支氣管肺發(fā)育不良患兒尿LTE4水平變化的臨床意義

[摘要]目的 連續(xù)測(cè)定高危早產(chǎn)兒出生后到6個(gè)月各階段尿中白三烯E4(LTE4)的水平，探討其與支氣管肺發(fā)育不良患兒的關(guān)系。方法 選擇在本院住院的高危早產(chǎn)兒15例，新生兒15例。早產(chǎn)兒留取第2、7、14、28天的尿液，新生兒取第2、7、14、28天尿液作對(duì)照，采用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測(cè)LTE4水平。結(jié)果 正常新生兒的LTE4維持在較低的水平，早產(chǎn)兒一周內(nèi)的LTE4水平也變化不大，14天時(shí)早產(chǎn)兒LTE4水平開始上升，與正常新生兒相比二者有顯著性差異(P<0.01)，早產(chǎn)兒28天后的LTE4水平維持高水平(P<0.01)。結(jié)論 LTE4是哮喘的重要炎性反應(yīng)介質(zhì)，與患兒吸氧、呼吸機(jī)、肺不成熟密切相關(guān)，連續(xù)監(jiān)測(cè)尿液LTE4水平對(duì)早產(chǎn)兒支氣管肺發(fā)育不良(BPD)的早期診斷、指導(dǎo)治療支氣管肺發(fā)育不良及改善預(yù)后具有重要作用。

[關(guān)鍵詞] 支氣管肺發(fā)育不良;新生兒;早產(chǎn)兒;LTE4水平

[中圖分類號(hào)] R722 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-9701(2010)12-80-02

Changes of Urinary LTE4 Level in Children with Bronchopulmonary Dysplasia:Clinical Significance

HE WeihengMEI Jiaping LIANG Qiwen

Shenzhen Maternal﹠Child Healthcare Hospital，Shenzhen 518028，China

[Abstract] Objective To observe the urine leukotrienes E4 levels(LTE4) of high-risk premature babies from being born to six months and explore the relationship between bronchopulmonary dysplasia(BPD) and the urine LTE4 level. Methods According to the diagnosis criteria，the urinary LTE 4 levels of two groups(one group included 15 premature children and the other 15 full-term children) were detected on Day 2，14 and 28 respectively by enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) method， and the statistical analysis was made by using SPSS15.0 software. Results The urinary LTE4 of full-term children was maintained at a relatively lower level. The urinary LTE 4 level of premature children showed little change within the first 7 days，but after 14 days，the level began to rise， remarkably higher than that of the full-term babies(P<0.01)， and the urinary LTE4 of premature children was still at a higher level after 28 days(P<0.01). Conclusion The urinary LTE4 is an important inflammatory mediator of asthma，and closely related to children oxygen uptake， breathing machine and lung immaturity. To observe the urine LTE4 level of premature children is important for the early diagnosis of， and the guidance of treatment of，BPD and the improvement its prognosis.

[Key words] Bronchopulmonary dysplasia;Newborn;Premature children;Urine leukotrienes E4 level

支氣管肺發(fā)育不良(BPD)是一種慢性疾病，其發(fā)生與正壓通氣、高濃度給氧、早產(chǎn)兒肺發(fā)育不成熟、感染炎癥致肺損傷密切相關(guān);白三烯E4(LTE4)為白三烯的代謝終產(chǎn)物，通過(guò)作用于白三烯受體導(dǎo)致呼吸道阻塞及呼吸道炎癥反應(yīng)，在支氣管肺發(fā)育不良患兒中起效應(yīng)介質(zhì)作用。LTE4水平與氣道炎癥、肺功能惡化的研究正在逐步深入。本研究旨在通過(guò)連續(xù)測(cè)定高危早產(chǎn)兒出生后尿中白三烯E4的水平，探討高危早產(chǎn)兒與正常新生兒尿中白三烯的關(guān)系。

1資料與方法

1.1一般資料

2008年8月～2009年5月在本院住院的高危早產(chǎn)兒(孕周<33周，體重<1500g)15例，其中男8例，女7例;正常新生兒15例，男9例，女6例。同時(shí)收集臨床指標(biāo)(孕周、體重、疾病、用氧、呼吸機(jī)參數(shù)、感染因素、治療情況等)。

