仲 倩
(濟南大學,山東 濟南 250022)
尾草履蟲(Paramecium caudatum)取材培養方便,繁殖迅速,體型大,易于觀察,是常用的實驗動物。在動物學與生態學教學中,“種群在有限環境中的邏輯斯諦增長”實驗普遍選取尾草履蟲作為實驗材料,一般采用錐形瓶培養法[1-3],因為培養液容量大,尾草履蟲種群密度的測定需要先后多次取樣,誤差難以避免,還影響尾草履蟲種群正常增長,造成種群增長狀況與邏輯斯諦方程擬合不良,實驗效果不盡人意。為此,用微量培養法對尾草履蟲種群邏輯斯諦增長實驗進行了改進,消除了以上缺陷,實驗效果明顯提高,現作簡要介紹如下。
實驗材料:草履蟲、牛奶、純凈水。
實驗儀器:量筒(200mL)、移液管(1mL)、玻璃棒、可調移液器(5-50μL)、燒杯(250m L)、培養皿(直徑90mm)、凹玻片、毛細吸管、解剖鏡、恒溫箱。
實驗步驟和方法:
種源采集:從野外河溝或公園池塘內,用250m L燒杯取水樣,帶回實驗室。置于解剖鏡下觀察,可從中發現尾草履蟲。
培養液配制:采用簡單成熟的牛奶培養液[4],將牛奶和純凈水以1:200的比例調配,用量筒量取200m L純凈水移入250m L燒杯,再用移液管移入1m L牛奶,用玻璃棒攪拌均勻,以培養皿覆蓋燒杯口,放入20℃恒溫箱中備用。
提純與擴增:向培養皿中倒入適量培養液,在解剖鏡下用毛細吸管從野外采集水樣中依次分離吸取尾草履蟲共20個,移入培養皿中,培養皿加蓋放入20℃恒溫箱中培養7天,進行尾草履蟲的提純、擴增與適應性馴化。
種群增長實驗:用可調移液器向凹玻片凹孔中加入培養液50μL,在解剖鏡下用毛細吸管從培養皿中吸取1個草履蟲移入凹孔中,再用一片凹玻片倒扣在接種后的凹玻片上,放入20℃恒溫箱中培養。……