冠心康膠囊質量標準研究

張永玲

冠心康膠囊由赤芍、丹參、降香、 紅花、川芎組成，是從冠心康顆粒改劑型而來，原標準的檢驗項目不能滿足質量控制的要求。故在膠囊劑中增加了丹參、降香、 紅花、川芎的TLC鑒別和赤芍的含量測定項，建立了冠心康膠囊質量標準。

1 儀器和試劑

LC2050高效液相色譜儀；LC2400紫外檢測器；LC2130泵，N2000色譜工作站。

原兒茶醛對照品：中國藥品生物制品檢定所提供，批號：110757-200401（含量測定用）；降香對照藥材：中國藥品生物制品檢定所提供，批號：120952-200606（供鑒別用）；川芎對照藥材：中國藥品生物制品檢定所提供，批號：120918-200507（供鑒別用）；紅花對照藥材：中國藥品生物制品檢定所提供，批號：120907-200609（供鑒別用）；甲醇：色譜醇；重蒸餾水（自制）；其余試劑為分析純。

2 方法與結果

2.1 薄層色譜鑒別

2.1.1 丹參[1]

圖1 丹參的TLC圖譜

2.1.2 降香[2]

取本品內容物4.0g，研細，加乙醚20mL，加熱回流30min，濾過，濾液揮去乙醚，殘渣加乙醇1mL使溶解，作為供試品溶液。按處方比例稱取除降香外各藥材，按處方工藝制成陰性樣品，同法制成降香藥材陰性對照液。另取降香對照藥材1.0g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法（《中國藥典》2005年版一部附錄ⅥB）試驗，吸取上述溶液5～10μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙醚-三氯甲烷（7∶2∶1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1%香草醛硫酸溶液與無水乙醇（1∶9）的混合溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，見圖2。

圖2 降香的TLC圖譜

2.1.3 川芎[3]

取本品內容物1.5g，加乙醚20mL，加熱回流1h，濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯2mL使溶解，作為供試品溶液。按處方比例稱取除川芎外各藥材，按處方工藝制成陰性樣品，同法制成川芎藥材陰性對照液。另取川芎對照藥材1.0g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法（《中國藥典》2005年版一部附錄ⅥB））試驗，吸取上述溶液各1～2μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正已烷-乙酸乙酯（9∶1）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點，見圖3。

圖3 川芎的TLC圖譜

2.1.4 紅花[4]

取本品2.0g，加水30mL超聲15min，離心，取上清液加水飽和的正丁醇提取3次，每次30mL，合并正丁醇提取液，蒸干，殘渣加甲醇1mL使溶解，作為供試品溶液。按處方比例稱取除紅花外各藥材，按處方工藝制成陰性樣品，同法制成紅花藥材陰性對照液。另取紅花對照藥材1.0g，加水30mL回流1h，用脫脂棉濾過，自“加水飽和的正丁醇提取3次”起，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法（《中國藥典》2005年版一部附錄ⅥB）試驗，分別吸取供試品溶液和對照藥材溶液各5μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-乙醚（3∶2）為展開劑，預飽和15min，展開，取出，晾干，在氨蒸氣中熏15min，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點，見圖4。

圖4 紅花的TLC圖譜

2 赤芍的含量測定[5]

2.1 色譜條件

色譜柱：Kromasil C18（4.6mm×250mm，5μm）；流動相：甲醇-水 （25∶75）；流速：1.0mL/min；檢測波長：230nm；進樣量：10μL；柱溫：25℃。色譜圖見圖5。

式中，為核密度方程，h為閾值，n為閾值范圍內的聚落點數，d為數據的維數.當d=2時，常見的核密度方程即可以定義為：

圖5 含量測定色譜圖

2.2 溶液的制備

2.2.1 對照品溶液的制備

精密稱取芍藥苷對照品適量，加甲醇制成每1mL含80μg的溶液，即得。

2.2.2 供試品溶液的制備

取本品內容物，研細，取約0.2g， 精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加甲醇25mL，稱定重量，超聲30min（功率250W，頻率33kHz），取出，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

2.2.3 陰性對照溶液的制備

依據【處方】中的比例，按【制法】制備缺赤芍的陰性對照樣品，按“2.2.2”項下的制備方法制備陰性對照溶液。

2.3 線性關系考察

吸取上述對照品溶液2.5、5、10、15、20μL注入液相色譜儀，測得峰面積積分值，以對照品溶液進樣體積為橫坐標，以峰面積積分值為縱坐標作圖，得標準曲線，回歸方程為：

Y=155551X-1112.9，r=0.9996，

結果表明，芍藥苷在0.21～1.7μg呈良好的線性關系。

2.4 精密度試驗

吸取對照品溶液10μL，連續進樣6次，結果芍藥苷峰面積平均值為404583.090，RSD為0.78%。

2.5 穩定性考察

分別在0、2、4、6、8h吸取供試品溶液進樣，測其峰面積，RSD為1.32%，結果表明制備的供試品溶液穩定性良好。

2.6 重復性試驗

取同一供試品，照“2.2.2”項下方法制備供試品溶液6份，同法進行含量測定。結果含量平均值為2.95mg/粒，RSD為1.33%。

2.7 加樣回收率試驗

分別精密量取對照品儲備液（0.75mg/mL）1mL，加入已知含量的樣品（2.95mg/粒）6份（約0.75mg）中，按含量測定方法制備及測定，結果平均回收率為99.4%（n=6），RSD為1.04%。

2.8 樣品含量測定

取樣品10批，進行含量測定，結果見表1。

3 討 論

采用薄層色譜法對處方中丹參、降香、 紅花、川芎四味藥進行了定性鑒別，結果斑點清晰，重現性好，陰性無干擾，可以列入冠心康膠囊的質控標準。

表1 十批樣品含量測定結果

采用高效液相色譜法對本制劑中的芍藥苷進行定量研究，以陰性對照品水平操作，進行對照試驗，結果專屬性強、重現性好，可以列入冠心康膠囊的質控標準。

[1]中華人民共和國衛生部藥典委員會.部頒標準[S].中藥成方制劑.十四冊:73.

[2]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[S].2005年版.一部.北京:化學工業出版社,2005:158.

[3]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[S].2005年版.一部.北京:化學工業出版社,2005:28.

[4]中華人民共和國衛生部藥典委員會.部頒標準[S].中藥成方制劑.十三冊:124.

[5]董春芬,劉天福,管玉竹.高效液相色譜法測定冠心康顆粒中芍藥苷的含量[J].中華實用中西醫雜志,2003,16(3):840-841.