血清IL-6、IL-8、TNF-α表達(dá)與急性腦梗死損傷的相關(guān)性

陳芳梅 尹 琦 (廣西衛(wèi)生管理干部學(xué)院檢驗(yàn)系微生物與免疫學(xué)教研室，廣西 南寧 53002)

各種炎性細(xì)胞因子在腦缺血再灌注的炎癥反應(yīng)及其損傷中的作用日益受到重視。近年來(lái)的基礎(chǔ)及臨床研究表明〔1〕，白細(xì)胞介素6(IL-6)、IL-8、腫瘤壞死因子(TNF-α)與腦梗死的發(fā)生、發(fā)展及腦損害的程度密切相關(guān)。其相互關(guān)系的變化與其在腦梗死中的發(fā)病機(jī)制、病理生理過(guò)程及臨床早期診斷方面的意義國(guó)外雖有研究和報(bào)道，但結(jié)果并非完全一致。本文對(duì)急性腦梗死患者血清中IL-6、IL-8、TNF-α含量的動(dòng)態(tài)變化進(jìn)行了檢測(cè)，以期進(jìn)行相關(guān)性研究。

1 資料與方法

1.1 一般資料 所有病例選自2007年6月至2009年6月期間在我院住院的患者，符合1996年中華神經(jīng)科學(xué)會(huì)及中華神經(jīng)外科學(xué)會(huì)聯(lián)合制定的腦梗死診斷標(biāo)準(zhǔn)〔2〕，均為首次發(fā)病，且發(fā)病24 h內(nèi)入院。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)伴有心、肝、腎疾病或血液病、腫瘤、結(jié)締組織病及自身免疫性疾病;(2)近1個(gè)月內(nèi)有放療、化療、激素、免疫抑制劑、生物制劑等特殊治療史及外傷或手術(shù)史;(3)入院前2 w內(nèi)有感染史或入院后出現(xiàn)感染者。符合入選條件者共49例(觀察組)，其中男36例，女13例，年齡46～72〔平均(58.4±13.6)〕歲;梗死部位:腦葉20例，基底節(jié)13例，小腦4例，腦干6例，多發(fā)梗死6例;按Pul-litono公式估計(jì)腦損傷體積:大體積梗死(＞10 cm3)14例，中體積梗死(4～10 cm3)15例，小體積梗死(＜4 cm3)20例。隨機(jī)選取同期健康體檢者30例為正常對(duì)照組，男18名，女12名，年齡42～70〔平均(54.9±11.1)〕歲。

1.2 標(biāo)本采集 發(fā)病后1、4、7、14 d各抽取肘靜脈血1次，對(duì)照組采血1次，均清晨空腹取血，室溫下3 000 r/min離心15 min，分離血清置于－30℃冰箱成批檢測(cè)。

1.3 指標(biāo)檢測(cè) IL-6、IL-8、TNF-α均采用美國(guó)Rayto 2001酶標(biāo)儀以雙抗體夾心ELISA法檢測(cè)，試劑盒由法國(guó)Immun Otech公司提供。操作嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.4 腦損傷體積測(cè)量 所有患者均于入院當(dāng)時(shí)行頭顱斷層CT掃描檢查，入院后14 d復(fù)查頭顱CT，以明確該次疾病所導(dǎo)致的損傷范圍。按Pul-liitonio公式〔腦梗死體積(cm3)=0.5×a×b×c，其中a、b分別代表兩個(gè)最大的直徑，c代表層數(shù)〕來(lái)估計(jì)梗死體積。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料以±s形式表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)或t檢驗(yàn)，各指標(biāo)間的相關(guān)關(guān)系采用直線相關(guān)分析。

2 結(jié)果

2.1 各時(shí)點(diǎn)、各指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果 觀察組患者發(fā)病第1天血清IL-6、IL-8水平明顯高于正常對(duì)照組(P＜0.01);第4天達(dá)峰值，再逐漸下降;第14天水平仍明顯高于對(duì)照組(P＜0.05)。血清TNF-α水平在1～14 d始終明顯高于對(duì)照組(P＜0.05)。見(jiàn)表1。

2.2 不同體積梗死患者急性期各指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果 大、中體積梗死組血清IL-6、IL-8水平顯著高于對(duì)照組(P＜0.01)，而血清TNF-α水平在大、中、小體積梗死組均顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)。見(jiàn)表2。

