運(yùn)動(dòng)性骨骼肌損傷相關(guān)指標(biāo)的實(shí)驗(yàn)研究

摘要：探討血清肌酸激酶(CK)、乳酸脫氫酶(LDH)以及波形蛋白(Vimentin)與骨骼肌損傷的關(guān)系，將50只8周齡SD大鼠隨機(jī)分為安靜組(C)和運(yùn)動(dòng)組(B₁，B₂，B₃，B₄)，運(yùn)動(dòng)組進(jìn)行重復(fù)3d的力竭性離心運(yùn)動(dòng)，電鏡和光鏡檢測骨骼肌損傷病理生理變化，分光光度法檢測大鼠血清CK、LDH的變化和免疫組化檢測波形蛋白的表達(dá)。結(jié)果顯示：1)血清CK、LDH出現(xiàn)時(shí)程變化，并與骨骼肌損傷出現(xiàn)了一致性；2)波形蛋白免疫反應(yīng)分值呈現(xiàn)時(shí)程性。結(jié)論：1)CK可作為骨骼肌損傷的間接指標(biāo)；2)波形蛋白的表達(dá)暗示著骨骼肌損傷后的再生。

關(guān)鍵詞：運(yùn)動(dòng)性骨骼肌損傷；肌酸激酶；乳酸脫氫酶；波形蛋白；時(shí)程

中圖分類號(hào)：G804.53 文章編號(hào)：1009-783X(2011)02-0184-04 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

在運(yùn)動(dòng)實(shí)踐中，由于肌肉活檢的限制，常用骨骼肌損傷的一些間接指標(biāo)來反映肌細(xì)胞損傷程度，例如，血清肌酸激酶、乳酸脫氫酶、肌紅蛋白以及與炎癥反應(yīng)有關(guān)的蛋白(如急相蛋白)和炎癥過程指標(biāo)物等。近年來，結(jié)蛋白和波形蛋白的發(fā)現(xiàn)為肌肉病理研究開拓了一個(gè)新的領(lǐng)域，但是這些指標(biāo)與運(yùn)動(dòng)性骨骼肌損傷的關(guān)系有不同的說法，本文通過對(duì)大鼠運(yùn)動(dòng)性骨骼肌損傷的直接測定和間接指標(biāo)測定，從而探討這些間接指標(biāo)與骨骼肌損傷之間的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)對(duì)象及分組

健康成年8周齡雄性(sprague-dawley，SD)大鼠50只，體重(212.55±15.74)g(購自湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物中心，許可證號(hào)：湘scxk 2003－003)，為清潔級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。以國家標(biāo)準(zhǔn)嚙齒類動(dòng)物飼料分籠飼養(yǎng)，自由飲食和飲水。適應(yīng)喂養(yǎng)3d后，進(jìn)行一次5～10min跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)適應(yīng)性訓(xùn)練(速度為16m／min，坡度為0°)。隨機(jī)分成對(duì)照組(A)和運(yùn)動(dòng)后即刻(B₁)、運(yùn)動(dòng)后3h(B₂)、運(yùn)動(dòng)后24h(B₃)和運(yùn)動(dòng)后48h組(B₄)，每組10只大鼠。實(shí)驗(yàn)期間室溫為20～25℃，相對(duì)濕度為45％～55％，自然晝夜節(jié)律變化光照。

1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物運(yùn)動(dòng)方案

運(yùn)動(dòng)組大鼠進(jìn)行3d的運(yùn)動(dòng)跑臺(tái)適應(yīng)性訓(xùn)練(速度為16m／min，坡度為16°，時(shí)間為5～10min)后，休息2d，正式開始實(shí)驗(yàn)，力竭模型采用跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)，速度為16m／min，坡度為16°，持續(xù)運(yùn)動(dòng)至力竭。運(yùn)動(dòng)中采用聲、光刺激或毛刷機(jī)械刺激鼠尾部，或中間適當(dāng)休息2～4min，當(dāng)動(dòng)物出現(xiàn)臥位跑、反應(yīng)遲鈍，“逃避反應(yīng)”極差，短時(shí)間休息后(低于10min)仍無法持續(xù)運(yùn)動(dòng)，則視為力竭。

