血管緊張素轉移酶基因插入/缺失多態性與胃癌的相關性

史美龍 邵 紅 魯海宏 張景斌 (吉林省人民醫院普外科，吉林 長春 300)

血管緊張素轉移酶(ACE)是腎素-血管緊張素系統中的重要成員之一，其不僅在維持微循環穩態而且在腫瘤發生發展中發揮著重要作用〔1，2〕。ACE基因位于人類第17號染色體長臂2區3帶(17q23)，ACE基因第16內含子存在一個287堿基的插入(I)、缺失(D)多態性，該多態性與血清ACE表達水平有關，即缺失型等位基因(D)ACE水平明顯增高。以往大量研究調查了ACE基因I/D多態性與多種腫瘤的相關性〔3～7〕，然而，其與中國人群胃癌的相關性尚不清楚。為此，本研究采用PCR技術檢測了中國人群胃癌患者的ACE基因I/D多態性，旨在探索其與胃癌的關系，為胃癌的發病機制提供理論依據。

1 資料與方法

1.1 研究對象 根據臨床癥狀和組織病理學結果臨床確診為胃癌的我院普外科患者181例，男109例，女72例;平均年齡(56.5±11.2)歲。其中高中分化117例，低分化64例;臨床Ⅰ～Ⅱ期104例，臨床Ⅲ～Ⅳ期77例;無轉移107例，有轉移74例。對照組198例選自體檢健康人群，男129例，女69例，平均年齡(54.2±10.5)歲，無腫瘤家族史及胃腸道炎癥性疾病，研究對象均為非血緣關系漢族個體。

1.2 DNA提取及引物合成 采集研究對象外周靜脈血2 ml，采用北京百泰克公司全血基因組DNA提取試劑盒提取DNA。參照文獻〔8〕設計引物。上游引物:5'-CTGGAGACCACTCCCATCCTTTCT-3'，下游引物:5'-GATGTGGCCATCACATTCGTCAGAT-3'。引物由上海英駿生物技術有限公司合成。

1.3 PCR法檢測 PCR反應體系為10 μl，其中包括基因組DNA 0.8 μl，上、下游引物各 0.1 μl，TaqDNA 聚合酶 0.3 U，10 × 反應緩沖液 1.2 μl，Mg2+0.6 μl，dNTPs 1.2 μl，不足體積用無菌去離子水補充至10 μl。PCR反應循環參數均為:94℃預變性4 min;94℃變性30 s，64 ℃退火90 s，72℃延伸90 s，35個循環。以上反應均在Eppendorf熱循環儀完成。擴增產物用6%聚丙烯酰胺凝膠電泳，硝酸銀染色，分析判斷結果。

1.4 統計學方法 基因型和等位基因頻率采用直接計數法計算，胃癌組和對照組基因型及等位基因頻率比較采用χ2檢驗。

2 結果

2.1 兩組ACE I/D多態性比較 兩組間基因型和等位基因頻率差異不顯著(P＞0.05)(表1)。

表1 胃癌組與對照組ACE I/D多態性比較〔n(%)〕

表2 胃癌組臨床特征與ACE I/D多態性比較〔n(%)〕

2.2 胃癌組臨床特征與ACE I/D多態性比較 根據臨床特征進行亞組分析，發現低分化胃癌患者中DD基因型頻率明顯高于高中分化者(P=0.002);有轉移的胃癌患者中DD基因型頻率明顯高于未轉移者(P=0.012)(表2)。

3 討論

胃癌由多種因素共同作用而致，流行病學研究表明，遺傳因素在其發病中發揮著重要作用。然而，胃癌發病機制迄今尚未完全闡明，對其易感基因的研究是近年來胃癌分子機制研究的重點和熱點。多種腫瘤ACE表達水平均升高，參與血管生成、腫瘤細胞生長、遷移和轉移〔2〕。使用ACE抑制劑能夠減緩腫瘤生長和血管生成。由此認為，ACE抑制劑有望成為新的抗腫瘤藥物，用于腫瘤防治。

關于ACE基因I/D多態性與胃癌的關系，目前文獻報道結果尚不一致。Ebert等〔6〕報道在德國人群中，該位點DD基因型在胃癌病人中的分布明顯高于對照組(P=0.003 4)。ACE基因型與淋巴結轉移數量和腫瘤分級有關，II基因型胃癌患者，其淋巴結轉移數量更少(P＜0.001)，并且其腫瘤分級更低(P=0.01)〔5〕。相反，在日本人群中，未發現ACE基因I/D多態性與胃癌存在明顯相關性〔3〕。然而，攜帶I/D雜合子基因型的幽門螺旋桿菌陽性的胃萎縮患者胃癌的發生風險明顯增高〔7〕。本研究與日本人群的研究結果類似，未發現在中國人群中ACE基因I/D多態性與胃癌存在明顯相關性。引起這種差異的原因可能是:①人群不同，不同的遺傳背景造成不同個體對胃癌的易感性不同;②環境因素的影響。

為明確ACE基因I/D多態性與胃癌臨床病理特征的關系，本研究進一步分析了其與胃癌的分化程度、臨床分期和淋巴結轉移的關系，本結果提示攜帶DD基因型的胃癌患者惡性程度更高，并且更容易發生腫瘤轉移。

本研究結果表明，盡管ACE基因I/D多態性與中國人群胃癌的發病風險無關，但是其與胃癌的分化程度和轉移狀態等影響胃癌預后的臨床病理特征密切相關。然而，本研究樣本量有限，因此，有必要進行大樣本、多民族的病例-對照研究以證實ACE在胃癌發病中的作用。

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