表1 觀察組血清IL-6、IL-8、TNF-α濃度的變化與對(duì)照組比較(±s)

表1 觀察組血清IL-6、IL-8、TNF-α濃度的變化與對(duì)照組比較(±s)

與對(duì)照組比較:1)P＜0.05，2)P＜0.01;下表同

指標(biāo)照組(n=30)IL-6(pg/ml) 14.77±7.862) 19.53±5.252) 11.69±5.481) 9.70±4.611)7.20±1.57 IL-8(ng/ml) 2.21±1.012) 3.20±1.052) 2.82±0.842) 1.01±0.761) 0.54±0.11 TNF-α(ng/ml) 59.38±14.372) 53.25±16.262) 50.44±12.502) 52.91±10.262)18.71±6.38

表2 不同體積梗死患者急性期血中IL-6、IL-8、TNF-α水平與比較(±s)

表2 不同體積梗死患者急性期血中IL-6、IL-8、TNF-α水平與比較(±s)

組別 n IL-6(pg/ml) IL-8(ng/ml) TNF-α(ng/ml)對(duì)照組30 7.20±1.57 0.54±0.11 18.71±6.38大體積梗死 14 21.53±5.252) 4.41±2.112) 64.42±14.562)中體積梗死 15 19.21±4.122) 3.52±1.042) 60.62±14.202)小體積梗死 20 18.10±6.211) 2.11±0.921) 54.92±13.602)

2.3 各時(shí)點(diǎn)、各指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果與梗死體積相關(guān)性分析 發(fā)病后第1天及第4天血清IL-6、IL-8、TNF-α水平均與梗死體積呈正相關(guān)，其中第4天血清IL-6、IL-8的峰值水平及第1天TNF-α的峰值水平與梗死體積的相關(guān)性較強(qiáng)(r=0.541，P＜0.01;r=0.661，P ＜0.01;r=0.646，P ＜0.01)。見(jiàn)表3。

表3 各時(shí)點(diǎn)血清IL-6、IL-8、TNF-α濃度與梗死體積的相關(guān)性分析(r值)

3 討論

近年研究發(fā)現(xiàn)〔3〕，腦缺血缺氧造成的能量代謝障礙、興奮性神經(jīng)介質(zhì)釋放、鈣過(guò)量?jī)?nèi)流、自由基反應(yīng)、細(xì)胞死亡等一系列缺血性連鎖反應(yīng)是導(dǎo)致缺血性腦損害的中心環(huán)節(jié)。IL-6和TNF-α是一類具有免疫調(diào)節(jié)與效應(yīng)功能的多肽類細(xì)胞因子，主要由單核巨噬細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生。IL-6的生理功能非常復(fù)雜，正常神經(jīng)細(xì)胞表達(dá)低濃度的IL-6，除具有神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)和神經(jīng)保護(hù)作用外，還可介導(dǎo)炎癥、脫髓鞘和膠質(zhì)增生。Harada等〔4〕研究發(fā)現(xiàn)缺血再灌注后IL-6水平明顯增高，可使基質(zhì)金屬蛋酶-1(MMP-1)表達(dá)增高而導(dǎo)致組織損傷。而Rosenberg等〔5〕又發(fā)現(xiàn)MMP-1參與了缺血性腦損傷與再灌注后血腦屏障開(kāi)放，而血腦屏障破壞后可引起腦損傷加重。這表明急性腦梗死發(fā)生后高濃度的IL-6參與了神經(jīng)損傷。

IL-8具有趨化和激活中性粒細(xì)胞的作用，使中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶釋放，生成活性氧化代謝物，引起組織浸潤(rùn)反應(yīng);并能調(diào)節(jié)黏附分子的表達(dá)，增強(qiáng)白細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞的黏附。TNF主要由被激活的單核/巨噬細(xì)胞分泌，適量分泌可發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用;但分泌過(guò)多或失調(diào)時(shí)則引起免疫損傷，導(dǎo)致感染性休克和多器官衰竭。TNF-α既是有效的腫瘤殺傷因子，又是機(jī)體炎癥及免疫應(yīng)答的重要調(diào)節(jié)因子。目前多數(shù)研究支持腦缺血性疾病中 TNF-α 的表達(dá)具有神經(jīng)毒性作用〔6，7〕。