1.3標(biāo)本制備

實(shí)驗(yàn)運(yùn)動(dòng)方案結(jié)束后，用0.1％戊巴比妥鈉1mL／100g腹腔注射進(jìn)行麻醉。眼球取血1.5mL于離心管中，將血樣離心(4℃，3000r／min，10min)分離血清，血清于－80℃低溫冰箱貯存待測。迅速取右前肢肱三頭肌內(nèi)側(cè)頭下端肌腱和肌腹交界處取約1.0mm×1.0mm×0.2mm標(biāo)本放入4℃預(yù)冷的生理鹽水洗凈血液，濾紙吸干肌肉組織表面水分，置于4％多聚甲醛溶液中固定24h，4℃冰箱保存，進(jìn)行常規(guī)石蠟包埋。在每組10只動(dòng)物中隨機(jī)取1只右前肢肱三頭肌內(nèi)側(cè)頭下端0.5mm×0.5mm×0.2mm標(biāo)本放入2.5％戊二醛中固定，以備透射電鏡制備。

1.4指標(biāo)測試

1.4.1透射電子顯微鏡觀察骨骼肌損傷

透射電子顯微鏡主要觀察骨骼肌組織的結(jié)構(gòu)有：縱切面上肌原纖維、肌節(jié)排列的規(guī)則程度，A、I帶完整情況和位置關(guān)系；肌膜、肌核、形態(tài)等。主要定量觀察z線模糊、z線波紋狀改變、Z線流!z線局灶性溶解、斷裂和消失任一種情況者均稱為z線異常，并統(tǒng)許Z線異常百分?jǐn)?shù)。

1.4.2光鏡下觀察骨骼肌損傷

光鏡主要觀察骨骼肌組織的結(jié)構(gòu)有肌外膜、肌核、肌纖維的形態(tài)及肌間質(zhì)小血管、炎性細(xì)胞等，并統(tǒng)計(jì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)異常率。

1.4.3CK、LDH的測定

CK、LDH(試劑均產(chǎn)自南京建成)活性采用分光光度法測定。

1.4.4用免疫組織化學(xué)方法測定波形蛋白表達(dá)

免疫化學(xué)方法嚴(yán)格按試劑盒(美國SantaCruz公司)說明書操作，用麥克奧迪顯微分析圖像系統(tǒng)分析。每組選片4張，每張切片鏡下(×400)隨機(jī)取5個(gè)視野進(jìn)行分析，陽性物質(zhì)用光密度值和陽性表達(dá)面積表示，前者代表陽性區(qū)域波形蛋白的含量，即波形蛋白表達(dá)的程度，它的升高和降低反映了運(yùn)動(dòng)后不同的時(shí)間段各自表達(dá)程度的改變，從而間接反映骨骼肌微損傷和再生的變化情況，后者表示波形蛋白表達(dá)的范圍，則比較直接地反映骨骼肌微損傷和再生的變化情況。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析以平均光密度值，陽性面積百分比和免疫反應(yīng)分值作為評(píng)價(jià)指標(biāo)進(jìn)行半定量，來了解波形蛋白的表達(dá)規(guī)律。采用一定面積中光密度值與陽性面積的乘積作為免疫反應(yīng)分值(immunoreactive8core，IRS)，即免疫反應(yīng)分值一陽性強(qiáng)度光密度值×陽性染色區(qū)域的面積。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1肌肉損傷的形態(tài)學(xué)觀察

