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納米鋁化合物與生物有機分子界面作用的研究進展

2010-09-15 11:43:46麗湯勇錚謝艷芳陸天虹楊小弟
無機化學學報 2010年6期
關鍵詞:界面生物研究

李 麗湯勇錚謝艷芳陸天虹楊小弟*,,

(1教育部軟化學與功能材料重點實驗室,南京理工大學化工學院,南京 210094)

(2江蘇省生物功能材料重點實驗室,南京師范大學化學與環境科學學院,南京 210097)

(3南京曉莊學院生物化工與環境工程學院,南京 211171)

納米鋁化合物與生物有機分子界面作用的研究進展

李 麗1,3湯勇錚1謝艷芳2陸天虹2楊小弟*,1,2

(1教育部軟化學與功能材料重點實驗室,南京理工大學化工學院,南京 210094)

(2江蘇省生物功能材料重點實驗室,南京師范大學化學與環境科學學院,南京 210097)

(3南京曉莊學院生物化工與環境工程學院,南京 211171)

本文概述了環境和生物體系中納米鋁化合物的存在形態,主要介紹了無機納米形態鋁化合物與生物有機分子的表面/界面的作用以及宏觀、微觀和計算機模擬等研究方法,展望了該領域研究的最新進展。

納米鋁化合物;生物有機分子;界面作用

0 引 言

環境和生物界面的物理和化學性質以及反應過程是環境化學、地球化學和生物化學研究的核心領域之一。環境生物體中的生物分子如有機酸和氨基酸蛋白質分子在不同類型的土壤與植物根際以及在水體沉積物和生物組織的表面進行著十分復雜的化學、物理和生物反應,使其結構、形態和毒性發生變化。結合界面科學、催化作用和納米技術、特別是應用近代原子分子結構的鑒定儀器,試圖進一步闡明環境和生物過程的微觀機理和本質,從而更有針對性、有效地解決環境公害和持續發展問題。因此,礦物和生物組織界面上普遍存在的羥基、羧基等官能團的具體表面形態與重要的生物分子如氨基酸、多肽和蛋白質的作用,對環境科學和生命科學的基礎研究中具有重要的意義[1]。最近,世界衛生組織呼吁要優先研究超細微的顆粒物尤其是納米尺度顆粒物的生物機制[2]。環境和生物納米污染物多是膠體和高分子的前驅物。在以水為介質時,即形成與水有微界面的溶膠多相體系和高分子在水中呈真溶液的均相體系,有多方面微觀、介觀共同特征,其中納米污染物往往具有顯著的配位、極性和親脂特性,有與生命物質強烈結合進入體內的趨勢而表現出特有的生物有效性[3]。

鋁的材料學和催化劑以及生命體系中鋁的作用機制的研究是21世紀鋁化學未來研究發展的三個最重要的前沿方向。鋁的生物學可給性可以表現在動物和人腦發育與活動以及神經傳導上。Science和Nature等一流雜志報道了植物中鋁的致毒機制,以及有機酸在解鋁毒方面扮演的重要角色[4-5]。納米鋁化合物由于尺寸小,比表面積大,表面能高,位于表面的原子占相當大的比例,易于吸附其它物質而穩定下來,且隨著粒徑的減小,表面原子具有很高的活性,相對于一般的吸附材料有更大的吸附容量,能有效的吸附和配位溶液中重要的生物有機分子。納米材料對于自然科學技術和經濟領域的貢獻是巨大的,但是隨之而來的不同類型納米粒子的安全性和毒性在世界范圍內引起了廣泛的關注,并在Nature和Science等雜志有相關的報道和討論[6-8]。雖然鋁在植物體的外部排拒和內部降毒機制方面的研究取得了一定成果,但是這些理論尚不能完全適用于人類,通過許多途徑(食物、藥物、飲料和水)進入人體中的鋁都可能會導致一系列神經系統疾病如阿爾茨海默癥和帕金森綜合癥。