Ferrarese等〔8〕經(jīng)臨床研究發(fā)現(xiàn)，在腦梗死發(fā)病過(guò)程中不僅病灶局部、腦脊液中各種炎性因子水平升高，外周血中TNF-α與IL-6的表達(dá)、釋放也明顯激活，并呈現(xiàn)時(shí)相規(guī)律。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，急性腦梗死患者血清TNF-α、IL-6、IL-8水平顯著升高，IL-6、IL-8于第4天達(dá)峰值，再逐漸下降，TNF-α濃度于發(fā)病后第1天即升高達(dá)峰值，此后保持高水平表達(dá)。另外，本次研究中發(fā)現(xiàn)腦梗死灶的大小具有明顯的時(shí)相變化，而急性期IL-6、IL-8、TNF-α水平明顯高于恢復(fù)期且與梗死灶大小密切相關(guān)，梗死灶越大者 IL-6、IL-8、TNF-α 水平越高。這提示 IL-6、IL-8、TNF-α水平的增高程度與神經(jīng)功能缺損程度及梗死體積大小密切相關(guān)，各因子可能參與腦梗死早期的炎癥反應(yīng)及再灌注損傷并在其中起重要作用〔9〕。

大量臨床病理研究證明〔10〕，急性腦梗死病情輕重和預(yù)后的決定因素是閉塞血管及其引起的腦梗死灶的大小、位置。血清IL-6、IL-8、TNF-α的動(dòng)態(tài)變化不僅提示了腦梗死急性期機(jī)體免疫系統(tǒng)激活的狀態(tài)，反映機(jī)體對(duì)腦梗死的應(yīng)激反應(yīng)程度，還能為臨床上早期診斷、預(yù)測(cè)病灶大小提供證據(jù)。本研究例數(shù)尚少，這方面的研究還待進(jìn)一步探討。

1 蔡志友，晏 勇，余昌胤，等.急性腦梗死患者血清IL-6、TNF-α和應(yīng)激性高血糖的相關(guān)性研究〔J〕.中國(guó)老年學(xué)雜志，2009;29(22):2851-3.

2 全國(guó)第四屆腦血管疾病學(xué)術(shù)會(huì)議.各類腦血管疾病診斷要點(diǎn)(1995)〔J〕.中華神經(jīng)科雜志，1996;29(6):379-83.

3 任金生.急性腦梗死腦損害的病理機(jī)制和中西醫(yī)療效觀察〔J〕.中國(guó)實(shí)用神經(jīng)疾病雜志，2010;13(5):14-6.

4 Sbibata M，Ueshima K，Harada M，et al.Effect of magnesium sulfate pretreatment and significance of matrix metallopruteinase-1 and interleukin-6 levels in coronary reperfusion therapy for patients with acute myocardial infarchtion〔J〕.Angiology，1999;50(7):573-82.

5 Rosenberg GA，Estrada EY，Dencoff JE.Matrix metalloproteinase and TIMPS are associated with blood-brain barrier opening after reperfusion in rat brain〔J〕.Stroke，1998;29(5):2189-95.

6 張清華，崔元孝，劉敬花，等.老年腦梗死病人血清細(xì)胞因子含量及其動(dòng)態(tài)變化〔J〕.中國(guó)老年學(xué)雜志，2009;29(18):2310-2.

7 張 潔，郭恒怡.腫瘤壞死因子-α在缺血性腦卒中中的損傷作用〔J〕.國(guó)外醫(yī)學(xué)·腦血管疾病分冊(cè)，2004;12(8):597-600.

8 Ferrarese C，Mascarucci P，Zoia C，et al.Increased cytokine release from peripheral blood cells after acute stroke〔J〕.J Cereb Blood Flow Metab，1999;19(9):1004-9.

9 齊建祥，包玉雙，任秀乾，等.人參川芎嗪注射液對(duì)急性腦梗死患者血清IL-6、sICAM-1和TNF-α的影響〔J〕.中國(guó)老年學(xué)雜志，2010;30(12):1732-3.

10 馬青峰，賈建平，薛素芳，等.急性腦梗死患者血管異常與CT灌注成像及臨床預(yù)后關(guān)系的研究〔J〕.首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2010;31(2):149-53.