2.1.1肌肉組織電鏡觀察結(jié)果

對(duì)照組c縱切片可見肌節(jié)結(jié)構(gòu)完整、形態(tài)基本正常。肌原纖維排列緊密，A帶、I帶、H帶和M線清晰、完整，規(guī)律性交替排列呈明暗相間的橫紋，z線清晰、完整，偶見局部出現(xiàn)異常，例如流變等(極少)。肌膜完整，肌核大小正常，核膜光滑、完整。線粒體大小正常、包膜及嵴完整，并均勻分布于肌漿中(如圖1－C所示)。運(yùn)動(dòng)后即刻B₁組可見有A帶、I帶；z線斷裂；肌細(xì)胞腫脹，肌膜呈指狀突起；線粒體數(shù)目增多、稍腫脹，有明顯的超微結(jié)構(gòu)損傷，屬于局灶性損傷(如圖1－B₁所示)。運(yùn)動(dòng)后3h組隱約可見A帶、I帶；z線彎曲，變形，肌原纖維呈玻璃樣溶解；肌細(xì)胞腫脹，肌核固縮，肌膜皺縮；線粒體腫脹、嵴紊亂、出現(xiàn)空泡變性屬于嚴(yán)重?fù)p傷(如圖1－B₂所示)。運(yùn)動(dòng)后24h組可見有明顯的超微結(jié)構(gòu)損傷，程度比運(yùn)動(dòng)后3h組明顯地嚴(yán)重，屬于非常嚴(yán)重?fù)p傷，A帶、I帶、Z線都溶解；肌細(xì)胞腫脹，肌膜皺縮，表面有指狀突起，部分與基膜分離，甚至有肌膜溶解；肌核腫脹.固縮，線粒體腫脹、嵴紊亂、出現(xiàn)空泡變性(如圖1－B₃所示)。運(yùn)動(dòng)后48h可見超微結(jié)構(gòu)損傷減輕，程度介于嚴(yán)重?fù)p傷與非常嚴(yán)重?fù)p傷之間。部分A帶、I帶和z線可以分辨；肌細(xì)胞腫脹，肌膜皺縮；肌核腫脹，固縮；線粒體腫脹、嵴紊亂(如圖1－B₁所示)

2.1.2肌肉組織光鏡觀察結(jié)果

對(duì)照組縱切片可見長柱形的多核肌細(xì)胞排列緊密、明暗相間的橫紋清晰、規(guī)則重復(fù)排列，肌漿周邊(肌膜)下可見核呈扁橢圓形，大小正常，異染色質(zhì)較少、染色較淺。橫切片可見肌細(xì)胞呈多角形巢形分布，大小正常，肌核分布于肌漿周邊(肌膜)下，未見腫脹、固縮。肌間質(zhì)未見明顯的血管改變和炎性反應(yīng)。運(yùn)動(dòng)后即刻組部分肌質(zhì)小血管出現(xiàn)擴(kuò)張，血管內(nèi)血栓形成，并伴有極少量的炎癥細(xì)胞浸潤出現(xiàn)，肌細(xì)胞核分布不均，肌細(xì)胞腫脹等現(xiàn)象。運(yùn)動(dòng)后3h組這種肌腫脹現(xiàn)象減小。運(yùn)動(dòng)后24h骨骼肌細(xì)胞組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的異化程度達(dá)到最大。運(yùn)動(dòng)后48h，這種骨骼肌細(xì)胞組織形態(tài)結(jié)構(gòu)有所恢復(fù)，肌纖維腫脹現(xiàn)象明顯減少，炎癥細(xì)胞浸潤較多。這些結(jié)果說明了離心運(yùn)動(dòng)對(duì)骨骼肌微細(xì)結(jié)構(gòu)的影響具有延遲性，這種組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的改變?cè)谶\(yùn)動(dòng)后24h～48h間最為嚴(yán)重。

2.2CK、LDH的測定

2.2.1血清中肌酸激酶(CK)的時(shí)程變化(見表2)

連續(xù)3d力竭性離心運(yùn)動(dòng)后，血清肌酸激酶的活性相對(duì)運(yùn)動(dòng)前有所升高，運(yùn)動(dòng)后即刻血清肌酸激酶升高不顯著，在運(yùn)動(dòng)后3h，血清肌酸激酶升高至運(yùn)動(dòng)前的2.2倍，而在運(yùn)動(dòng)后24h，血清肌酸激酶的活性達(dá)到峰值，升高到運(yùn)動(dòng)前的5.4倍。而在運(yùn)動(dòng)后48h，肌酸激酶的活性又恢復(fù)到安靜狀態(tài)。

2.2.2血清中乳酸脫氫酶(LDH)的時(shí)程變化(見表2)

