摘要:介紹了東方百合的離體快繁技術包括外植體的選擇及培養、培養基的選配、生根苗的移栽及馴化和大田栽培及管理等。
關鍵詞:東方百合;離體快繁;外植體;馴化;栽培
中圖分類號:S681 文獻標識碼:A 文章編號:1002-2910(2011)02-0057-02
百合(Lilium,spp)是世界著名的觀賞花卉,有“百年好合”之意,乃吉祥如意之花。東方百合花大而艷麗,葉片青翠娟秀,作為鮮切花更是深受消費者喜愛,是最主要的切花品種之一。東方百合種球以進口為主,價格昂貴,常規的分球繁殖系數較低,單株百合年產1~3個小鱗莖,不能滿足市場的需求,并且長期營養繁殖易感染病毒,造成種性退化,影響其品質。利用離體快繁技術不但能脫除病毒,恢復其品質,而且能快速大量繁育出優質種球,滿足市場需求。具有很高的經濟價值和開發潛力。筆者對東方百合的離體快繁技術進行了深入的研究,取得成功并應用于生產,現將東方百合離體快繁技術介紹如下。
1 材料與方法
1.1 外植體的選擇與消毒
百合的很多器官都可以用作啟動外植體,如鱗片、葉片、花莖、根和子房等,但利用鱗片、子房作為外植體更容易建立無菌繁育體系。百合的外層鱗片分化能力最強,同一鱗片下部的分化能力強。取鱗片或子房用流水沖洗30分鐘左右,然后用0.2%~0.5%的洗潔精稀釋液洗4~6次,最后用清水清洗后晾干備用。在無菌操作臺上,將鱗片或子房放入70%酒精中浸泡20~30秒鐘,取出迅速放入0.3%的升汞溶液中浸泡2~3分鐘,最后用無菌水沖洗4~6次。取出晾干后,用剪刀將切口剪去,分成3段接種到誘導分化培養基中。接種時將鱗片內側向上平放,有利于鱗片的誘導分化。
1.2 培養基和培養條件
誘導分化和增殖培養基用MS做基本培養基。誘導分化培養基中添加6-BAl.2mg/L,2.4~D0.5mg/L,NAA0.2mg/L,3%蔗糖(可用綿白糖或白砂糖代替)和0.6%瓊脂;不定芽增殖培養基中添加6-BAlmg/L,NAA0,1mg/L,3%蔗糖和0.6%瓊脂。生根培養基用1/2MS做基本培養基,添加NAA0.2mg/L,IBA0.5mg/L,2%蔗糖和0.7%瓊脂。培養條件為pH值5.5左右,光照強度1500~2000LX左右,生根階段可調高至3000LX左右,光照時間12小時左右,溫度控制在21~25℃。
1.3 注意事項
外植體培養初期先進行暗培養5~7天,有利于愈傷組織的形成。在增殖培養過程中,由于分生速度較快,一些分化苗過于細弱,不利于繼續增殖培養或生根培養,此時需要進行培壯培養,在增殖培養基中加入0.5~1mg/L多效唑(MET)可使細弱、生長過快的小苗生長緩慢而矮壯,葉片濃綠而厚。
1.4 培養效果
百合鱗片或子房暗培養一周后,切口附近開始膨大,有愈傷組織形成。15天左右幼小鱗莖形成,35天左右鱗莖周徑長到2~5mm,葉長3~5cm。將誘導小鱗莖分切接種到增殖培養基中,月增殖率5倍以上。將鱗莖周徑在3mm以上的種球接種到生根培養基中,剪去葉片2/3左右,7天左右即有根形成,35天左右平均根數3~5條,葉長3~8cm,生根率80%以上。
2 生根苗的馴化移栽
離體培養的百合再生植株長期在營養豐富的無菌條件下生長,根系活力低,幼嫩的葉片保護組織極弱,直接移入土壤中成活率很低,應使組培苗由異養條件逐漸過渡到大田環境。
2.1 煉苗
將生根試管苗移人馴化溫室,溫室具備遮陽、保濕系統。不開封口煉苗5~7天,接受自然光照。打開封口膜煉苗3~4天,煉苗時間不宜過長,否則培養基會滋生雜菌,感染試管苗。
2.2 配制培養土
生根試管苗移栽前3~4天,將河沙、蛭石和珍珠巖以3:5:2的比例混合,用0.3%的高錳酸鉀和多菌靈500倍液噴灑基質,拌勻后蓋膜消毒培養土。移栽時將培養土盛入培養穴盤中待用。
2.3 移栽
將生根試管苗從培養瓶中用鑷子輕輕取出,用水將根部培養基洗凈,放人盛有1000倍多菌靈溶液中浸泡3~5分鐘,取出栽入穴盤中,澆水定植即可。
2.4 馴化管理
馴化期間,溫室采用50%遮陽網遮蔭,電子噴霧設施間隔噴霧水保濕。百合的根屬于肉質根,吸收水分能力強,噴霧水不宜過勤。移植成活后及時噴施0.5%的過磷酸鈣和0.1%的尿素營養液促進幼苗生長;減少噴霧次數,減少遮陰面積,促使組培苗長壯。
3 田間管理
東方百合組培苗馴化成功后,定植于大田中,盡快培育出適合于生產用的種球。東方百合對土壤要求不嚴,但粘重的土壤不宜栽培。定植株行距以5cm×10cm為宜。加強肥水管理,除草一定要精細,防止損傷幼苗。