系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者血清瘦素與IL-10、IL-12水平的相關(guān)性

劉進(jìn)軍 劉健民 侯小平 (河北北方學(xué)院微生物教研室，河北 張家口 075000)

系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)是一種累及多器官、多系統(tǒng)的復(fù)雜的自身免疫性疾病，主要以B淋巴細(xì)胞異常表達(dá)，免疫功能紊亂，并過(guò)度產(chǎn)生多種自身抗體為特征。其病因目前仍不完全清楚，可能是在遺傳因素的基礎(chǔ)上，受環(huán)境因素刺激，促發(fā)異常的免疫應(yīng)答，持續(xù)產(chǎn)生大量的致病性自身抗體和免疫復(fù)合物，免疫復(fù)合物廣泛沉積于組織器官，從而引發(fā)相應(yīng)的病理?yè)p害。近來(lái)研究表明SLE的發(fā)生與發(fā)展與許多細(xì)胞因子的水平紊亂密切相關(guān)〔1〕，這些細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)失衡導(dǎo)致免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)功能失調(diào)與許多免疫性疾病的關(guān)系是目前正在研究的熱題。為探討瘦素及相關(guān)細(xì)胞因子在系統(tǒng)性紅斑狼瘡疾病中的相互關(guān)聯(lián)性，我們選擇解放軍251醫(yī)院住院SLE患者及健康體檢者，測(cè)定其血清中瘦素及IL-10，IL-12水平，分析其與SLE發(fā)生、發(fā)展及病情的相關(guān)性。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 以2009年7月至2010年8月來(lái)中國(guó)人民解放軍第251醫(yī)院腎病風(fēng)濕科門診與病房的確診為SLE為SLE患者組，共28例，診斷標(biāo)準(zhǔn)為1982年美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)制定的SLE分類標(biāo)準(zhǔn)，其中男性6例，女性22例;年齡17～68歲，平均年齡(34.7±10.70)歲;體重指數(shù)(BMI)(21.43±1.77)kg/m2。按SLE疾病活動(dòng)指數(shù)(SLE-DAI)〔2〕積分，分為非活動(dòng)組(0～10分)21例，活動(dòng)組(≥10分)7例。以在該院正常體檢者21例為正常對(duì)照組，其中男4例，女17例;年齡25～66歲，平均年齡(33.4±12.10)歲;BMI(21.78±1.80)kg/m2。兩組成員的年齡、性別、BMI均衡，具有可比性。排除心、肝、腎等疾病及其他自身免疫性疾病。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 SLE患者組及正常對(duì)照組均于晨8時(shí)，空腹采集靜脈血4 ml，37℃ 溫育 2 h，3 000 r/min 10 min，分離血清，置－40℃冰箱保存待測(cè)。

1.2.2 SLE-DAI內(nèi)容 抽搐(8分)、精神異常(8分)、腦器質(zhì)性癥狀(8分)、視力下降(8分)、顱神經(jīng)受累(8分)、狼瘡頭痛(8分)、腦血管意外(8分)、血管炎(8分)、關(guān)節(jié)炎(4分)、肌炎(4分)、管型尿(4分)、血尿(4分)、蛋白尿(4分)、膿尿(4分)、新出皮疹(2分)、脫發(fā)(2分)、發(fā)熱(1分)、血小板減少(1分)、白細(xì)胞減少(1分)。根據(jù)患者前10d內(nèi)是否出現(xiàn)上述癥狀定分，凡總分在10分或10分以上者則考慮為疾病活動(dòng)。

1.2.3 血清瘦素水平及IL-10，IL-12檢測(cè) 均采用ELISA法檢測(cè)瘦素及IL-10，IL-12水平，試劑盒由美國(guó)ADLITTERAM DIAGNOSTIC LABORATORIES提供。

