嗎啡急性成癮貓癥狀學與神經電生理變化

郭 韜 鄭 杰 康進生 董長征 武 江 岳向勇 李文玲 趙文清 梁 晴

(河北省人民醫院功能神經外科，河北 石家莊 050051)

嗎啡急性成癮貓癥狀學與神經電生理變化

郭 韜 鄭 杰 康進生 董長征 武 江 岳向勇 李文玲 趙文清 梁 晴1

(河北省人民醫院功能神經外科，河北 石家莊 050051)

目的通過建立急性嗎啡貓成癮模型，觀察成癮貓癥狀學和神經電生理變化，探討成癮癥狀與神經電生理變化間的關系。方法12只成年雄性家貓隨機分成實驗組9只和對照組3只，連續5 d，實驗組家貓于每日8點、12點、16點行背部皮下注射嗎啡，對照組注射等體積生理鹽水。第6天，實驗組家貓注射納洛酮誘發戒斷癥狀，證明造模成功后兩組于1、3、7 w行皮層和深部腦電圖監測。結果實驗組家貓均出現嗎啡戒斷癥狀，腦電圖呈現生理波減少，慢波增多并出現棘波。結論急性嗎啡貓成癮模型的癥狀學與腦電圖改變對揭示嗎啡成癮機制具有一定意義。

嗎啡;成癮;模型;癥狀學;腦電圖

嗎啡成癮已經成為一個全球性的醫學和社會的焦點問題。本研究通過建立急性嗎啡貓成癮模型，觀察嗎啡成癮貓癥狀學特點，分析嗎啡對腦組織毒性損害造成的神經電生理變化，探討神經電生理變化與成癮癥狀的關系，為臨床合理治療藥物成癮提供神經電生理依據。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 雄性成年家貓12只，其中實驗組9只，對照組3只。由河北省人民醫院臨研中心提供，貓齡3～4年，體重2 ～3 kg。

1.2 實驗藥品 鹽酸嗎啡注射液，沈陽第一制藥廠生產。麻醉藥品和精神藥品生產定點批件號:TD2006-0028，國藥準字:H21022436。鹽酸納洛酮注射液，康哲(湖南)制藥有限公司生產。產品批號20070113，批準文號:國藥準字H20033435。

1.3 貓嗎啡急性成癮動物模型〔1〕(1)實驗組貓按逐日遞增原則，分別于每日8點、12點、16點行背部皮下注射鹽酸嗎啡。連續5 d給藥。對照組貓對應時間注射生理鹽水。(2)給藥劑量:第1天嗎啡單次用量2.5 mg/kg，第2天5 mg/kg，第3天7.5 mg/kg，第4天10 mg/kg，第5天12.5 mg/kg，均嚴格按時、按次注射。(3)納洛酮誘發實驗:第6天8:00對照組給予相同程序的等體積生理鹽水皮下注射。實驗組以0.5 mg/kg納洛酮誘發戒斷癥狀。評定貓的戒斷癥狀，證明嗎啡急性成癮貓模型制造成功。

1.4 腦電圖監測 兩組實驗貓分別于造模成功后1 w、3 w、7 w及取材時用MS4000U電生理監測儀進行皮層、深部腦電圖監測。監測部位包括額、顳、頂、枕葉皮層、海馬、杏仁核和伏隔核區組織。

1.5 癥狀學評分 依照Maldonado等〔2〕的戒斷癥狀評分標準，評定戒斷癥狀。包括扭體、濕狗樣抖、跳躍、站立、齒顫、清理皮毛、上瞼下垂。其中每2 min評定1次上瞼下垂。觀察時間為腹腔注射納洛酮后，共20 min。

1.6 統計學分析 實驗數據采用SPSS 9.0統計軟件包進行分析，實驗組與對照組比較，采用多個樣本均數比較的F檢驗和兩兩比較的q檢驗，數據以±s表示。

2 結果

2.1 嗎啡貓成癮模型癥狀學特點 本組實驗動物無死亡。實驗組貓隨嗎啡劑量加大而出現典型的嗎啡依賴癥狀，表現為給藥后逐漸出現呆滯、活動減少、嗜睡，四肢及軀體肌緊張，兩眼眼神迷離。上述表現持續約30 min后開始出現興奮狀態，主要表現為活動增多，狂叫，亂跳，快速轉圈，舔毛，咬前爪及磕鐵籠等。戒斷癥狀評分統計見表1。實驗組戒斷評分值明顯高于對照組(P＜0.05)，嗎啡成癮貓出現戒斷癥狀，而對照組沒有出現戒斷癥狀，說明戒斷癥狀是嗎啡成癮貓的特征癥狀學表現。

