重癥監護病房(ICU)兩種產超廣譜B-內酰胺酶細菌耐藥性動態分析

余建申,盧建明,夏 海,習德娥,向常青

(三峽大學仁和醫院1.檢驗科;2.重癥監護病房,湖北宜昌 443001)

重癥監護病房(ICU)兩種產超廣譜B-內酰胺酶細菌耐藥性動態分析

余建申1,盧建明1,夏 海1,習德娥1,向常青2

(三峽大學仁和醫院1.檢驗科;2.重癥監護病房,湖北宜昌 443001)

目的對醫院ICU(重癥監護病房)兩種常見產超廣譜B-內酰胺酶(ESBLs)細菌的檢出率及耐藥性進行動態觀察,為指導臨床合理使用抗生素提供依據。方法對我室2006至2009年從ICU標本分離的479株肺炎克雷伯菌和491株大腸埃希菌采用紙片協同試驗和雙紙片確證試驗檢測其ESBLs,并用紙片擴散法進行藥敏試驗。結果四年來大腸埃希菌產ESBLs陽性率從41.6%上升至58.4%;肺炎克雷伯菌產ESBLs陽性率從29.0%上升至35.3%。產ESBLs株對常用抗菌藥物的耐藥率明顯高于非產ESBLs株,但對碳青霉烯類抗菌藥物都敏感。結論4年來,大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌中ESBLs陽性率逐年升高,對產ESBLs菌株的治療應首選含酶抑制劑的抗生素、非B內酰胺類敏感的抗生素或碳青霉烯類抗菌藥物。

超廣譜B-內酰胺酶;耐藥;大腸埃希氏菌;肺炎克雷伯菌

(Chin J Lab Diagn,2010,14:1428)

本院自2006年以來,本室對來自ICU的標本培養后進行了病原學和藥敏分析,特別是對于大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌進行了檢出率和耐藥性的動態分析。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌是引起院內感染常見的革蘭陰性桿菌,其對抗菌藥物的耐藥性日趨嚴重。由于第3.4代頭孢菌素的廣泛應用,導致細菌對新一代B-內酰胺類抗菌藥物產生耐藥性[1]。為了解本院ICU病房產ESBLs菌株的發生率和耐藥特性,制定有效對策控制其傳播和流行,我們對整整4年來自ICU病房標本中分離的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌進行了ESBLs檢測及藥敏分析。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌株來源 2006年1月至2009年12月,從本院ICU送檢細菌培養標本中共分離出肺炎克雷伯菌479株(其中產超廣譜B-內酰胺酶156株)和大腸埃希菌491株(其中172株產超廣譜B-內酰胺酶),剔除同一病人相同部位的重復菌株。

1.1.2 質控菌株 ATCC25922大腸埃希菌,ATCC35218大腸埃希菌;ATCC700603肺炎克雷伯菌、ATCC25923金黃色葡萄球菌,ATCC27853銅綠假單孢菌,均購自杭州天和微生物試劑有限公司。

1.1.3 藥敏紙片 頭孢唑啉、頭孢噻肟鈉、頭孢哌酮、頭孢曲松、頭孢他定、慶大霉素、環丙沙星、氨曲南、阿米卡星均購自杭州天和微生物試劑有限公司;氨芐西林、美羅西林、頭孢吡肟、復方新諾明、哌拉西林/他唑巴坦、亞胺培南、氨芐西林/舒巴坦、美羅培南 、頭孢哌酮/舒巴坦、確證試驗紙片頭孢噻肟鈉、頭孢噻肟鈉/棒酸、頭孢他啶、頭孢他啶/棒酸均購自英國OXOID公司;

1.1.4 試劑 API生化反應板購自法國梅里埃公司。

1.1.5 儀器 ATB半自動生化藥敏鑒定儀。

1.2 方法

1.2.1 細菌鑒定 采用ATB鑒定系統對分離細菌株進行鑒定。

1.2.2 藥敏試驗 采用雙紙片擴散法,嚴格按照NCCLS 2005版標準進行。

1.2.3 產ESBLs檢測試驗 篩選試驗 奧格門丁/克拉維酸與頭孢他啶、頭孢吡肟、頭孢唑林、頭孢哌酮、頭孢曲松相鄰,觀察抑菌圈有無協同作用,有協同現象為陽性;確證試驗 頭孢他啶、頭孢他啶/克拉維酸;頭孢噻肟、頭孢噻肟/克拉維酸。2組紙片中任意1組或2組加克拉維酸抑菌藥的抑菌圈直徑與不加克拉維酸抑菌藥的抑菌圈直徑之差大于等于5 mm時為陽性。