1 鋁的納米形態及其轉化

在中性及生理條件下,環境和生物體系中存在的納米形態鋁化合物以氧化物和氫氧化物的膠體形式存在,主要形態有 Al13/Al30/γ-AlOOH/α-Al(OH)3/γ-Al(OH)3/γ-Al2O3/α-Al2O3等無機形態以及可能的磷酸鋁/草酸鋁/檸檬酸鋁等有機形態。在鋁的無機形態中,不同形態的納米鋁氧化物在晶體結構上都是鋁離子占據在氧六面體或八面體中,六面體或八面體氧格子堆積方式的差異又使得鋁氧化物具有不同的顆粒形貌、表面結構和化學性質。其轉變關系可以如圖1所示。

圖1 鋁的氫氧化物與氧化鋁之間的相變圖[9]Fig.1 Transformation diagram between aluminum hydroxides and alumina

2 納米形態鋁化合物與有機酸分子界面作用的研究方法

納米技術要求在納米以至原子尺度實現表面分析,生命科學要求測定表面和界面上的有機化學成分和結構,包括有機大分子的成分及結構分析。只有得到表面化學與結構組成的詳細而可靠的信息,才能了解表面的作用和控制,從而保證其可靠的應用。固液界面反應包括表面位與吸附離子的作用、吸附離子與質子或羥基的反應、表面位質子化反應等化學過程。表面活性及密度、表面配合物分子形態及構型是用于描述表面反應。現有研究方法包括宏觀、微觀表征及計算機模擬等[10]。

2.1 宏觀實驗方法

表征表面電荷特性及吸附模型常用的宏觀實驗手段包括ζ電位及ζ電位偏移實驗、表面電位滴定[11]。ζ電位實驗可以用來研究表面的離子競爭吸附及沉淀反應,得到表面羥基位密度及零電荷點(PZC)、表面電荷特性等信息。而且通過宏觀實驗中ζ電位曲線的偏移,即測試不同負荷量下吸附劑懸浮液ζ曲線的移動和PZC的偏移,可以大致推測吸附后為外層或內層配合物[12]。表面電位滴定是定量描述材料表面性質、構建表面反應的基礎[13],是表面性質研究最常用的表征手段,能獲得不同pH下表面羥基密度、表面電荷密度等重要信息。在假定表面質子化機制,確認表面位類型的基礎上,可以模擬滴定曲線得到表面的質子結合常數、位密度等重要參數。

2.2 微觀研究方法

表面/界面微觀吸附機制研究中較為常用的表征技術有[14,15]:傅立葉衰減全反射紅外光譜(ATRFTIR)、表面增強拉曼散射(SERS)、X射線光電子能譜(XPS)、X 射線吸收譜(XAS)、離子散射譜(ISS)、飛行時間二次離子質譜(TOF-SIMS)、掃描隧道電子顯微鏡(STM)、原子力顯微鏡(AFM)和俄歇電子能譜(AES)等。

2.2.1 ATR-FTIR

ATR-FTIF技術,可提供關于表面分子結構、分子排列方式、官能團取向、吸附活性位及吸附物種的信息,可以在介質水存在的條件下采集到固液界面樣品吸收的紅外譜圖,并可根據分子對稱性和吸收峰簡并性的關系,得到原位的配合物形態信息[16],能為揭示原位條件下的反應本質提供直接證據,目前已經建立了一些陰離子,如磷酸、硫酸和碳酸等分子對稱性和活性吸收峰位置和數目的關系。盡管在懸浮液的定量分析中有幾個復雜的因素,如:精確減掉水的強烈吸收;校正顆粒的分散性等[17-19],該技術仍然成為原位探測金屬氧化物/水界面最有力的方法,用于各種金屬氧化物(如 TiO2,ZrO2,Al2O3,Ta2O3,Cr2O3,γ-AlOOH)的界面配合物類型的研究[20-22]。

