不同類型子宮內膜中PTEN和CD44V6的表達及其意義

鄭慶紅 李娜 尹艷英

不同類型子宮內膜中PTEN和CD44V6的表達及其意義

鄭慶紅 李娜 尹艷英

目的 檢測PTEN與CD44V6在不同類型子宮內膜組織中的表達情況，探討其與內膜癌生物學行為之間的關系。方法 采用免疫組織化學法(SP法)檢測PTEN與CD44V6在82例子宮內膜組織中的表達。結果 ①PTEN在子宮內膜增生期、單純型增生過長、復雜型增生過長、不典型增生及內膜樣腺癌組織中的表達率呈顯著遞減趨勢，而CD44V6的表達率呈遞增趨勢，差異有統計學意義(P＜0.05);②PTEN、CD44V6的表達均與子宮內膜樣腺癌的組織病理分級、手術病理分期、肌層浸潤有關，差異有統計學意義(P＜0.05)。結論 PTEN與CD44V6的表達在子宮內膜癌發生、發展中起一定的作用，可作為反映子宮內膜癌惡性潛能的分子標志物。

子宮內膜;PTEN;細胞黏附分子;免疫組織化學

子宮內膜癌是女性生殖道常見的三大惡性腫瘤之一。子宮內膜增生(單純性，復雜性)、不典型增生和子宮內膜癌無論在形態上還是在生物學上為一個連續的演變過程，但其病因學分子機制尚不清楚。PTEN是于1997年發現并命名的一種新的抑癌基因，因其獨特的作用途徑在腫瘤研究中倍受重視，并且PTEN基因是在子宮內膜癌中的突變率最高的抑癌基因。黏附分子CD44是一種分布極為廣泛的細胞表面跨膜糖蛋白，CD44V6作為CD44的變構體，只表達于發生轉移或有轉移能力的腫瘤細胞［1］。本實驗通過檢測 PTEN、CD44V6在不同類型子宮內膜組織中的表達，探討二者在子宮內膜癌發生發展中的作用及與內膜癌臨床病理學特征之間的關系，來分析其與內膜癌生物學行為之間的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2004年1月至2009年12月大慶油田總醫院婦產科手術切除的子宮組織標本共82例。按病理診斷結果、經病理證實的子宮內膜癌標本40例，子宮內膜增生22例(單純性增生7例、復雜性增生7例、不典型增生8例)，增生期或分泌期子宮內膜20例。子宮內膜癌按2000年FIGO分期標準進行手術病理分期:Ⅰ期29例，Ⅱ期4例，Ⅲ期6例，Ⅳ期1例;組織學分級:G115例、G212例、G313例;組織學類型:子宮內膜樣腺癌39例，透明細胞癌1例;子宮肌層侵潤深度:限于內膜層10例，侵潤＜1/2肌層24例，≥1/2肌層6例。患者年齡33～76歲，平均(48.6±8.3)歲。所有患者有完整的臨床病理資料，取材前均未經化療、放療及激素治療。所有標本以10%福爾馬林固定，石蠟包埋。

1.2 實驗方法 采用常規SP法，按說明書操作進行。PTEN鼠單抗和鼠抗人CD44V6單抗以及SP試劑盒均購自福建邁新生物技術有限公司，以PBS液代替一抗作陰性對照，用已知PTEN陽性的結腸癌及CD44V6陽性的肺癌切片作陽性對照。

1.3 結果判定 PTEN及CD44V6陽性判定:PTEN以細胞漿內出現棕黃色顆粒為陽性。CD44V6以細胞膜和/(或)細胞漿內出現明顯的棕黃色顆粒者為陽性(+)，無著色者為陰性(-)。

1.4 統計學方法 采用SPSS 13.0統計軟件，根據數據資料類型，各組間率的比較采用χ2檢驗，等級相關采用Spearman等級相關分析，P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不同子宮內膜組織中PTEN和CD44V6的表達 PTEN在正常內膜、單純性增生、復雜性增生、不典型性增生及子宮內膜癌中的陽性表達率分別為:100%、81.25%、76.57%、52.18%和45.34%。進行Spearman分析后，提示不同子宮內膜組織與PTEN蛋白的表達強度呈負相關關系，(r=-0.146，P＜0.01)，差異有統計學意義。而CD44V6在復雜性增生、不典型性增生及子宮內膜癌中的陽性表達率分別為:10.81%、34.28%、64.63%，正常子宮內膜組織及單純性增生子宮內膜中無一例陽性表達(P＜0.05)。

