染色體核型與急性髓系白血病誘導(dǎo)成功的關(guān)系

[摘要] 目的 評(píng)價(jià)染色體核型在急性髓系白血病(AML)WHO 分型系統(tǒng)中的作用。方法 107例AML患者按WHO標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分型診斷，并對(duì)診斷后各亞型之間的誘導(dǎo)化療完全緩解率(CR)進(jìn)行分析。結(jié)果 AML中伴有重現(xiàn)染色體異常36例(33.6%)，染色體核型均為低危;伴有多系發(fā)育異常24例(22.4%)，染色體核型中危17例、高危7例;不另做分類(lèi)占47例(43.0%)，染色體核型中危39例、高危8例。伴t(8;21)和伴inv(16)或t(16;16)患者的誘導(dǎo)化療CR 率顯著高于不另做分類(lèi)的(P<0.05)。有多系增生異常患者的誘導(dǎo)化療CR率明顯低于無(wú)多系增生異常患者(P<0.05)。結(jié)論 AML各亞型之間誘導(dǎo)化療CR率不同，細(xì)胞遺傳學(xué)是預(yù)測(cè)急性髓系白血病達(dá)到CR最有用的因子之一。

[關(guān)鍵詞] 白血病，髓系，急性;染色體核型;WHO 分型

[中圖分類(lèi)號(hào)] R733.31 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A[文章編號(hào)] 1673-9701(2010)12-03-03

Relationship between Chromosome Karyotype and Induction Success in Acute Myeloid Leukemia

PAN Xin1WANG Xiaomin2CHI Hongmei2ZHU Lin2LI Yan2FU Ling2MAO Min2ZHANG Xiaoyan2

1.Postgraduate College of Xinjiang Medical University， Urumuqi 830000，China;2.Department of Hematology，People’sHospital of Xinjiang Uygur Autonomous Region， Urumuqi 830000，China

[Abstract] Objective To explore the role of chromosome karyotype in the WHO classification of acute myeloid leukemia(AML). Methods One hundred and seven patients were diagnosed as AML according to the WHO classification. A comparative analysis was made of the complete remission rate(CR) of preoperative induction chemotherapy between the various subtypes. Results In 107 cases of AML，36 cases(33.6%) showedthe recurrent chromosome abnormalities and chromosome karyotype was of favorable risk， 24 cases(22.4%) showed multilineage dysplasia，17 cases were of intermediate risk and 7 cases were of high risk. And other 47 cases(43.0%) failed to be categorized，in which 39 cases were of intermediate risk and 8 cases were of high risk. The CR rate of induction chemotherapy in the AML cases with t(8;21)and AML with inv(16)or t(16;16)was significantly higher than that of those cases that failed to be categorized(P<0.05). The CR rate of induction chemotherapy in the AML cases with multilineage dysplasia was significantly lower than that of the AML cases without multilineage dysplasia(P<0.05). Conclusion The CR rates of induction chemotherapy are different between the various subtypes of AML， and cell genetics is one of the most useful factors for predicting the attainment of CR in AML.

[key words] Leukemia;Myeloid，acute;Chromosome karyotype;WHO classification

“WHO 造血組織和淋巴組織腫瘤分類(lèi)方案(2001)”以白血病免疫學(xué)、細(xì)胞遺傳學(xué)、分子生物學(xué)特征更新了白血病的診斷，使其與現(xiàn)代白血病治療策略的制定相適應(yīng)[1，2]，其中細(xì)胞遺傳學(xué)分析對(duì)于AML尤為重要，大多數(shù)AML患者都存在非隨機(jī)的染色體異常，對(duì)于診斷分型、治療選擇及療效評(píng)價(jià)有至關(guān)重要的作用[3，4]。本文對(duì)我院按WHO 標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分型診斷的107例AML患者的完全緩解率進(jìn)行分析，并探討細(xì)胞遺傳學(xué)的作用，現(xiàn)報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1病例選擇