2.2.2 SERS

表面增強拉曼散射與IR一樣能得到表面特征基團及吸附絡合物的活性吸收峰。由于水的拉曼信號很弱,能夠很方便地進行水溶液條件下的原位吸附測試,與FTIR光譜互為補充。與普通的拉曼光譜相比它可以使分子的拉曼散射得到105~106倍的增強效應。由于其靈敏度高、穩定好,且僅對金屬表面直接相連的第一層分子有顯著的增強效應,因此是非常有效的界面結構研究工具。Nordin等[23]用拉曼光譜研究了鄰苯二甲酸在γ-AlOOH/H2O界面的作用模式,并與ATR-FTIR及電位滴定聯用得到不同pH條件下的配合物形態。

2.2.3 TOF-SIMS

飛行時間二次離子質譜,可以得到表面化學結構、末端官能團,還可測定分子量分布等,兼備很高的橫向和深度分辨本領及靈敏度,能提供質譜學可檢測的分子的各種信息[24-25]。對于元素和同位素,包括氫的高度靈敏檢測導致了在不同材料科學領域中多方面的應用,包括金屬、合金、氧化物、玻璃等各種材料中氫、氧、碳、氮等元素的表面質譜、成像、深度剖析以及三維分析。從而成為獨具特色的表面和薄層分析手段。另外,利用掃描的初級離子束可以得到樣品的二次電子及吸收電子像,能清晰地觀察樣品表面的形貌。Rattana等[26]利用TOF-SIMS研究了有機硅處理的鋁氧化物表面對環氧樹脂的吸附動力學和吸附等溫線。

2.2.4 XAS

近年來國際上出現了許多用基于同步輻射的X射線吸收光譜技術(XAS)測定環境界面上微觀結構的研究。XAS依據形成機制及處理方法的不同,分為X射線吸收近邊結構區(XANES)和擴展X射線精細結構區(EXAFS)。XAS具有元素選擇特征,可通過調節X射線能量,提供目標原子的鍵長、配位數、配位原子種類、無序度因子、分布對稱性和化學價態等信息,能夠揭示結構、組成及氧化物-水界面吸附離子的模式[27]。在確定復合金屬氧化物與吸附質作用的活性位點以及絡合物結構信息方面發揮重要作用,其顯著特點在于能對濕態樣品進行原位測定。Arai等[28]研究了As(Ⅱ)和As(Ⅱ)在不同pH和離子強度條件下在γ-Al2O3/H2O界面的吸附情況。

2.2.5 XPS

XPS在表面/界面表征中應用廣泛,能夠給出表面原子組成、價態及比例等信息,可以通過XPS Peak等軟件,以分峰及子峰擬合重建的解析方式對元素在不同化學環境中的狀態和存在比例進行解析[29],并能與其它分析技術一起研究表面的化學或物理改性等。Guan[30]利用XPS和ATR-FTIR研究了鋁氧化物表面吸附簡單有機酸分子的配合物結構。

2.2.6 其他表征方法

離子散射譜(ISS),根據散射離子強度的不同,可以區別出表面的立體結構。但這種技術的分辨率和靈敏度不高,應用并不廣泛。掃描探針顯微鏡(SPM)系列,其中主要包括掃描隧道顯微鏡(STM)和原子力顯微鏡(AFM),STM可以觀察到分子、原子結構,而且能夠區分不同原子或分子團,得到表面電子態和化學特性的分析。AFM可得到表面的形貌構象,摩擦力分布、磁力結構、介電常數的變化等,還可觀測固/液界面以及各種界面吸附物的形貌[14-15]。高分辨電子能量損失譜(HRE-ELS)可以測定表面原子能級的性質、表面態密度分布、表面電荷密度分布和能量分布。電子、光子誘導脫附(ESD,PSD)測定表面原子振動、表面原子化學鍵的性質與吸附位置、吸附原子態、吸附原子的成鍵方向及與吸附質成鍵的基底的原子的情況。XPS-SIMS聯用:XPS能分析元素及官能團,但卻不能直接分析出分子結構,而SIMS,則對化學結構非常敏感,能很好分析出分子結構。表1在總結文獻[14-15,31]的基礎上列出了部分表征技術的異同點。