1.2方法

收集早產(chǎn)兒出生后2天、7天、14天、28天時(shí)的尿液;收集正常新生兒生后2天、7天、14天清晨第一次尿液或24小時(shí)尿液;2000r/min離心15min后收集上清1mL，并將標(biāo)本保存于-20℃，且應(yīng)避免反復(fù)凍融，采用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法測(cè)定尿液中LTE4水平(試劑盒由武漢中美科技有限公司提供)，結(jié)果以pg/mL為單位，檢測(cè)靈敏度為1.95pg/mL，每次均有相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)品作質(zhì)控。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS15.0軟件分析，數(shù)據(jù)以(χ±s)表示。均數(shù)比較采用配對(duì)t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

早產(chǎn)兒和新生兒各時(shí)段尿LTE4水平檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1。新生兒及早產(chǎn)兒2天的尿LTE4水平兩組均值比較t值為2.3，P>0.05;7天的兩組數(shù)據(jù)相比t值為6.4，P<0.01。新生兒及早產(chǎn)兒14天的尿LTE4水平兩組均值比較t值為6.7，P<0.01，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;28d的早產(chǎn)兒組，其尿液的LTE4維持在高水平，與對(duì)應(yīng)的新生兒數(shù)據(jù)相比也存在顯著性差異。

3 討論

BPD是以肺功能改變?yōu)樘卣鞯募膊　?967年Northway最早將支氣管肺發(fā)育不良(BPD)定義為生后28天仍需氧;以后Bancalari將BPD定義為生后28天時(shí)機(jī)械通氣并需氧(維持PaO2>50mmHg)，胸片異常。Shannon建議采用校正胎齡36周仍需氧定義BPD，認(rèn)為此定義更能準(zhǔn)確地預(yù)測(cè)肺的預(yù)后。因此BPD的早期診斷標(biāo)準(zhǔn)并不正確。而有人在BPD患兒的嬰兒后期發(fā)現(xiàn)與健康同齡嬰兒相比，其尿中白三烯E4水平增高，提示LTE4可能在BPD的發(fā)生、發(fā)展中起到一定作用[1]。

在BPD的發(fā)病機(jī)制中，早產(chǎn)兒肺不成熟，出生早期肺部原發(fā)病-HMD是發(fā)生的基礎(chǔ)，其中氧自由基、炎癥因子損傷起重要作用，BPD患兒存在明顯的氣道高反應(yīng)。

Ferreira等[2]報(bào)道，在BPD患兒支氣管肺泡沖洗液(BALF)中發(fā)現(xiàn)粒細(xì)胞與肺水腫具相關(guān)性，肺中性粒細(xì)胞聚集時(shí)患兒外周血中性粒細(xì)胞減少，BPD患兒體內(nèi)多種炎性因子表達(dá)水平上調(diào)(如IL-Ia，IL-6，TNF-β等)。從皮質(zhì)激素(GC)治療的有效性表示炎癥反應(yīng)在BPD發(fā)病中的作用。

Adams使用MRI對(duì)20例嬰兒及35例23～33周患兒肺檢查，根據(jù)圖像的相對(duì)質(zhì)子密度來(lái)判斷積水量和分布情況。結(jié)果在BPD嚴(yán)重患兒，平均質(zhì)子密度、圖像質(zhì)子密度梯度和肺損傷的嚴(yán)重度較高，以肺后葉最重，BPD與較高的肺水負(fù)荷和重力依賴的肺不張及肺泡積液有關(guān)，這些局灶性組織損傷呈不均勻分布。