2007年3月～2009 年6月按WHO標(biāo)準(zhǔn)確診的初治AML患者共107例，其中男69例，女38 例。平均年齡為45.5(3～79)歲。

1.2分型

按WHO 標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分型:結(jié)合患者的臨床病史、細(xì)胞形態(tài)學(xué)、細(xì)胞/分子遺傳學(xué)、免疫表型分析等資料按WHO 標(biāo)準(zhǔn)[1，2]進(jìn)行診斷分型。具體方法如下:分類(lèi)計(jì)數(shù)患者的骨髓片和血片，分類(lèi)計(jì)數(shù)200個(gè)骨髓有核細(xì)胞和100個(gè)外周血有核細(xì)胞。原始細(xì)胞計(jì)數(shù)方法為:原始細(xì)胞包括原始粒細(xì)胞I 型和原始粒細(xì)胞Ⅱ型，此外M2b是以異常的中性中幼粒細(xì)胞為主，M4和M5還包括原始和幼稚單核細(xì)胞，M7還包括原始巨核細(xì)胞，急性早幼粒細(xì)胞白血病(APL)還包括異常早幼粒細(xì)胞。單獨(dú)分類(lèi)各系細(xì)胞確定各系發(fā)育異常。標(biāo)準(zhǔn)為:1)紅系，計(jì)數(shù)100個(gè)有核紅細(xì)胞，病態(tài)造血為巨幼樣變、核碎裂、核分葉或多核、環(huán)狀鐵粒幼細(xì)胞，胞漿空泡;2)粒系，計(jì)數(shù)100個(gè)中性粒細(xì)胞，病態(tài)造血為胞漿顆粒減少、假Pelger-Hu?觕t 異常和過(guò)分葉核細(xì)胞;3)巨核系，瑞-吉染色骨髓涂片計(jì)數(shù)至少25個(gè)巨核細(xì)胞，病態(tài)造血為小巨核細(xì)胞、單葉核或多核巨核細(xì)胞。AML 伴有多系發(fā)育異常的診斷標(biāo)準(zhǔn)為至少兩系≥50%的細(xì)胞有病態(tài)造血。應(yīng)用流式細(xì)胞儀免疫表型檢測(cè)協(xié)助診斷分型。

1.3染色體核型分析

取患者骨髓，經(jīng)1640培養(yǎng)基24h培養(yǎng)后，用秋水仙酰胺阻留中期分裂相，收集有絲分裂象細(xì)胞常規(guī)制片，經(jīng)過(guò)R顯帶及吉姆薩染色，根據(jù)細(xì)胞遺傳學(xué)國(guó)際命名體制(ISCN，1995)識(shí)別和描述[3]。

1.4融合基因檢測(cè)

用RT-PCR法檢測(cè)AML1-ETOPM，L-RARα和CBFB- MYH11，具體方法見(jiàn)文獻(xiàn)[5]。

1.5治療

M3誘導(dǎo)治療采用全反式維甲酸或全反式維甲酸加三氧化二砷雙誘導(dǎo)治療，其余均采用標(biāo)準(zhǔn)劑量的DA方案聯(lián)合方案治療，年齡>60歲患者應(yīng)用CAG或HAG方案化療[6]。

1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件包，行χ2檢驗(yàn)。

2結(jié)果

(1)本系列分析的AML共有107例，按WHO分型構(gòu)成比為:AML伴有重現(xiàn)染色體異常占33.6%(36例)，AML伴有多系發(fā)育異常占22.4%(24例)，無(wú)治療相關(guān)性AML，AML不另做分類(lèi)占43.0%(47例)。患者按WHO分型各亞型構(gòu)成比及化療完全緩解比率見(jiàn)表1。

(2)AML伴t(8;21)/AML1-ETO共9例，按國(guó)內(nèi)AML標(biāo)準(zhǔn)確診的M2b 5例，余為M2a 4例;AML伴inv(16)(p13q22)或t(16;16)(p13;q22)/CBFB-MYH11與M4Eo 的吻合率為100%;AML 伴t(15;17)/PML-RARα25例，其中誘導(dǎo)治療一療程后達(dá)CR 23例(92%)，未緩解2例，其中1例患者出現(xiàn)心梗、另1例心功能不全難以耐受治療。無(wú)一例11q23異常。

(3)24例AML伴有多系增生異常患者，男∶女比例為16∶8，繼發(fā)于MDS伴有多系病態(tài)血AML 22例，無(wú)先期MDS伴有多系病態(tài)造血AML 2例。這類(lèi)患者骨髓原始細(xì)胞比例(中位數(shù)為28.97%)明顯低于無(wú)病態(tài)造血的AML(P<0.05)，其高危核型檢出率(29.17%)明顯高于無(wú)多系增生異常患者(9.63%)(P<0.05)。

(4)3例患者出現(xiàn)t(9;22)(q34;q11)核型，分別為:2例M4，其中之一為慢性粒細(xì)胞白血病轉(zhuǎn)化而來(lái)，應(yīng)用DA方案化療未緩解，另1例給予化療后緩解，不久即復(fù)發(fā);1例M6應(yīng)用化療效果差，未緩解。

(5)AML伴t(8;21)和AML 伴inv(16)或t(16;16)患者的誘導(dǎo)化療CR 率81.8%，顯著高于不另做分類(lèi)的AML患者46.8%(P<0.05)，見(jiàn)表2。不另做分類(lèi)的AML患者染色體核型中危39例、高危8例。