表1 部分表面分析技術的異同點Table 1 Similarities and differences of surface analysis techniques

2.3 計算機模擬方法

計算機模擬計算是分子水平研究界面過程最有效的手段之一[32],用于計算有機物在各種界面上的吸附行為。微觀上,能夠模擬到分子之間的反應和傳統方法難以模擬的動態微觀平衡;宏觀上,可以模擬復雜生態系統。同時,通過計算可以給出吸附后表面配合物分子簇的穩定構型,以及不同配合物空間構型穩定后的能量,從而推斷可能的吸附配合物形態。主要的表面配合軟件有MINEQA、MICROQL、MINEQL、HTYDRAQL、和 FITEQL 等,可以用于計算表面電動勢、表面電荷、吸附平衡常數、預測沉淀的形成和金屬有機配合物的形成。

3 生物有機分子與納米形態鋁化合物的界面作用

3.1 納米鋁化合物與生物有機分子界面作用的特征

納米氧化鋁表面吸附機理包括:配位體交換、靜電作用力、陽離子橋鍵、憎水作用力、熵作用及氫鍵作用等,從范氏力、陽離子橋鍵至配體交換的結合力逐漸增強。根據納米鋁化合物與有機配體作用機制的不同可分為兩種模式,一種是內層配合物即通過配體交換反應在表面鋁離子與有機配體之間形成直接的鍵,內層配合物包括單齒、多齒、單核、雙核及多核等形式。一種是外層配合物即配體通過靜電或氫鍵與表面進行作用。納米鋁化合物與有機配體的作用可以影響有機配體的傳輸及作用機制、可以保護有機物免受生物降解并且可以對納米鋁化合物表面的溶解起到抑制或促進作用[33]。上述的研究方法中如ATR-FTIR可得到原位的配合物形態信息,若有機生物分子在被納米鋁化合物吸附前和吸附后的峰形基本保持不變,并且位移比較小時則為外層配合物,如吸附前后峰形變化較大,則主要為外層配合物;并且能夠分辨不同配合物之間的相互轉變。XPS可用于界面上配合物環境及質子化狀態的探測。電位滴定可以得到表面的質子結合常數、位密度等重要參數。ICP(電感耦合等離子譜)可以用來測定界面作用對納米鋁化合物的溶解起促進或者抑制作用。XAS能提供目標原子的鍵長、配位數、配位原子種類,揭示氧化物-水界面吸附離子的模式。

生物有機分子在納米形態鋁化合物/水界面進行著一系列的遷移轉化過程,發生如吸附-解吸作用、沉淀-溶解作用、分配-溶解作用、配位-解配作用、離子交換作用以及氧化還原作用等。(氫)氧化物只具有含質子表面官能團,即表面羥基(>MeOH0,>Me代表表面陽離子)構成了表面的配合反應位。表面吸附作用影響著被吸附配體在溶液中的分配,也改變了有機分子的環境行為,影響其移動性、溶解態的濃度及質子化遷移過程,從而影響生物可利用性。某些有機物在界面上的氧化-還原形態的轉化或者催化、降解反應,可影響環境排毒的轉化,表面氧化還原反應與通常的氧化還原反應不同之處是先表面吸附后氧化還原。環境生物體系中與納米鋁化合物發生作用的有機物主要有兩大類:一類是從生物體如微生物產生的小分子脂肪酸、酚酸、氨基酸、核苷酸等;另一類則是由生物體進一步合成的大分子如腐殖酸、蛋白質等,主要內容如下表2。

表2 生物有機分子與納米形態鋁化合物的界面作用Table 2 Interface interactions between biological organic molecules and nano-aluminum compounds

