腦血靈口服液制備方法改進及薄層色譜鑒別

梅 嬌，劉興文

（重慶市北碚區中醫院，重慶 北碚 400700）

腦血靈口服液為我院腦血管病專科常用制劑，現已收載于2008年版《重慶市醫療機構制劑規范》。全方由丹參、赤芍、水蛭、羚羊角粉等6味藥物組成，具有活血化瘀、逐痰通絡的功效，臨床上用于中風急性期的半身不遂、偏身麻木、口眼歪斜、舌強言蹇、舌紅苔黃等病癥。但原制備方法制得的成品沉淀較多，外觀差，質量也不易控制。經試驗，將其制備方法作了一些改進，增加了羚羊角、丹參、赤芍等的薄層色譜鑒別，現報道如下。

1 儀器與試藥

XMTD－204型水浴鍋（金壇市醫療儀器廠）；JA2003N型電子天平（Max=200 g，實際分度值0.000 1 g，上海精密科學儀器有限公司）。腦血靈口服液（北碚區中醫院制劑室研制，批號分別為090825，091105，090325），丹參對照藥材（批號為923－200006）；芍藥苷對照品（批號為110306）；羚羊角對照藥材（批號為 956－201001）；大黃對照藥材（批號為902－9405），均來自中國藥品生物制品檢定所，氫氧化鈉、鹽酸、石油醚、正丁醇、冰醋酸、茚三酮、乙醚、乙酸乙酯、三氯甲烷、甲醇、甲酸、甲酸乙酯、氨水、乙醇等試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 處方與制備

處方：丹參、赤芍、水蛭、羚羊角粉、生大黃、浙貝母、甜葉菊。

制備：取羚羊角粉，加10倍量的水煎煮3次，每次2h，過濾，濾液放置備用，濾渣加8倍量的0.25％氫氧化鈉溶液，加熱水解4h，冷卻后過濾，濾液用稀鹽酸調pH至7.0，得水解液，將上述水煎液與水解液合并，加熱濃縮至含生藥量10％，作為羚羊角的水解液備用。另取水蛭，照流浸膏劑與浸膏劑項下的滲濾法[2005年版《中國藥典（一部）》附錄10]，用6倍量70％乙醇進行滲濾，收集濾液，于（50±2）℃減壓回收乙醇并濃縮至1∶1（濃縮液∶藥材）備用。再取丹參藥材，粉碎成粗粉，提取3次，第1次用5倍量95％乙醇緩緩加熱并恒定溫度至（80±2）℃，回流1.5h，濾液于80℃以下減壓濃縮并回收乙醇，第2次用4倍量50％乙醇緩緩加熱并恒定溫度至（80±2）℃，回流1.5h，濾液于80℃以下減壓濃縮并回收乙醇。藥渣于（80±2）℃回收乙醇至30℃約3h，第3次加6倍量水浸泡1h，緩緩加熱并恒定溫度至（80±2）℃，浸提2h，濾液于80℃以下減壓濃縮，合并3次提取后的濃縮液，于80℃以下減壓濃縮至1∶2（濃縮液∶藥材），備用。將赤芍、浙貝、大黃加10倍量水煎煮2次，第1次2h，第2次1.5h，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.15～1.20的清膏，加95％乙醇使濃縮液含醇量達75％，低溫靜置24h，過濾，濾液回收乙醇，并濃縮至1∶2（濃縮液∶藥材）。依次將羚羊角水解液、丹參提取濃縮液，水蛭提取濃縮液加入赤芍等藥材的提取濃縮液中，最后加入甜菊苷及防腐劑，調整總量至規定體積，攪勻，分裝即得。

2.2 外觀檢查

按修改后的制備方法制得的腦血靈口服口感好，沉淀量少，貯存過程中質量穩定。

2.3 薄層色譜鑒別

羚羊角：取本品30mL，水浴揮干，殘渣加70％乙醇10mL溶解，充分攪拌，濾過，濾液蒸干，殘渣加70％乙醇1mL使溶解，作為供試品溶液。另取羚羊角對照藥材1 g，加石油醚（60～90℃）20mL，加熱回流1.5h，濾過，棄去濾液，藥渣揮去石油醚后，再加70％乙醇20mL，加熱回流2.5h，濾過，濾液蒸干，殘渣加70％乙醇1mL使溶解，作為對照藥材溶液。取不含羚羊角的陰性樣品，按供試品溶液制備方法制備陰性對照品溶液。照薄層色譜法[2010年版中國藥典（一部）》附錄ⅥB]試驗，吸取3種溶液各5～10μL，分別點于同一硅膠H薄層板上，以正丁醇－冰醋酸－水（4∶1∶5）的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以0.2％茚三酮溶液，加熱至斑點顯色清晰。結果供試品溶液色譜中，在與對照藥材溶液色譜相應位置上顯相同顏色的斑點，陰性對照品溶液無干擾（見圖1 A）。