表1 對照組與實驗組戒斷癥狀評分的比較

2.2 腦電圖變化 正常對照組皮層腦電圖，基本節律以中低波幅α波為主，少量β波，枕區尤為明顯。波形規整，左右對稱，調幅調節好(見圖1)。嗎啡成癮貓皮層腦電圖特征性波形表現為:額區α波數量逐漸減少，呈短節律，活動或散在出現。伴α波調幅減弱，α波慢化。低、中波幅θ波、δ波逐漸增多。α節律出現高幅α梭形波節律，其最大峰峰值與平均峰峰值間相對比＞3.00。同時，棘波、棘慢波頻繁出現，有時甚至棘波連續發放，出現棘節律(圖2)。頂區可見少量棘波及棘慢波發放(圖3);顳區病理波較額區相比，波幅較低，發放頻率亦遜于額區，但慢波明顯增多，以低、中波幅θ波為主，有時連續發放(圖4);枕區正常生理性α波數量逐漸減少，波幅減低，直至解體、難以辨認，伴α波調幅調節變差，α波慢化，低、中波幅θ波、δ波逐漸增多(圖5);而海馬、杏仁核區表現為正常背景生理波波幅減低，頻率加快，波形不整，調幅調節變差，可見少量低幅尖波出現(圖6)。伏隔核區有時可見高幅及超高幅棘波(圖7)。

圖1 正常對照組皮層腦電圖

3 討論

據文獻報道〔3〕嗎啡在人體的致欣快作用主要表現在注射嗎啡后瞬間的快感，快感后的松弛效應延續0.5～2 h，以及其后2～4 h顯得精神抖擻、自我感覺良好的狀態。隨著注射劑量的增大，最終導致成癮(依賴)，表現為精神依賴和軀體依賴，精神依賴主要表現為強烈的藥物渴求和持續的覓藥行為，軀體依賴主要表現為耐受性和戒斷反應，戒斷反應是嗎啡成癮最具特征和最重要的診斷依據。

本實驗發現，貓用遞增法注射嗎啡后出現戒斷綜合征表現:扭體、濕狗樣抖、上瞼下垂、齒顫、異常姿勢等行為動作變化和稀便、流涎、流淚等自主神經系統癥狀。是阿片類物質成癮的特征性癥狀，其產生機制目前普遍認為是軀體神經生理對阿片類的反適應作用。本實驗中貓戒斷癥狀的表現基本與吸毒者平常使用毒品后的表現相似，這說明用動物實驗獲得的發現可在某種程度上去解釋嗎啡對人體的影響和毒性損害。

嗎啡成癮對腦組織可造成慢性持續性損害，病變廣泛，病理類型復雜多樣。是一種慢性腦病。臨床上出現戒斷癥狀表現的神經精神病癥候群也是復雜多樣，多數學者認為，其病理機制應是多重機制而非單一病機。目前比較公認與下列機制有關〔4，5〕:①嗎啡作用于內源性阿片肽系統及其他神經遞質系統，引起這些系統受體前、受體、受體后多環節結構及功能變化，造成一系列神經功能紊亂，從而表現出多樣的病理類型及臨床癥候群。②自由基作用:嗎啡成癮造成體內自由基增多，引發鏈式脂質過氧化反應，通過損傷細胞膜、抑制蛋白質功能、破壞核酸及染色體等機制，引發包括腦細胞在內的軀體細胞損傷死亡。③嗎啡成癮造成軀體其他重要器官、系統病變，如心、肝、腎、肺和血管損害。④非提純的嗎啡制品中有混雜物，其中的有害物質可通過直接毒性作用，或發生炎性反應，或導致過敏反應而致腦細胞損害。

本實驗中當貓腦功能正常時，枕區α波頻率多在8～13 Hz，調幅調節良好。枕區α波的數量、頻率及調幅調節可反映腦功能的情況〔6〕。而嗎啡成癮貓枕區α波數量減少，調幅調節變差，形態異常，直至難以辨認。嗎啡成癮貓各腦區病理波數量明顯增加，證實嗎啡對中樞神經系統有興奮和抑制的雙相作用。實驗過程中嗎啡成癮貓出現發作性強直陣攣狀態，皮層腦電顯示的棘波及棘慢波等病理波為嗎啡成癮貓癲癇發作提供依據。嗎啡還可改變中樞和外周鈣離子通道的數目和開放狀態，導致神經細胞膜中的鈣通道增多，細胞內鈣離子濃度升高〔7〕。過量的鈣內流在細胞內形成高濃度游離鈣，使線粒體腫脹，細胞能量代謝障礙和激活鈣依賴蛋白酶及磷脂酶分解維持正常細胞功能所必備的蛋白質，磷脂酞膽堿和磷脂酞乙醇胺，而導致神經細胞壞死，疤痕形成，成為致癲癇灶。這可能是嗎啡成癮后出現神經元異常放電的生物化學基礎。