續表2

3.2 納米鋁化合物與生物有機分子界面作用對生物有機分子功能的影響

溶液中Al(Ⅱ)與生物活性分子的配位作用我們已經做了大量的研究,如Al(Ⅱ)與重要的生物分子如谷胱甘肽 (GSH和GSSG)的作用及其構象的影響[53-54]。Al(Ⅱ)與谷氨酸形成的單核配合物中存在三齒配位(-COO、-NH、-COO)的方式,有助于理解 Al(Ⅱ)對轉氨基作用的酶促反應中谷氨酸結合活性位點的抑制作用以及Al-谷氨酸鹽沉淀于腦內,引起雙螺旋纖維蛋白的異常磷酸化反應,最后形成神經原纖維纏結和老年斑,并發現了它對酶促反應存在影響[55-57]。由上述結果我們有理由相信納米鋁化合物與生物活性分子的界面作用對其生物有效性也可能存在影響。

納米鋁化合物對生物有機分子的功能影響日漸引起關注,如LDH(乳酸脫氫酶)是糖的無氧酵解和糖異生的重要酶系之一,廣泛存在于心臟、肝臟、肺以及各組織,α-HBDH(羥基酸脫氫酶)以心肌組織含量較多[58]。納米氧化鋁可以使小鼠血清LDH和α-HBDH活性明顯降低,起抑制作用。納米聚合Al13,其毒性是游離的Al(Ⅱ)的10倍多,畢樹平[59]等經電化學研究發現LDH與納米Al13作用后,活性受到抑制。近來的免疫學和臨床醫學的研究發現,氫氧化鋁輔佐劑等電點為11,靜電引力使其成為吸附酸性蛋白質的優良吸附劑,因此含鋁吸附劑氫氧化鋁可以吸附抗原從而提高免疫細胞免疫反應的能力[60]。

4 展 望

溶液中生物有機分子與Al(Ⅱ)的作用研究有助于進一步研究其在納米鋁化合物界面上的作用,我們研究發現納米鋁化合物與輔酶Ⅰ(NAD+/NADH)和Ⅱ(NADP+/NADPH)存在較強的表面作用,配位主要發生在磷酸氧上,同時堿基腺嘌呤N也參與了與納米鋁化合物中Al(Ⅱ)的配位。從空間效應角度考慮,我們計算發現配位作用會引起其折疊式和展開式構象的改變。雖然納米化合物對生物有機分子的功能影響已有研究,對于同一生物有機分子,不同金屬類型的納米化合物可能起到截然相反的效果,但是對于其影響的機理方面的研究很少有文獻報道,因此有必要將納米鋁化合物與生物有機分子的界面作用形成的不同類型的配合物與相應的生物有機分子的生物有效性的關系進行研究。通過這些結果,可再進一步探索被人們忽視的中性條件下鋁的實際存在形態對生物基礎代謝的影響機制及所引起的氧化脅迫和代謝紊亂的生理、生化機制。

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Interface Interactions between Biological Organic Molecules and Nano-Aluminum Compounds

LI Li1,3TANG Yong-Zheng1XIE Yan-Fang2LU Tian-Hong2YANG Xiao-Di*,1,2
(1Key Laboratory for Soft Chemistry and Functional Materials of Ministry of Education,School of Chemical Engineering,Nanjing University of Science and Technology,Nanjing 210094)
(2Jiangsu Key Laboratory of Biofunctional Materials,College of Chemistry and Environment Science,Nanjing Normal University,Nanjing 210097)
(3Biochemical and Environmental Engineering College,Nanjing Xiaozhuang University,Nanjing 211171)

The existence states of the nano-aluminum species in biological and environmental systems are summarized in this paper.It mainly introduces the interaction between the nano-aluminum species and biological organic molecules and the investigation methods of the macroscopic,microscopic and computer modeling methods.The new prospects of the progress in this field are prospected.

nano-aluminum compound;biological organic molecule;interface reaction

O614.3+1

A

1001-4861(2010)06-0931-08

2009-10-26。收修改稿日期:2009-12-30。

國家自然科學面上基金(No.20875047,20675039,20873065)和重點基金(No.20833006)資助項目。

*通訊聯系人。E-mail:yangxiaodi@njnu.edu.cn

李 麗,女,30歲,博士研究生,講師;研究方向:元素形態分析。

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