2 結(jié)果

2.1 血清瘦素水平檢測(cè)結(jié)果 SLE患者組血清瘦素水平〔(62.7 ±9.71)ng/ml〕較正常對(duì)照組〔(53.5 ±7.82)ng/ml〕顯著增高(t=2.71，P＜0.01)。SLE病情活動(dòng)期瘦素水平與非活動(dòng)期比較無(wú)差異〔(64.1±10.23)，(62.2±9.54)ng/ml，t=0.686，P ＞0.05〕。

2.2 血清IL-10、IL-12水平檢測(cè)結(jié)果 SLE患者組血清IL-10水平明顯高于正常對(duì)照組〔(98.34±10.11)，(90.52±9.51)pg/ml，t=2.08，P ＜0.05〕;而血清 IL-12 水平則明顯低于正常對(duì)照組〔(122.2±12.3)，(198.8±16.20)pg/ml，t=2.67，P ＜0.05〕。

3 討論

SLE是一累及多器官、反復(fù)發(fā)作的自身免疫性疾病，其致病機(jī)制目前尚未完全闡明，可能涉及自身免疫功能調(diào)節(jié)紊亂及細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)的失衡，我們主要研究后者的失衡是否是前者的必然結(jié)果。初始CD4+T細(xì)胞接受抗原刺激后可分化為Tho細(xì)胞，Tho繼續(xù)分化為三種Th細(xì)胞亞群，即Th1、Th2、Th3細(xì)胞，它們分泌不同的細(xì)胞因子，發(fā)揮不同的免疫效應(yīng)。這些細(xì)胞因子不僅決定每個(gè)亞群的免疫效應(yīng)功能，還調(diào)控各亞群的形成和擴(kuò)增。IFN-γ是Th1細(xì)胞分泌的主要細(xì)胞因子，Th1細(xì)胞可通過(guò)釋放IFN-γ和IL-2、IL-12，抑制 Tho細(xì)胞向 Th2分化和 Th2型細(xì)胞因子的產(chǎn)生，主要誘導(dǎo)細(xì)胞免疫，活化巨噬細(xì)胞與細(xì)胞毒細(xì)胞，與器官特異性自身免疫性疾病有關(guān)，如果沒(méi)有調(diào)控機(jī)制會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞免疫功能提高乃至亢進(jìn)。IL-4、IL-6、IL-10由Th2細(xì)胞亞群分泌，Th2細(xì)胞可通過(guò)釋放IL-4、IL-10抑制Tho細(xì)胞向Th1分化和Th1型細(xì)胞因子的產(chǎn)生，主要介導(dǎo)體液免疫，促進(jìn)B淋巴細(xì)胞活化，誘導(dǎo)IgG1的產(chǎn)生，與自身抗體介導(dǎo)的系統(tǒng)性自身免疫性疾病有關(guān)，同樣如果沒(méi)有調(diào)控機(jī)制會(huì)結(jié)果導(dǎo)致體液免疫功能提高。Th1和Th2的相互調(diào)節(jié)及其彼此的動(dòng)態(tài)平衡，在維持機(jī)體的正常免疫功能中、在疾病的抗感染免疫中及免疫性疾病的調(diào)節(jié)中起著至關(guān)重要的作用。

IL-10主要由Th2細(xì)胞、單核細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等產(chǎn)生，可抑制Th1細(xì)胞因子(IL-12、IFN-γ)的產(chǎn)生，同時(shí)具有廣泛的免疫刺激作用，能促進(jìn)B淋巴細(xì)胞、肥大細(xì)胞、胸腺細(xì)胞分化和發(fā)育。其免疫功能表現(xiàn)在:抑制巨噬細(xì)胞激活及其抗原呈遞功能從而直接或間接抑制T淋巴細(xì)胞增生，從而抑制Th1細(xì)胞因子(IL-12、IFN-γ)分泌;同時(shí)，IL-10又能刺激 SLE患者外周血 B細(xì)胞產(chǎn)生抗DNA自身抗體;抗DNA抗體反過(guò)來(lái)又能刺激單個(gè)核細(xì)胞分泌IL-10增加，如此惡性循環(huán)導(dǎo)致SLE病情進(jìn)展，故IL-10的增多可以造成SLE病人的抗-dsDNA抗體的滴度增高，加速機(jī)體的組織損傷。另外有研究表明IL-10的水平與SLE的活動(dòng)性呈正相關(guān)，IL-10越高則SLE疾病活動(dòng)指數(shù)SLEDAI評(píng)分越高〔3〕，因此IL-10可以衡量SLE活動(dòng)性。

