金橘膽胃丸質量標準研究

張 艷

(江蘇省連云港藥品檢驗所，江蘇 連云港 222006)

金橘膽胃丸質量標準研究

張 艷

(江蘇省連云港藥品檢驗所，江蘇 連云港 222006)

目的探討金橘膽胃丸的質量標準。方法采用薄層色譜法鑒別金橘膽胃丸中柴胡、木香、香附，用高效液相色譜法對制劑中橙皮苷進行定量分析。結果薄層色譜圖中，供試品溶液色譜在與對照藥材溶液色譜相應位置上出現相同顏色的斑點。在選定的色譜條件下，橙皮苷進樣質量濃度在19.84～158.72 μg/mL范圍內與峰面積線性關系良好，r=0.999 7，平均回收率為99.45%，RSD為0.64%(n=6)。結論所用方法可靠、準確，專屬性強，可有效控制金橘膽胃丸的質量。

金橘膽胃丸;薄層色譜法;高效液相色譜法;質量標準

金橘膽胃丸為連云港中醫院制劑，由生雞內金、橘皮、柴胡、木香、香附等13味中藥組方，具有利膽和胃、消食化石的作用，臨床上主要用于治療膽囊炎、慢性胃炎、膽囊結石、肝內外膽管結石等，效果顯著。本研究提高并完善了該藥的質量標準[1]，增加了柴胡、木香、香附的薄層色譜鑒別和橘皮中橙皮苷的含量測定，現報道如下。

1 儀器與試藥

Agilent 1200型高效液相色譜儀。橙皮苷對照品(批號為110721－200613)、柴胡對照藥材(批號為 120992－200504)、木香對照藥材(批號為120921－200506)均來自中國藥品生物制品檢定所;金橘膽胃丸(批號為20091113，由連云港市中醫院制劑室提供);薄層層析用硅膠G板;乙腈(色譜純)，水(重蒸水)，其他試劑(分析純)。

2 方法與結果

2.1 定性鑒別(薄層色譜法)

柴胡[2]:取本品3 g，研細，加甲醇20 mL，超聲處理20 min，濾過，濾液蒸干，加2%NaOH溶液10 mL，置水浴上加熱30 min，放冷，加正丁醇10 mL，振搖提取，分取正丁醇溶液，蒸干，殘渣加甲醇2 mL使溶解，作為供試品溶液。另取柴胡對照藥材0.5 g，同法制成對照藥材溶液。按處方配制除去柴胡制成陰性對照品，按照供試品溶液的制備方法制備，作為陰性對照品溶液。吸取上述3種溶液各5 μL，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲烷－甲醇－水(30∶10∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2%對二甲氨基苯甲醛10%的硫酸乙醇溶液，在105℃加熱約5 min。供試品溶液色譜中，在與對照藥材溶液色譜相應位置上顯相同顏色的斑點，而陰性對照品溶液色譜則無此斑點，見圖1 A。

木香:取本品3 g，研細，加乙醚30 mL，加熱回流30 min，濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯1 mL使溶解，作為供試品溶液。另取木香對照藥材0.5 g，同法制成對照藥材溶液。按處方配制除去木香制成陰性對照品，按照供試品溶液的制備方法制備，作為陰性對照品溶液。吸取上述3種溶液各3 μL，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以環己烷－丙酮(10∶3)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，加熱至斑點顯色清晰。供試品溶液色譜中，在與對照藥材溶液色譜相應位置上顯相同顏色的斑點，而陰性對照品溶液色譜則無此斑點，見圖1 B。

圖1 薄層色譜圖

2.2 含量測定(高效液相色譜法)

2.2.1 色譜條件

色譜柱:Agilent Eclipse XDB C18柱(150 mm ×4.6 mm，5 μm);流速:1.0 mL/min;柱溫:25 ℃;流動相:乙腈 －0.3%磷酸溶液(17∶83);檢測波長:284 nm;進樣量:10 μL。在此條件下，色譜圖見圖2。

2.2.2 溶液制備[3]

精密稱取橙皮苷對照品9.92 mg，置 50 mL 量瓶中，用甲醇溶解(必要時超聲處理)并定容至刻度，制成質量濃度為 198.4 μg/mL的貯備液;分別精密量取 1.0，2.0，4.0，6.0，8.0 mL，各置 10 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，分別制 成 質 量 濃 度 為 19.84，39.68，79.36，119.04，158.72 μg/mL 的溶液，即得對照品溶液。取本品適量，研細，取約2 g，精密稱定，精密加入甲醇50 mL，稱定質量，置水浴上加熱回流1 h，放冷，再稱定質量，用甲醇補足減失的質量，搖勻，濾過，精密量取5 mL，置25 mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得供試品溶液。按處方比例配制缺橘皮的陰性樣品，按供試品溶液制備方法制備，即得陰性對照品溶液。