經(jīng)過連續(xù)3d力竭性離心運(yùn)動(dòng)后，運(yùn)動(dòng)后即刻血清乳酸脫氫酶的活性較運(yùn)動(dòng)前有很大的提高，增加到(9276.20±1380.66)U／L，與運(yùn)動(dòng)前的(5997.35±616.76)U／L相比，具有非常顯著性差異(P<0.01)，運(yùn)動(dòng)后3h與運(yùn)動(dòng)后即刻相比乳酸脫氫酶活性沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，運(yùn)動(dòng)后24h達(dá)到峰值，此時(shí)LDH活性增加到(9555.56±888.25)U／L，到運(yùn)動(dòng)后48h又恢復(fù)到運(yùn)動(dòng)前的水平。

2.3大鼠骨骼肌波形蛋白表達(dá)的時(shí)程變化

對(duì)照組無論是平均光密度值還是陽性目標(biāo)面積都有很少的表達(dá)。運(yùn)動(dòng)后即刻組大鼠骨骼肌波形蛋白表達(dá)的平均光密度值最高，說明此時(shí)表達(dá)信號(hào)最強(qiáng)；運(yùn)動(dòng)后3h波形蛋白表達(dá)強(qiáng)度明顯低于運(yùn)動(dòng)后即刻組(P<0.05)，但仍明顯高于對(duì)照組(P<0.05)；運(yùn)動(dòng)后24h，48h組表達(dá)強(qiáng)度低于運(yùn)動(dòng)后3h組，但差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與對(duì)照組也沒有顯著差異(見表3)。

運(yùn)動(dòng)后即刻組和運(yùn)動(dòng)后3h組波形蛋白表達(dá)面積高于對(duì)照組(P<0.05)，但是低于運(yùn)動(dòng)后24h組和48h組(P<0.05)。運(yùn)動(dòng)后24h和48h組表達(dá)面積沒有顯著性差異，但都明顯高于對(duì)照組(P<0.01)，這2個(gè)時(shí)相中波形蛋白表達(dá)面積最大(見表3)。

運(yùn)動(dòng)后所有時(shí)相的免疫反應(yīng)分值都明顯高于對(duì)照組。運(yùn)動(dòng)后24h時(shí)相大鼠骨骼肌中免疫反應(yīng)分值最高(見表3)。

從各組平均光密度值和陽性面積來看，B₁組平均光密度最大，以后逐漸減少。而陽性面積從運(yùn)動(dòng)后即刻開始逐漸遞增，B₃、B₄組的陽性面積最大。免疫分值在運(yùn)動(dòng)后24h，但是運(yùn)動(dòng)后即刻也較高，說明運(yùn)動(dòng)后不同時(shí)相波形蛋白有一定的表達(dá)。

3 討論

3.1骨骼肌組織形態(tài)學(xué)的變化

以往的跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)致大鼠骨骼肌損傷模型都是采用一次性下坡跑訓(xùn)練方式。取材部位都是后肢，例如，比目魚肌、腓腸肌、脛骨前肌、股四頭肌等，但是運(yùn)動(dòng)在下坡跑過程中，肌肉抵抗體重形成的運(yùn)動(dòng)負(fù)荷進(jìn)行離心收縮，最主要的工作肌群是前肢的肌四頭肌、小腿三頭肌，而對(duì)其后肢，由于體重的分布原因，作用效果小。本實(shí)驗(yàn)取材選取大鼠前肢肱三頭肌長頭下端，實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)大鼠經(jīng)過連續(xù)3d力竭性離心運(yùn)動(dòng)后骨骼肌組織形態(tài)學(xué)發(fā)生了損傷，而且損傷發(fā)生的趨勢是運(yùn)動(dòng)后即刻損傷程度較小，運(yùn)動(dòng)后3h，運(yùn)動(dòng)后24h損傷程度遞增，運(yùn)動(dòng)后即刻損傷主要表現(xiàn)在肌細(xì)胞腫大，肌核分布不均，以后隨著恢復(fù)時(shí)間的延長，炎癥細(xì)胞浸潤逐漸增加。