2.2 PTEN和CD44V6陽性表達與子宮內膜癌臨床病理特征的關系 子宮內膜癌組織中PTEN和CD44V6蛋白的陽性表達與內膜癌的發病年齡無明顯相關(P＞0.05)，而與內膜癌組織學類型、淋巴轉移及臨床分期密切相關(P＜0.05或P＜0.01)。見表1。

表1 子宮內膜癌臨床病理特征與PTEN及CD44V6表達關系

3 討論

3.1 PTEN在不同子宮內膜組織中的表達及其臨床意義PTEN基因是1997年在原發性乳腺癌患者組織中分離獲得的一種新的抑癌基因，該基因具有蛋白質酪氨酸磷酸酶和雙重特異性磷酸酶的活性［2］。PTEN基因通過抑制細胞有絲分裂，誘導細胞凋亡，參與調節細胞的黏附、轉移和分化等各個方面發揮抑癌基因的作用［3］。

本研究發現PTEN在正常內膜、單純性增生、復雜性增生、不典型性增生及子宮內膜癌中的陽性表達率逐級減少，提示隨著PTEN的表達強度增高，內膜傾向正常，這符合PTEN作為抑癌基因功能的表現，與國內外研究結果一致，推測PTEN在子宮內膜癌的早期形成階段起作用。伊鐵忠等［4］報道:PTEN表達缺失與臨床分期和病理分級有關，與肌層浸潤、淋巴轉移無明顯相關性。而本研究則認為PTEN的陽性表達與內膜癌的發病年齡無明顯相關(P＞0.05)，而與內膜癌組織學類型、淋巴轉移及臨床分期密切相關(P＜0.05或P＜0.01)，提示PTEN的缺失使得PTEN對細胞生長的調控及對細胞凋亡、粘附和遷移的控制減弱，有助于癌變的發生和發展。

3.2 CD44V6在子宮內膜癌中的表達及其臨床意義 CD44基因定位于11號染色體短臂上［5］。CD44V6是CD44的變異型，與人體多種腫瘤關系較為密切，其表達與腫瘤進展程度、轉移和預后密切相關，認為CD44V6可作為獨立的預后指標。

本研究表明，正常子宮內膜組織及單純性增生的子宮內膜組織中CD44V6均陰性表達，而在內膜癌組織中的陽性表達率為64.63%，差異有統計學意義(P＜0.05)，提示CD44V6表達可能是內膜癌發生發展的促進因素。本研究發現，隨著子宮內膜癌組織學分級、臨床分期的級別增高、肌層浸潤的加深和轉移，CD44V6的陽性表達呈增高趨勢，提示CD44V6的陽性表達對內膜癌的侵襲轉移和臨床進展過程中起重要作用，表明CD44V6可能是子宮內膜癌發生發展的晚期事件。

總之，PTEN低水平表達或CD44V6的高水平表達，子宮內膜腫瘤的惡性程度越高，患者的預后越差，這兩種蛋白可作為反映子宮內膜腫瘤惡性潛能的分子標志物，對其發生發展和預后有重要意義。

［1］ Gunthert U，Hoffmann M，Rudy W，et al.A new variant of glycoprotein CD44 confers metastatic potential to rat carcinoma cells. Cell，1991，65(1):13-24．

［2］ Steck PA，Pershouse MA，Jasser SA，et al.Identification of a candidate tumor suppressor gene，MMAC1，at chromosome 10q23.3 that is mutated in multiple advanced cancers.Nature Genetics，1997，15(4):356-363．

［3］ 杜雪.PTEN與子宮內膜癌.國外醫學婦產科學分冊，2003，30 (6):385-386．

［4］ 伊鐵忠，糜若然，朱莉.子宮內膜癌PTEN PCNA和C2B22的表達及其意義.中國實用婦科與產科雜志，2006，22(4): 127-128.

163001黑龍江省大慶油田總醫院醫院婦產科