可誘導腫瘤細胞凋亡。隨著腫瘤的進程,生長環境的變化,TGF-β1成為腫瘤細胞生長、浸潤、轉移及血管新生的重要刺激因子。有資料表明,TGF-β1隨著腫瘤惡性度的增高而表達增加,其作為一個判斷腫瘤預后的不良指標[5-8]。隨著大腸癌浸潤深度的增加,癌組織可以自分泌大量的TGF-β1與自身表面受體結合,從而促進癌組織細胞生長、浸潤、轉移;并可能通過旁分泌作用發揮其他功能,如誘導新生血管形成,促進細胞外基質合成,抑制機體免疫反應等,為癌組織提供了一個適宜的微環境,從而加速了癌細胞的生長及轉移[5-6],本研究結果顯示,大腸癌組TGF-β1陽性表達率90.3%,明顯高于正常結腸組織組11.3%(P＜0.05)。淋巴結轉移組的TGF-β1表達強度顯著高于無淋巴結轉移組(P＜0.05),提示TGF-β1可作為反映腸腫瘤侵襲性的參考指標。

有研究認為,TGF-β1具有抑制正常細胞轉化為腫瘤細胞的功能,是抑癌基因[7,8]。在本研究中,我們檢測到癌旁正常結腸組織,腺瘤組織中TGF-β1僅有微弱表達,而在癌組織中有明顯表達。TGF-β1在正常細胞轉化為腫瘤細胞的過程中,由于機體的免疫監視機制使TGF-β1大量分泌以阻止正常細胞轉化為腫瘤細胞,但腫瘤細胞上TGF-β1受體表達缺失或功能喪失,瘤細胞逃逸TGF-β1的生長抑制作用而周圍正常細胞生長被TGF-β1抑制,減少癌細胞增殖的空間限制,為癌細胞的生長創造良好環境[5-8]。腫瘤細胞的無限生長是腫瘤轉移的前提。TGF-β1在淋巴結轉移組的高陽性率表明了其在腫瘤發生,發展及轉移中的復雜作用;推測檢測原發腫瘤標本中TGF-β1的水平有可能反映整個腫瘤的一般轉移特性。由于TGF-β1在不同組織類型中作用變化很大,故大腸癌與TGF-β1的關系值得進一步探討。

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1007-4287(2010)09-1468-02

2009-11-28)