神經突觸是腦內信息傳遞的主要結構，突觸結構的改變必然與神經電生理活動的異常有關。嗎啡導致神經細胞變性壞死、萎縮退化，而機體為了擺脫其引起的信息傳遞抑制作用，維持正常的生理功能，必然會在某些部位發生一些代償性改變。并且隨依賴時限的延長，這種代償性改變變得更加明顯。嗎啡依賴時膠質細胞彌漫性或灶性增多、靶神經元多次重復興奮，他們可能分泌一些神經營養因子或營養活性物質，促進軸突、樹突的生長，并且建立更多的突觸聯系和引起突觸可塑性的改變〔8〕。部分神經細胞變性壞死后，外周存留細胞可能會發出新的側支，并形成新的突觸，以彌補神經細胞壞死后引起的突觸喪失。突觸的丟失和重組不斷進行，必然會破壞正常的神經細胞間相互聯系的秩序，這可能是嗎啡成癮貓皮層異常放電的病理學基礎。另外，實驗研究、分子解剖學已證實中腦一邊緣多巴胺系統是幾乎所有成癮藥物產生獎賞效應的結構基礎，在把情緒轉化為意向性行為和活動的過程中起重要作用〔9〕。而這種轉化正是產生藥物依賴所必需的。中腦一邊緣多巴胺系統主要包括中腦腹側被蓋區、伏隔核、杏仁核等腦區。伏隔核內主要為多側棘的γ-氨基丁酸能(GABA)小神經元。伏隔核區多巴胺受體密度與紋狀體非常相近，是腦內多巴胺受體密度最高的腦區之一。伏隔核被認為和選擇性注意、繼發性易化、獎賞、記憶等行為過程有關，是將中腦-邊緣葉信號通過錐體外系結構轉變為行動的調控站。一切天然的獎賞性刺激都是通過作用于該系統，在注射嗎啡的動物體內，5-HT的代謝和合成增加，而5-HT3可激發NAc區DA能神經元的超常電活動，最終引起伏隔核內多巴胺釋放增多，從而產生獎賞效應，誘發嗎啡依賴者的戒斷癥狀和對嗎啡的渴求。這可能是嗎啡成癮貓戒斷行為的神經電生理學基礎。

1 紀家濤.嗎啡依賴大鼠模型的建立〔J〕.第二軍醫大學學報，1997;18(1):81-2.

2 徐貴麗，劉澤源，蘇國麗，等 大鼠海洛因依賴催促戒斷模型的建立〔J〕.中國藥物濫用防治雜志，2000;2(3):9-10.

3 鄧金昆，李經才.近年來戒毒藥物的研究進展〔J〕.沈陽藥科大學學報，2003;20(2):147-51.

4 Nadel J，HauberW.Reversemicrodialysis of a dopamine D2 receptor antagonist alters extracellular adenosine levels in the ratnucleus accumbens〔J〕.Neurochem Int，2004;44(8):609-15.

5 秦 偉，潘貴書，陳遠壽，等.海洛因依賴大鼠部分腦區超微結構變化研究〔J〕.遵義醫學院學報，2007;30(1):8-10.

6 劉曉燕.臨床腦電圖學〔M〕.北京:人民衛生出版社，2006:357-63.

7 王 林，傅先明，錢若兵，等.嗎啡成癮性大鼠腦內核團神經細胞〔Ca2+〕i變化的研究〔J〕.立體定向和功能性神經外科雜志，2007;20(2):84-7.

8 高家林，黃 彬，羅素元，等.嗎啡依賴戒斷焦慮大鼠海馬突觸結構的可塑性〔J〕.解剖學雜志，2008;31(1):40-2.

9 Koob GF.Drug of abuse:anatomy，pharmacology and function of reward pathways〔J〕.TiPS，1992;13(1):177-84.

Study of semeiology and neural electrophysiology about the cat w ith acutemorphine addiction

GUO Tao，ZHENG Jie，KANG Jin-Sheng，et al.
Department of Functional Neurosurgery，Hebei Provincial Hospital，Shijiazhuang 050051，Hebei，China

ObjectiveTo observe the semeiology and the change of neural electrophysiology of the cat with acute morphine addiction.Methods12 male catswere randomly divided into experiment and control groups.The cats of experiment group were hypodermic injection with morphine at8，12，16 h.The cats of control group were hypodermic injection with normal sodium at the same time.After 5 days，the cats of experiment group were injected with allylnoroxymorphone for inducing abstinent symptom.Two group cats were monitored with electroencephalogram at1，3，7 w after inducing abstinent symptom.ResultsAll of the cats of experiment group showed abstinent symptom.The changes ofelectroencephalogram were physiologicalwaves reducing and slow waves and spikewave increasing.ConclusionsThe semeiology and the change of neural electrophysiology of the catwith acutemorphine addiction conduce to reveal themechanisms ofmorphine addiction.

Morphine;Addiction;Model;Semeiology;Electroencephalogram

R322

A

1005-9202(2011)18-3528-03

河北省科技攻關計劃項目(07276101D－133)

1 辛集市第一醫院

趙文清(1956-)，男，主任醫師，主要從事功能神經外科疾病診斷與治療研究。

郭 韜(1972-)，男，主治醫師，主要從事功能神經外科疾病診斷與治療研究。

〔2011-01-06收稿 2011-03-04修回〕

(編輯 曲 萌/曹夢園)