IL-12主要由單核-巨噬細(xì)胞、B細(xì)胞產(chǎn)生，可促進(jìn)Th0細(xì)胞向Th1細(xì)胞分化，分泌IL-2、IFN-γ;抑制Th0細(xì)胞向TH2細(xì)胞分化和IgE合成。其主要功能就是誘導(dǎo)早期輔助性T淋巴母細(xì)胞分化為Th1細(xì)胞，并促進(jìn)Th1細(xì)胞增殖。有關(guān)學(xué)者研究表明IL-12水平與SLE-DAI呈負(fù)性相關(guān)關(guān)系，IL-12越高則SLE疾病活動(dòng)指數(shù)SLE-DAI評(píng)分越低〔4〕，因此IL-12水平可作為評(píng)價(jià)SLE患者病情活動(dòng)程度的參考指標(biāo)。本研究結(jié)果說(shuō)明細(xì)胞因子分泌異常在SLE的發(fā)病中起重要作用。

瘦素是一種主要由白色脂肪細(xì)胞合成和分泌的多肽激素，含有167個(gè)氨基酸殘基。人類的肥胖基因位于第7號(hào)染色體長(zhǎng)臂3區(qū)1帶3亞帶(7q31.1)，由3個(gè)外顯子和2個(gè)內(nèi)含子組成，編碼含167個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì)，其N端含有21個(gè)氨基酸的分泌信號(hào)肽，血循環(huán)中的瘦素為146個(gè)氨基酸的多肽類激素，分子量為16 kD〔5〕。瘦素分泌與體脂、性別、遺傳因素等有關(guān)〔6〕。瘦素是一個(gè)具有多種效應(yīng)的細(xì)胞因子，具有促進(jìn)能量消耗、調(diào)節(jié)機(jī)體能力平衡、免疫系統(tǒng)的促炎癥性作用、抵抗β細(xì)胞分泌胰島素、維持生殖功能和骨礦量的等功能。此外，在免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)過(guò)程中瘦素可能參與自身免疫性疾病發(fā)生、發(fā)展〔7〕，主要是由于瘦素可以刺激Th1細(xì)胞的增殖及細(xì)胞因子分泌，且瘦素受體也是Ⅰ類細(xì)胞因子受體家族。本研究結(jié)果說(shuō)明血清瘦素水平升高與SLE病情活躍與否無(wú)明顯相關(guān)性，而與患者自身的免疫功能紊亂有關(guān)。高水平的血清瘦素導(dǎo)致對(duì)免疫系統(tǒng)的促炎癥性作用明顯增強(qiáng)，最終導(dǎo)致全身組織損傷和免疫功能嚴(yán)重紊亂。

本研究中，SLE患者血清IL-12的水平較正常對(duì)照組低，是由于IL-10分泌增多而抑制Th1細(xì)胞因子的分泌，從而使IL-12水平降低。而SLE患者瘦素水平較正常對(duì)照組明顯升高，可能原因是由于機(jī)體為了達(dá)到功能上的平衡，為刺激Th1細(xì)胞的大量增殖和分化，從而抵抗Th2的細(xì)胞因子IL-10的分泌，推測(cè)瘦素與Th1/Th2細(xì)胞因子的產(chǎn)生之間存在相互作用，瘦素可促進(jìn)Th1型細(xì)胞因子的產(chǎn)生，抑制Th2型細(xì)胞因子的分泌。這為研究SLE病理機(jī)制提供新的理論依據(jù)，也是我們繼續(xù)研究的方向。

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