非小細胞肺癌組織中VEGF、PEDF的表達變化及意義

鄭 民,梁岳培,王 洋

(桂林醫學院附屬醫院,廣西桂林 541001)

近年來的研究發現,許多人類實體瘤細胞中血管內皮生長因子(VEGF)呈高表達、色素上皮衍生因子(PEDF)呈低表達,提示二者在調節腫瘤血管生成過程中可能起到拮抗作用[1]。我們選取 2007年 1月 ～2008年 10月首次接受治療的 50例原發性非小細胞肺癌患者的癌組織,采用免疫組化法檢測其中的VEGF、PEDF以及微血管密度(MVD)。現報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 首次治療的非小細胞肺癌患者50例,男27例,女 23例;平均年齡60歲。其中腺癌29例,鱗癌21例。術后病理分期(2004年WHO肺癌分期標準)：Ⅰ期 13例,Ⅱ期 14例,Ⅲ期 23例。術中留取肺癌組織備檢。

1.2 VEGF、PEDF、MVD檢測方法 肺癌組織石蠟切片脫蠟、水化后,根據每一種抗體的要求,對組織抗原進行相應的修復。采用免疫組化法檢測PEDF、VEGF,采用CD31標記免疫組化法檢測MVD;每批染色均設陽性對照及陰性對照,嚴格按照試劑盒說明操作。PEDF以胞質和(或)胞膜呈棕黃色染色為陽性, VEGF以胞質呈棕黃色染色為陽性。每張切片在陽性染色較高區隨機選定10個視野(×400),計算陽性細胞百分比。按著色強度計分：無著色為 0分,淺黃色為 1分,棕黃色為 2分。按著色細胞百分比計分：著色細胞 ＜10%為 0分、10%～40%為 1分、40%～70%為 2分、＞70%為 3分。將著色強度計分與著色細胞百分比計分相乘,0為陰性(-)、1～3為弱陽性(+)、≥4為強陽性(++);+、++均判為陽性。采用CD31標記免疫組化法檢測MVD,取4個視野計數后的平均值作為此病例腫瘤組織中的MVD值。

1.3 統計學方法 采用SPSS19.0統計軟件。VEGF與 EGFR的陽性率比較用 χ2檢驗,用Spearman等級相關分析法分析VEGF與PEDF的相關性。P≤0.05為差異有統計學意義。

2 結果

在非小細胞肺癌組織中VEGF和PEDF的陽性表達率率分別為64%、44%。PEDF陰性組的MVD值為21.38±11.06,與PEDF陽性組的8.98±3.78相比,P＜0.05;VEGF陽性組的MVD值為20.95± 10.74,與VEGF陰性組的 8.50±3.51性比,P＜0.05。PEDF、VEGF表達與肺癌臨床病理參數的關系見表1。表1顯示,VEGF和PEDF的表達與肺癌遠處轉移、分化程度、臨床分期有關(P均＜0.05)。肺癌組織中VEGF和PEDF的表達呈負相關,r= -0.599,P＜0.01。

表1 PEDF、VEGF表達情況與肺癌組織的臨床病理參數的關系

3 討論

腫瘤血管的形成是實體瘤生長的關鍵環節,也是惡性腫瘤浸潤、轉移的關鍵步驟。血管形成是血管內皮細胞生長刺激因子和抑制因子之間相互平衡的結果。腫瘤在其生長、演進過程中分泌促血管生成的相關因子,將平衡打破,誘導血管新生[2]。

VEGF是一種糖基化的多種功能細胞因子,選擇性作用于血管內皮細胞膜上的兩種Ⅲ型酪氨酸激酶受體(VEGFR-1和VEGFR-2)。VEGF及其受體通過旁分泌途徑聯合調控內皮細胞分化、血管形成。有研究[3]在分析雙向分化腫瘤的VEGF表達與血管生成擬態(VM)的關系時發現,VEGF可使腫瘤血管通透性升高,造成大量血漿蛋白外滲,提供了促進血管生成擬態形成和新生血管的暫時性基質。此外, VEGF能誘導內皮細胞中具有抗凋亡作用的Bcl-2的表達,從而抑制內皮細胞的凋亡[4]。本研究結果顯示,在非小細胞肺癌組織中VEGF表達的陽性率為64%,其陽性表達率與與肺癌遠處轉移、臨床分期、分化程度有關。

PEDF是近年來研究較多的與腫瘤相關的內源性血管抑制因子,可抑制腫瘤新生血管生成。有資料[5]顯示,腫瘤分化程度越高,PEDF表達越強。研究[6]表明,PEDF通過作用于Fas/FasL介導的細胞凋亡途徑抑制血管新生。此外,血管緊張素Ⅱ能夠提高VEGF的表達,而這一過程能被PEDF阻止。VEGF與PEDF在腫瘤的增殖轉移過程中互相調控,共同調節著腫瘤的侵襲與轉移。

本研究表明,VEGF、PEDF在肺癌組織中的表達呈負相關,MVD值PEDF陰性組高于陽性組、VEGF陽性組則高于陰性組,說明在細胞分化、腫瘤分期及轉移中,PEDF可能通過抑制MVD起到抑癌作用,二者在調節腫瘤血管生成過程中可能起到拮抗作用。因此,對VEGF的靶向治療和加入外源性PEDF有可能對抑制腫瘤血管生成和延長患者生存期發揮作用。

[1]李仁鋒,崔虎嘯,王萬鵬,等.肝癌組織中PEDF、VEGF的表達及意義[J].山東醫藥,2009,49(15)：84-85.

[2]Mori A,Arii S,Furutani M,etal.Vascular endothelial growth factor induced tumor angiogenesis and tumorigenicity in relation tometastasis in a 1080 human fibrosarcoma cellmodel[J].Int JCancer, 1999,80(5)：738-739.

[3]Fujio Y,Walsh K.Aktmediates cytoproteetion of endothelial cells by vascular endothelial growth factor in an anchorage dependent manner[J].JBiol Chem,1999,274(23)：16349-16354.

[4]Hasani A,Leighl NB.Targeting vascular endothelialgrowth factor in lung cancer[J].JThorac Oncol,2010,5(12)：484-486.

[5]Palm ieri D,Watson JM,Rinehart CA.Age-related expression of PEDF/EPC-1 in human endometrial stromal fibroblasts：implications for interactive senescence[J].Exp Cell Ras,1999,247(1)：142-147.

[6]Mahtabifard A,Merritt RE,Yamada RE,et al.In vivo gene transfer ofpigment epithelium-derived factor inhibits tumor growth in syngeneicmurinemodelsof thoracicmalignancies[J].JThorac Cardiovasc Surg,2003,126(1)：28-38.