早在上世紀(jì)30年代，白三烯作為過(guò)敏反應(yīng)中慢反應(yīng)物質(zhì)已經(jīng)被認(rèn)識(shí)，白三烯參與了氣道炎癥細(xì)胞聚集和炎癥介質(zhì)釋放，增加血管通透性和滲出，誘發(fā)氣道高反應(yīng)性，促使氣道平滑肌收縮和增殖以及氣道重塑，是氣道炎癥的重要介質(zhì)[3]，分為白三烯A4、白三烯B4、白三烯C4、白三烯D4和白三烯E4五個(gè)類型，主要來(lái)源于嗜酸粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和肺泡巨噬細(xì)胞等。上述細(xì)胞在活化狀態(tài)下，細(xì)胞和核膜的脂質(zhì)雙層經(jīng)磷脂酶A2代謝產(chǎn)生花生四烯酸，花生四烯酸經(jīng)5-脂氧化酶途徑(5-lipoxygenase pathway)代謝生成白三烯[4]。其中，白三烯A4最先形成，并很快轉(zhuǎn)化為白三烯B4、白三烯D4和白三烯E4，分別為白三烯C4的半胱酰型[5]。白三烯在變應(yīng)性炎性反應(yīng)中的作用主要有:①作為嗜酸粒細(xì)胞的趨化因子:導(dǎo)致組織中嗜酸粒細(xì)胞浸潤(rùn)增多，相應(yīng)地產(chǎn)生更多CysLTs，而嗜酸粒細(xì)胞釋放嗜酸粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白等細(xì)胞毒性蛋白，導(dǎo)致組織病理學(xué)改變;②調(diào)節(jié)腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor α，TNFα)、IL-6和黏附分子等細(xì)胞因子的產(chǎn)量;③上調(diào)巨噬細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞組胺受體的表達(dá)水平，放大機(jī)體對(duì)組胺的反應(yīng)。由于炎性介質(zhì)刺激了CysLTs的產(chǎn)量，后者可通過(guò)增加IL-5、GM-CSF和TGF-β等Th2細(xì)胞因子的產(chǎn)量調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)[6]，因此，CysLTs對(duì)呼吸道變應(yīng)性的病理生理學(xué)過(guò)程起重要作用。BPD患兒存在明顯的氣道高反應(yīng)，甚至早產(chǎn)兒無(wú)論有無(wú)HMD都有這種趨勢(shì)。究竟是先天性易患病的體質(zhì)，還是新生兒期的炎性肺損傷，亦或小氣道的解剖學(xué)的異常還不清楚。

本課題采用全盲的前瞻性的控制研究，通過(guò)測(cè)定高危早產(chǎn)兒(孕周<33周，體重<1500g)生后2天、7天、14天、28天以至更長(zhǎng)時(shí)間或校正胎齡36周時(shí)尿中LTE4的水平，收集臨床指標(biāo)(孕周、體重、疾病、用氧、呼吸機(jī)參數(shù)、感染因素、治療情況等)于生后28d或校正胎齡36周時(shí)根據(jù)《實(shí)用新生兒學(xué)》第三版BPD的診斷標(biāo)準(zhǔn)探討LTE4對(duì)BPD的早期診斷意義。通過(guò)連續(xù)測(cè)定高危早產(chǎn)兒生后第2、7、14、28天尿中白三烯E4的水平并與正常新生兒組對(duì)照，發(fā)現(xiàn)正常新生兒尿中白三烯E4水平維持在一相對(duì)低的水平，期間變化不明顯(P>0.05)，并無(wú)明顯的臨床意義;早產(chǎn)兒情況則不同，早產(chǎn)兒7天內(nèi)的LTE4水平與正常新生兒相比無(wú)明顯變化(P>0.05)，但早產(chǎn)兒由于體重偏低，隨著介入治療如呼吸機(jī)使用、吸氧、應(yīng)用藥物增多等，其尿中白三烯E4的水平開始上升，從測(cè)定的數(shù)據(jù)看，14d的早產(chǎn)兒與新生兒比已有顯著性差異(P<0.01)。BPD涉及一系列炎性細(xì)胞和炎癥介質(zhì)的復(fù)雜過(guò)程，白三烯是重要炎癥介質(zhì)之一，它對(duì)于BPD的發(fā)生發(fā)展起著關(guān)鍵作用。本研究表明尿中LTE4濃度的變化與肺功能的變化呈顯著相關(guān)性，白三烯在上下呼吸道的炎癥中起重要作用。隨著本研究的進(jìn)一步深入，了解尿中LTE4水平對(duì)BPD患兒中遠(yuǎn)期預(yù)后及治療的指導(dǎo)意義將會(huì)更加明晰。

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(收稿日期:2010-02-23)