2 結果

2.1 2種菌株產ESBLs的逐年檢出率 見表1。

表1 2種菌株ESBLs的逐年檢出率

2006年1月至2009年12月,臨床分離到491株大腸埃希菌和479株肺炎克雷伯菌,產ESBLs酶肺炎克雷伯菌的檢出率按年份分別為29.0%、31.4%、32.0%、35.3%;產ESBLs酶大腸埃希菌的檢出率按年份分別為41.6%、46.1%、46.9%、58.4%。2種細菌ESBLs的檢出率明顯呈逐年上升趨勢。

2.2 兩種細菌對18種抗生素的耐藥分析 見表2。

表2 大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌耐藥率(%)

用紙片擴散法測定172株產超廣譜B內酰胺酶大腸埃希菌和156株產超廣譜B內酰胺酶肺炎克雷伯菌以及不產酶的219株大腸埃希菌和323株肺炎克雷伯菌對18種抗菌藥物耐藥率,發現,大腸埃希氏菌對抗生素耐藥率由高到低前3位依次為:氨芐西林(100%、89.6%)、美洛西林(90.6%、63.6%)、復方新諾明(83.7%、61.3%)、;肺炎克雷伯菌對抗生素的耐藥率由高到低前3位依次為:氨芐西林(100%、84.3%)、復方新諾明(86.6%、41.9%)、美洛西林(77.1%、65.3%);可以看出兩種細菌耐藥率最高的前3位抗生素大致相同,從表2中也可以看出兩種細菌對碳青霉烯類(亞胺培南、美羅培南)耐藥率最低,對部分含酶抑制劑抗生素(頭孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦)的耐藥率也較低。同時也可以看出,產酶株耐藥率明顯高于非產酶株,大腸埃希菌耐藥率高于肺炎克雷伯菌的耐藥率。

3 討論

重癥監護病房(ICU),是集中疑難重危病例進行監測和積極治療的單位,也是醫院易感人群和感染因素集中的場所,由于其特殊性,患者病情危重,抵抗力差,患者接受較多的治療和監護措施,大量運用抗生素,產生耐藥菌的機會明顯增多[2].而細菌耐藥性又是全球醫療領域中的重要問題[3-4]。ESBLs陽性菌株的產生是細菌長期在抗菌藥物的作用下為適應環境而不斷變異的結果。產ESBLs菌株的出現與住院患者的細胞免疫功能下降、器官移植、介入治療、呼吸機應用等危險因素相關外,在很大程度上取決于臨床廣譜B-內酰胺類抗菌藥物特別是第3代頭孢菌素的作用。隨著第3代頭孢菌素的大量使用,臨床ESBLs陽性菌株的檢出率有明顯上升的趨勢,給臨床治療帶來了極大困難。通過表1表明,近4年來我院ESBLs菌株陽性率逐年升高,大腸埃希菌中產ESBLs菌株從2006的41.6%上升到2009年的58.4%,肺炎克雷伯菌中產ESBLs菌株從2006年的29.0%上升到2009年的35.3%。

產超廣譜B-內酰胺酶(ESBLs)主要由質粒介導,可通過接合、轉化和傳導等方式在細菌種屬之間進行傳遞,它能賦予細菌對頭孢類,青霉素類,單酰胺類,和氨曲南等抗菌藥物的耐藥,導致耐藥現象的擴散[5]。通過表2表明,ESBLs陽性菌株對頭孢菌素的耐藥率明顯高于ESBLs陰性菌株,ESBLs陽性菌株對氨基酸苷類、氟喹諾酮類、磺胺類等抗菌藥物的耐藥性也較為明顯,說明ESBLs陽性菌株存在著廣泛的多重耐藥現象。ESBLs陽性菌株對碳青霉烯抗菌藥物、部分含酶抑制劑(頭孢哌酮/他唑巴坦,哌拉西林/他唑巴坦等)抗生素均較敏感,可作為ESBLs陽性菌株病例的首選藥物。