2.2.3 方法學考察

標準曲線繪制:分別精密量取2.2.2項下的對照品溶液各10μL，注入高效液相色譜儀測定峰面積。以對照品質量濃度(μg)為橫坐標、峰面積為縱坐標進行線性回歸，回歸方程為Y=27.777+14.803X，r=0.999 7(n=5)。結 果 表 明 橙 皮 苷 質 量 濃 度 在19.84 ～158.72 μg/mL 范圍內與峰面積線性關系良好。

精密度試驗:精密吸取對照品溶液10 μL，重復進樣6次，測定峰面積。結果的RSD=0.72%(n=6)，表明儀器精密度良好。

穩定性試驗:吸取同一供試品溶液，每隔2 h測定1次，12 h內連續測定6次。結果橙皮苷含量的RSD=0.51%，表明供試品溶液在12 h內穩定。

圖2 高效液相色譜圖

重現性試驗:取同一批(批號為20091113)樣品，按樣品含量測定項下方法平行操作6份，依法測定。結果橙皮苷平均含量為4.52 mg/g，RSD=1.1% ，表明方法重現性較好。

加樣回收試驗:取已知含量的樣品6份，每份1 g，分別加入橙皮苷對照品適量，按供試品溶液制備方法制備溶液并測定含量，計算回收率。結果見表1。

表1 橙皮苷加樣回收試驗結果(n=6)

2.2.4 樣品含量測定

取3批不同批號的金橘膽胃丸，依法制備供試品溶液，分別精密吸取對照品溶液和供試品試液10 μL，按擬訂的色譜條件測定并計算含量。結果見表2。

3 討論

2005年版《中國藥典(一部)》中，柴胡薄層色譜鑒別中采用的展開劑為乙酸乙酯－乙醇－水(8∶2∶1)，木香采用的展開劑為三氯甲烷－環己烷(5∶1)，對于該制劑，展開速度均較慢，且分離度較小;而柴胡改用三氯甲烷－甲醇－水(30∶10∶1)、木香改用環己烷－丙酮(10∶3)后展開速度快，分離度好。供試品溶液在與對照藥材溶液色譜對應位置上顯相同顏色的斑點;該制劑在與柴胡對照藥材溶液色譜相應的位置上至少顯5個相同顏色的斑點，與木香對照藥材溶液色譜相應的位置上至少顯2個相同顏色的斑點，陰性對照品溶液無干擾，表明方法可行。

為取得更好的分離效果，對色譜柱和流動相進行了選擇，分別比較了 Agilent Eclipse XDB －C18柱(150 mm ×4.6 mm，5 μm)，Lichrospher C18柱(200 mm ×4.6 mm，5 μm)，Water C18柱(150 mm ×4.6 mm，5 μm)，發現前一種流動相效果較好。分別比較了流動相乙腈 －0.3%磷酸溶液(21 ∶79)[4]、乙腈 －0.3%磷酸溶液(19 ∶81)、乙腈－0.3%磷酸溶液(17∶83)、結果發現乙腈－0.3%磷酸溶液(21∶79)未使橙皮苷達到完全分離，乙腈－0.3%磷酸溶液(19∶81)雖使橙皮苷完全分離但效果不是很好，而乙腈－0.3%磷酸溶液(17∶83)能使橙皮苷達到充分完全的基線分離，與其他成分之間也能達到完全的基線分離，且色譜峰形較對稱。故選擇乙腈－0.3%磷酸溶液(17∶83)為流動相。

表2 樣品含量測定結果(n=6)

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[M].北京:化學工業出版社，2005:525.

[2]吳成立，王小龍，張培奇.雙清口服液中桔梗、柴胡的薄層鑒別方法[J].河南中醫藥學刊，2000(3):16.

[3]梁開玉，羅啟波，喻 梅.從陳皮中提取橙皮苷工藝研究[J].重慶工商大學學報(自然科學版)，2004，121(1):19 －22.

[4]鄭國平，陳 翔.HPLC法測定金果飲中橙皮苷的含量[J].中國中醫藥科技，2009，16(5):384 －385.

R284.1;R286

A

1006－4931(2011)02－0038－02

張艷(1975－)，女，主管中藥師，主要從事藥物分析工作，(電話)0518－82093762。

2010－04－08)