(6)有多系增生異常患者的誘導(dǎo)化療CR 率20.8%，明顯低于無(wú)多系增生異常患者65.1%(P<0.05)。見(jiàn)表3。有多系增生異常患者染色體核型染色體核型中危17例、高危7例，無(wú)多系增生異常患者中染色體核型低危所占比例為43.4%。

(7)染色體核型低危患者化療CR率88.9%，顯著高于染色體核型高危患者26.7%(P<0.05)，且高于染色體核型中危患者41.1%，患者按染色體核型預(yù)后分層構(gòu)成比及化療完全緩解比率見(jiàn)表4。低危與中危核型患者化療CR率比較見(jiàn)表5。

3討論

急性白血病FAB 形態(tài)學(xué)分型因其對(duì)實(shí)驗(yàn)室條件要求不高，得到廣泛應(yīng)用，但該分型存在諸多不足，特別是未將判斷AML預(yù)后的染色體異常考慮在內(nèi)。2001年的WHO造血組織和淋巴組織腫瘤分類(lèi)方案對(duì)AML的診斷作了修改:外周血或骨髓原始細(xì)胞≥20%可診斷為AML。當(dāng)患者被證實(shí)有克隆性重現(xiàn)性細(xì)胞遺傳學(xué)異常時(shí)，即使原始細(xì)胞<20%也應(yīng)診斷為AML。伴有多細(xì)胞系病態(tài)造血的AML及治療相關(guān)性AML和MDS分別單獨(dú)劃分為獨(dú)立亞類(lèi)，將M6 細(xì)分為紅系/粒單核系白血病和純紅系白血病。

我們的數(shù)據(jù)來(lái)源于一組新發(fā)急性髓系白血病，經(jīng)過(guò)較長(zhǎng)時(shí)間的隨訪，顯示了一些在診斷時(shí)發(fā)現(xiàn)的特異細(xì)胞遺傳學(xué)改變能預(yù)示治療結(jié)果。這個(gè)研究包括一群相對(duì)同質(zhì)的新發(fā)急性髓系白血病患者，他們接受了類(lèi)似的誘導(dǎo)化療。本系列提示W(wǎng)HO分型的AML伴inv(16)(p13q22)或t(16;16)(p13;q22)/CBFB-MYH11與FAB分型的M4Eo 的吻合率為100.0%，常規(guī)染色體核型難以識(shí)別inv(16)，所查2例M4Eo染色體核型為47，XY，+22[6]/48，XY，+8，+22[5]及46，XY，-7，+der(7)[1]/46，XY，N[8]，但CBFB-MYH11融合基因均陽(yáng)性支持診斷，且其中1例有+22，相關(guān)研究提示+22與inv(16)相關(guān)[7]。本研究中伴t(15;17)/PML -RARα患者所占AML比例為23.4%，與根據(jù)染色體核型進(jìn)行分析的大系列[8]的比例相似。本研究無(wú)一例11q23 異常，與Schoch 等[9]發(fā)現(xiàn)不一致，可能是收治患者及所分析病例數(shù)相對(duì)偏少所帶來(lái)的偏差。有多系發(fā)育異常AML的比例基本與文獻(xiàn)[8]報(bào)道一致，該亞型從近期療效來(lái)看明顯差于其他亞型，特別是此前有MDS病史者，第1療程CR率僅為18%，相對(duì)于無(wú)多系增生異常患者，其患者年齡大，重要臟器功能差，化療的耐受性差，化療后骨髓抑制期長(zhǎng)，并發(fā)癥多。本系列治療相關(guān)性AML 比例明顯低于文獻(xiàn)報(bào)道[8]，可能與我國(guó)腫瘤現(xiàn)代聯(lián)合化療開(kāi)展較西方國(guó)家晚且普及程度較差有關(guān)。3例患者出現(xiàn)t(9;22)(q34;q11)核型，治療預(yù)后差，與NCCN 2009 AML臨床指南將t(9;22)列為高危的細(xì)胞遺傳學(xué)指標(biāo)相符和。

盡管本系列中收治患者及所分析病例數(shù)相對(duì)偏少，AML伴11q23/MLL、有多系發(fā)育異常AML和治療相關(guān)性AML病例數(shù)較少，且隨訪時(shí)間較短，尚不能進(jìn)行各亞型之間的長(zhǎng)期生存的比較，但現(xiàn)有分析結(jié)果表明，AML的WHO分型各亞型的一致性及與臨床療效相關(guān)性好，主要是由于細(xì)胞遺傳學(xué)是預(yù)測(cè)急性髓系白血病達(dá)到CR最有用的因子之一，而細(xì)胞遺傳學(xué)在WHO分型中占重要地位[10]。

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(收稿日期:2010-01-15)