ESBLs會使醫院感染變得復雜化,正確使用抗菌藥物有助于控制其播散與爆發流行[6]。因此及時對產ESBLs菌株進行動態監測,研究其耐藥譜的變化,對指導臨床用藥有重要的意義。由于在目前醫院抗菌藥物的使用、管理、控制的相對不規范以及大量使用抗生素,是造成耐藥菌株特別是產酶菌株出現的重要因素。特別是在重癥監護病房(ICU),病人病情嚴重,病人免疫力較低下,治療周期較長,抗生素運用相對過多,所以開展ESBLs感染的前瞻性監測,及時準確地提供給臨床,提高醫務人員對醫院感染的認識,加強抗菌藥物的合理使用及管理,對有效控制產ESBLs菌株及其他耐藥菌株在醫院的感染將起到至關重要的作用。

[1]林建平,潘品福,陶興和.醫院產超廣譜B-內酰胺酶細菌耐藥性動態觀察[J].檢驗醫學,2009,24(2):91.

[2]張 華.重癥監護病房(ICU)院內感染的控制[J].中國實用醫藥,2010,5(6):207.

[3]JonesRN,Pfaller MA.Bacterial resistance;a worldwide problem[J].Diagn Microbiol Infect Dis,1998,31(2):379.

[4]World Heath Organization.WHO global strategy for containment of antimicrobial resistance[EB/OL].WHO/CDS/CSR/DRS/2001.2.

[5]劉水音,何小峰,吳 鏑,等.產ESBLs大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌檢測及耐藥分析[J].空軍總醫院學報,2009,25(2):71.

[6]彭少華,李從榮,施菁玲,等.產超廣譜B內酰胺酶細菌的檢測及耐藥性觀察[J].中華檢驗醫學雜志,2001,24(6):350.

The dynamical analysis of two Extended-spectrum beta-lactamases(ESBL)-producing bacterias in intensive care unit(ICU)

YU Jian-shen,LU Jian-ming,XIAHai,et al.(The Renhe hospital of The Three GorgesUniversity1Clinical laboratary2intensive care unitYI Chang city,Hubei province443001,China)

Objectiveanalyse the detection rate and drug resistance of two common Extended-spectrum beta-lactamases(ESBL)-producing bacterias in intensive care unit(ICU)dynamically to provide an evidence for clinical doctors to choose antibiotics reasonably.MethodsBetween year 2006 and 2009,test Extended-spectrum beta-lactamases(ESBL)-producing rate of 479 Klebsiella pneumoniae and 491Escherichia coli isolatedfrom the samples of patients in ICU by disk synergy test and double disk test confirmatory test,at the same time do the antibiotics sensetivity test with disk diffusionmethod.ResultsIn recent four years the positive rate of extended-spectrum beta-lactamases(ESBL)-producing Escherichia coil have increased to 58.4%from 41.6%,which of Klebsiella pneumoniae have increased to 35.3%to 29.0%.The drug resistance rate of extended-spectrum beta-lactamases(ESBL)-producing bacterias is higher obviously than that of the bacteriaswhich don't produce extended-spectrum beta-lactamases(ESBL).However,all these bacterias are sensetive to Carbapenem antibiotics.ConclusionThe positive rates of Extended-spectrum beta-lactamases(ESBL)-producing Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae have increased year by year in recent 4years.For the therapy of extendedspectrum beta-lactamases(ESBL)-producing bacterias,the antibiotics including beta-lactamases inhibitor,antibiotics unsensetive to beta-lactamases and Carbapenem antibiotics should be choosed firstly.

Extended-spectrum beta-lactamases(ESBL)drug resistance Escherichia coli Klebsiella pneumoniae

R915

A

1007-4287(2010)09-1428-03

余建申(1973-),男,主管技師,從事臨床微生物檢驗13年。

2010-02-17)