Ki-67在不同葡萄胎組織中的表達及臨床意義

張賀玲 許煥芝 王素琴

用Ki-67檢測發現腫瘤的增生活性越高，反映其惡性程度越高，腫瘤分期越高，由此可以認為該腫瘤復發和轉移的發生機會增加［1］，本研究采用免疫組化方法對75例葡萄胎患者宮內組織中檢測Ki-67的表達，以期對于在臨床上如何盡早、準確的預測疾病的發展方向及對患者的治療和預后提供指導。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2006年1月至2010年1月在我院住院的葡萄胎患者75例，經產婦23例，首次妊娠36例。停經時間6～14周，其中＞12周9例，8～12周31例，6～8周35例。所有患者均無葡萄胎病史，均經病理檢查確診。其中侵蝕性葡萄胎5例，完全性葡萄胎42例，部分性葡萄胎28例。年齡20～39歲，平均年齡28.8歲。

1.2 方法

1.2.1 標本采集:對每1位葡萄胎患者刮宮時，取宮腔中央典型的葡萄樣組織送病檢。

1.2.2 病理處理:先對送檢組織進行石蠟切片病理組織學診斷，確診為葡萄胎。再分別對組織進行免疫組織化學測定Ki-67的表達。采用免疫組化方法SP法，SP試劑盒及Ki-67抗體購自福州邁新生物技術有限公司，常規設陽性對照和陰性對照，用已知陽性片作陽性對照，以TBS代替一抗作陰性對照。

1.2.3 結果判定:每張切片在高倍鏡下隨機選擇10個視野，計算視野陽性細胞的平均百分數。陽性染色均為棕黃色顆粒。根據著色強度及范圍，陽性細胞占細胞總數＜5%為(-)，5%～25%為(+)，26%～50%為(++)，＞50%為(+++)。

1.3 統計學分析 應用SPSS 13.0統計軟件，組間比較先進行秩變換，然后用方差分析進行兩兩比較，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

Ki-67的表達 Ki-67在3種不同類型葡萄胎組織中的表達陽性率分別為75%、88.1%、100%，差異有統計學意義(P＜0.05)。見表1。

表1 不同類型葡萄胎組織中Ki-67的表達 例

3 討論

葡萄胎為一種良性病變，其特點是絨毛間質水腫，外觀呈許多水泡聚集狀如葡萄。葡萄胎除有絨毛間質水腫形成水泡外，還有絨毛間質中心血管消失，滋養細胞增生活躍等變化。葡萄胎雖屬良性病變，卻具有生長活躍和潛在惡變的特點，約20%的完全性葡萄胎與4%的部分性葡萄胎會發展為侵蝕性葡萄胎或絨癌。在臨床上判斷葡萄胎清宮后是否發現惡變的主要依據是對人絨毛膜促性腺激素(HCG)的監測，甚至是轉移病灶的出現。Ki-67抗原為細胞內與細胞分裂增殖相關的蛋白抗原，作為一種增殖相關抗原，Ki-67可以標記在很多婦科腫瘤中，有望成為診斷和預測疾病預后的輔助工具。

葡萄胎是妊娠滋養細胞疾病之一，其惡變率高，并有局部侵蝕及遠處轉移的潛在危險。葡萄胎的惡變，滋養細胞腫瘤的發生，是和很多因素相關的。滋養細胞腫瘤的發生是打破了滋養細胞巧妙的平衡，以及影響了細胞繁殖、分化、凋亡、侵蝕的細胞進程。所以這種惡變的機制是多方面，多步驟的。有待于我們的繼續研究。如果能在分子水平發現其變化，則有利于我們對葡萄胎的惡變做出早期的診斷及干預，為預防性化療提供更準確的指征［2］。本研究采取了能代表細胞增殖程度的標記物Ki-67的測定，了解其表達狀況及與不同類型葡萄胎之間的關系，為臨床診斷、治療及預后判斷提供一定的理論依據。

本研究發現，不同類型的葡萄胎組織中Ki-67的表達存在差異，即部分性葡萄胎＜完全性葡萄胎＜浸潤性葡萄胎。國內外學者對此進行過研究，他們的結論與本研究結果一致［3-5］。妊娠滋養細胞疾病是一組以滋養細胞增生為本質特征的病變，分為部分性葡萄胎、完全性葡萄胎、侵蝕性葡萄胎等，前二者為良性病變，但極易發展為惡性滋養細胞病變，惡變率可達10%～20%。盡管有明確的病理組織學診斷標準，但仍有觀察者間的認識不一致。本研究通過檢測增殖標記物Ki-67，發現三者的表達呈遞增形成，提示表達的差異由滋養細胞異常增生所致。因此，我們認為Ki-67可準確反應滋養細胞疾病的增殖活性，可作為評價滋養細胞疾病進展的指標。也可作為判定葡萄胎的指標之一。臨床上若發現葡萄胎中這種增殖標記物均呈強陽性表達時，應警惕葡萄胎惡變的可能，建議進行預防性化療處理，以免進一步病情進展。

Ki-67做為細胞增埴標記物，是一種單克隆抗體，在細胞周期S、G2、M期均有表達，Go期缺如。它的指數高低與許多腫瘤的分化程度、浸潤、轉移及預后密切相關，因此被廣泛作為各種惡性腫瘤的必檢項目之一。因此我們認為Ki-67是目前能代表葡萄胎滋養細胞異常增生的客觀指標，通過檢測其在不同葡萄胎組織中的表達，有助于對各種不同類型葡萄胎的細胞增生程度作出判斷并預測其預后，有助于判定葡萄胎術后是否進行預防性化療。

1 Sebire NJ，Fisher RA，Rees HC.Histopathological diagnosis of partial and complete hydatidiform mole in the first trimester of pregnancy.Pediatr Dev Pathol，2003，6:69-77.

2 黃佳，潘玫.葡萄胎惡變相關因素研究進展.現代腫瘤醫學，2010， 18:416-418.3 陳夢香，馬淑芬，陳文磊，等.增殖與轉移相關基因在妊娠滋養細胞疾病中的表達.現代婦產科進展，2000，9:41-42.

4 蔡紅光，樓藝，史驍梁，等.葡萄胎組織中PCNA與Ki-67的表達及臨床意義.中國婦幼保健，2008，23:1702-1704.

5 Kale A，Soylemez F，Ensari A.Expressions of proliferation markers(Ki-67，proliferating cell nuclear antigen，and silver-staining nucleoalar organizer regions)and of P53 tumor protein in gestational trophoblastic disease.Am J Obstet Gynecol，2001，184:567-574.