中國野生華東葡萄抗白粉病相關基因(VpUSP)克隆及表達分析

摘要：根據從本課題組前期構建的中國野生葡萄華東葡萄株系白河-35-1在白粉病誘導下的cDNA文庫中獲得的1條與抗白粉病相關的EST序列，設計特異引物，結合RACE(Rapid-amplmcation of cDNA ends)技術克隆了中國野生華東葡萄白河-35-1廣泛逆境蛋白基因(universal stress protein，USP)全長序列。該基因全長836bp，編碼175個氨基酸，GenBank登錄號為GU946975。進一步研究該基因在白粉菌誘導下的相對表達水平，我們通過半定量RT-PCR技術，研究了VpUSP在中國野生華東葡萄抗病、感病株系中的表達變化，結果表明，廣泛逆境蛋白在中國野生華東葡萄感病株系中，接種白粉病前后均有表達，但表達量變化不明顯；然而，抗病的中國野生華東葡萄株系在接種白粉病后VpUSP基因表達量呈明顯的增加趨勢，初步表明中國野生華東葡萄VpUSP基因在與白粉病菌互作過程中具有表達活性。

關鍵詞：中國野生葡萄；RACE(Rapid-amphfication ofcDNA ends)；葡萄白粉病

中圖分類號：$663.1 文獻標識碼：A 文章編號：1009-9980(2011)01-156-05

葡萄白粉病[Uncinula necator(Schw.)Burr]是嚴重危害世界葡萄生產的一種真菌性病害。在葡萄著名產區如美國加州，法國，意大利，澳大利亞，中國新疆等地區，葡萄白粉病危害比較嚴重，給葡萄生產造成巨大的經濟損失。前人對中國抗白粉病野生葡萄種質做了大量研究，利用基因工程手段與傳統育種技術相結合，發掘抗病葡萄種質的抗病基因，培育抗病新品種是解決此問題的有效途徑之一。

廣泛逆境蛋白(Universal stress protein，USP)是一種普遍存在于植物中的抗性相關蛋白，一般存在于細胞質中，在植物受到外界脅迫時表達上調，增強植物的抗逆性。……