3.2血清CK、LDH在重復(fù)3d離心運(yùn)動(dòng)后的時(shí)程變化

血清肌酸激酶是血漿非功能性酶的一種，正常時(shí)血清中肌酸激酶主要來自骨骼肌，其濃度相對(duì)穩(wěn)定。運(yùn)動(dòng)后，由于運(yùn)動(dòng)引起人體內(nèi)環(huán)境的急劇變化，尤其是運(yùn)動(dòng)導(dǎo)致的骨骼肌細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能的變化，血清中肌酸激酶會(huì)升高。CK常用來作為骨骼肌微損傷和延遲性肌肉酸痛出現(xiàn)的一個(gè)間接指標(biāo)。

離心收縮能導(dǎo)致運(yùn)動(dòng)后血清CK活性水平的最大增加，峰值大約出現(xiàn)在運(yùn)動(dòng)后24～48h甚至更晚，延續(xù)時(shí)間長達(dá)幾天。Armstrong發(fā)現(xiàn)離心性活動(dòng)(下坡跑)可導(dǎo)致大鼠血清CK活性在運(yùn)動(dòng)后呈雙相變化，即運(yùn)動(dòng)后酶活性迅速升高，6～12h基本恢復(fù)正常，36h后再次出現(xiàn)高峰，并且血清CK活性第2次增加的程度更為顯著。他認(rèn)為造成這種現(xiàn)象的原因是由于離心性運(yùn)動(dòng)的牽拉作用導(dǎo)致了肌肉組織的嚴(yán)重?fù)p傷，從而引起部分肌好維變性壞死后使肌肉酶釋放的結(jié)果；但是近來的研究表明，血清肌酸激酶在一次性離心運(yùn)動(dòng)至力竭不同恢復(fù)時(shí)間內(nèi)，血清肌酸激酶峰值出現(xiàn)在運(yùn)動(dòng)后即刻，運(yùn)動(dòng)后1d迅速下降。本實(shí)驗(yàn)的研究發(fā)現(xiàn)，運(yùn)動(dòng)后即刻，CK活性明顯升高，在運(yùn)動(dòng)后24h達(dá)到峰值，以后逐漸恢復(fù)，與田野等人的研究結(jié)果一致，因此，血清CK活性的變化與骨骼肌組織細(xì)胞損傷率以及延遲性肌肉酸痛都具有延遲性一致。

LDH普遍存在于全身各組織細(xì)胞，尤以肌肉細(xì)胞為甚，它是機(jī)體糖酵解供能系統(tǒng)的關(guān)鍵酶之一，對(duì)機(jī)體缺氧狀態(tài)下運(yùn)動(dòng)時(shí)能量的生成、供應(yīng)及乳酸代謝有著十分重要的意義。Arm-strong的研究表明，大強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)后血漿LDH活性顯著升高，并與骨骼肌超微結(jié)構(gòu)變化一致。而于新凱、許敬等人的研究結(jié)果是運(yùn)動(dòng)后即刻乳酸脫氫酶的活性最高，以后逐漸恢復(fù)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，連續(xù)3d力竭性離心運(yùn)動(dòng)后不同恢復(fù)時(shí)間乳酸脫氫酶活性出現(xiàn)雙相增高現(xiàn)象，即運(yùn)動(dòng)后即刻和運(yùn)動(dòng)后24h2個(gè)高峰時(shí)期，這與王建芳、Armstrong等的研究結(jié)果一致。在CK和LDH這2種酶中，CK活性與骨骼肌組織細(xì)胞損傷率更為符合。

3.3波形蛋白表達(dá)的時(shí)程變化

細(xì)胞骨架分為3種蛋白質(zhì)纖維，即微絲、微管和中等纖維。中等纖維在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)形成一個(gè)完整的支撐網(wǎng)架系統(tǒng)，它在外面與細(xì)胞膜和細(xì)胞外基質(zhì)直接聯(lián)系，在內(nèi)部與核表面和核基質(zhì)直接聯(lián)系，中間與微絲、微管及基質(zhì)細(xì)胞器結(jié)合；因此，在細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞間起著多方面的結(jié)構(gòu)作用，波形蛋白是中等纖維的主要成分之一，在細(xì)胞的完整性和細(xì)胞骨架的穩(wěn)定性中發(fā)揮作用。運(yùn)動(dòng)與波形蛋白的研究目前較少，Liebe等發(fā)現(xiàn)離心運(yùn)動(dòng)30min后兔趾長伸肌和脛骨前肌Desmin表達(dá)下降，Vimentin和Titin的表達(dá)已經(jīng)開始增加。我國學(xué)者段立公等利用兔重復(fù)跑跳制造損傷模型后發(fā)現(xiàn)結(jié)蛋白和波形蛋白陽性部位組織在組織學(xué)及超微結(jié)構(gòu)中都表現(xiàn)為肌纖維的損傷和再生的病理改變。

本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，對(duì)照組正常骨骼肌胞漿的棕褐色陽性反應(yīng)呈網(wǎng)狀均勻分布，染色較淺，胞核蘇木精復(fù)染呈藍(lán)色。運(yùn)動(dòng)后即刻組染色程度明顯加深，而且陽性范圍明顯增大，不僅分布于細(xì)胞周圍結(jié)締組織，以及小血管的周圍及內(nèi)部，也分布于胞漿中。運(yùn)動(dòng)后3h，骨骼肌細(xì)胞中波形蛋白免疫組織化學(xué)染色范圍比運(yùn)動(dòng)后即刻更大，胞漿中表達(dá)較少，細(xì)胞間隙的周圍，尤其是小血管的周圍表達(dá)有明顯增多。運(yùn)動(dòng)后24h組的波形蛋白染色范圍最大，胞漿和細(xì)胞間隙染色范圍增大，但染色程度比運(yùn)動(dòng)后即刻和運(yùn)動(dòng)后3h組要淺。48h組染色范圍和運(yùn)動(dòng)后24h組范圍差不多，胞漿，細(xì)胞周圍已有小血管分布處都有表達(dá)，尤其在個(gè)別壞死細(xì)胞處整個(gè)細(xì)胞區(qū)域都有表達(dá)，表達(dá)程度比前面幾組都要淺。

有研究表明，許多組織可同時(shí)表達(dá)2種或2種以上的中間絲蛋白質(zhì)，Vimentin通常是其中之一，說明Vimentin在細(xì)胞生長中可能起重要作用。在成人組織中，Vimentin與其他中間絲蛋白質(zhì)共同表達(dá)時(shí)，常與細(xì)胞的增殖活躍有關(guān)。也有研究發(fā)現(xiàn)波形蛋白在注射蛇毒后12h激活的肌衛(wèi)星細(xì)胞中存在，在肌肉再生的早期大量表達(dá)，2～3d達(dá)到頂點(diǎn)，波形蛋白在肌肉再生的早期肌衛(wèi)星細(xì)胞的激活過程中發(fā)揮重要的作用。

本實(shí)驗(yàn)也發(fā)現(xiàn)波形蛋白的陽性范圍的時(shí)程性變化是在運(yùn)動(dòng)后即刻較低，運(yùn)動(dòng)后24h達(dá)到最高，運(yùn)動(dòng)后48h與運(yùn)動(dòng)后24h也沒有差異。而光密度值卻呈現(xiàn)相反的趨勢，可能與運(yùn)動(dòng)后骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的增殖和分化有關(guān)。在重復(fù)3d離心運(yùn)動(dòng)后即刻，肌衛(wèi)星細(xì)胞開始進(jìn)入增殖期，此時(shí)波形蛋白表達(dá)強(qiáng)度最大，而運(yùn)動(dòng)后24h，肌衛(wèi)星細(xì)胞已經(jīng)分化了，所以，表達(dá)強(qiáng)度有所減弱。說明波形蛋白與衛(wèi)星細(xì)胞有非常緊密的聯(lián)系，可作為骨骼肌再生的一個(gè)重要標(biāo)志。

4 結(jié)論

1)CK可以作為骨骼肌損傷的間接指標(biāo)。

2)波形蛋白的表達(dá)呈現(xiàn)出時(shí)程性變化，可作為骨骼肌損傷后再生的一個(gè)重要標(biāo)志。