丹參：取本品10mL，加乙醚10mL振搖提取，分取乙醚提取液，蒸干，殘渣加乙酸乙酯1mL使溶解，作為供試品溶液。另取丹參對照藥材1 g，加乙醚10mL，振搖，放置1h，濾過，濾液蒸干，同法制成對照藥材溶液。取不含丹參的陰性樣品，按供試品溶液制備方法制備陰性對照品溶液。照薄層色譜法[2005年版中國藥典（一部）》附錄Ⅵ B]試驗，吸取3溶液各5μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（60～90℃）－乙酸乙酯（4∶1）為展開劑，展開，取出，晾干。結果供試品溶液色譜中，在與對照藥材溶液色譜相應位置上顯相同顏色的斑點，陰性對照品溶液無干擾（見圖1B）。

赤芍：取本品10mL，用乙醚提取至乙醚層無色，棄去乙醚液，水層用水飽和正丁醇提取3次，每次10mL，合并正丁醇液，用水洗滌3次，每次15mL，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘渣加乙醇1mL使溶解，作為供試品溶液。另取芍藥苷對照品，加乙醇制成每1mL含1.5mg的溶液，作為對照品溶液。取不含赤芍的陰性樣品，按供試品溶液制備方法制備陰性對照品溶液。照薄層色譜法[2005年版中國藥典（一部）》附錄ⅥB]試驗，吸取供試品溶液和陰性對照品溶液4μL、對照品溶液3μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷－乙酸乙酯－甲醇－甲酸（40∶5∶10∶0.2）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，在110℃加熱至斑點顯色清晰。結果供試品溶液色譜中，在與對照品溶液色譜相應位置上顯相同顏色的斑點，陰性對照品溶液無干擾（見圖1C）。

大黃：取本品10mL，加鹽酸1mL，置水浴上加熱30min，立即冷卻，用乙醚振搖提取2次，每次10mL，合并乙醚液，揮干，殘渣加三氯甲烷2mL使溶解，作為供試品溶液。另取大黃對照藥材0.4 g，加甲醇10mL，冷浸1h，時時振搖，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10mL，再加鹽酸1mL，同法制成對照藥材溶液。取不含大黃的陰性樣品，按供試品溶液制備方法制備陰性對照品溶液。照薄層色譜法[2005年版中國藥典（一部）》附錄ⅥB]試驗，吸取3種溶液各5μL，分別點于同一硅膠H薄層板上，以石油醚（30～60℃）－甲酸乙酯－甲酸（15∶ 5∶1）上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置氨蒸氣中熏數分鐘后，日光下檢視。結果供試品溶液色譜中，在與對照藥材溶液色譜相應位置上呈相同顏色的斑點，陰性對照品溶液無干擾（見圖1D）。

圖1 薄層色譜圖

3 討論

修改前處方中除水蛭外，其余各味藥均用水提取，羚羊角粉直接加至水提取濃縮液中，因此成品的沉淀較多，澄明度差，使用前須用力搖勻。修改處方后羚羊角粉制成水解液，丹參單獨提取，其余水提藥物在原工藝上增加了醇沉步驟，使得成品的澄明度得到了很大的改善。由于本品中含動物藥水蛭和羚羊角粉，因此原工藝制得成品有一種特殊的不快感，修改后成品中無藥物細粉，并加入甜葉菊矯味，口感明顯改善。原工藝成品中含藥物細粉，放置后易沉降，服用時不易搖勻，致使每日羚羊角粉的服用量存在明顯差異，而修改后均為提取物，不存在上述問題。修改前成品中的藥物細粉如果滅菌不徹底，可能將微生物帶入，導致成品衛生學不合格，修改后避免了上述問題。原工藝水蛭的提取所用溶劑量偏少，提取不夠充分，收集的滲濾液直接進行配液，導致成品中含少量乙醇。修改后增加了提取溶劑，使得有效成分的提取更充分，滲濾液低溫（50℃左右）減壓回收乙醇，既保證了有效成分不被分解（60℃以上易分解）[1]，又克服了成品中含乙醇的問題。原工藝羚羊角粉直接加入濃縮液中進行配液。修改后羚羊角粉采用堿水解處理[2]，既保證了有效成分的提取，又改善了成品的澄明度、口感等問題。原工藝丹參采用水煎煮提取，致使質量難以控制，修改后改為醇提加水提[3]，醇提部分減壓（80℃左右）濃縮并回收乙醇，既保證了丹參脂溶性成分（丹參酮類）和水溶性成分（酚酸類）的提出，又避免了有效成分（丹酚酸B等）在高溫下發生分解和轉化。

在原工藝的基礎上增加了醇沉的步驟，除去了大部分雜質，使成品澄明度得到了提高。原工藝制得的成品，部分藥物提取不充分，質量不易控制。修改后藥物提取更充分，增加了羚羊角[4]、丹參[5]、赤芍[6]的薄層色譜鑒別，質量更穩定可控。

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[2]江亞棟，繆也夫，蘇 娟.羚羊感冒口服液的工藝研究[J].中成藥，1998（7）：2－5.

[3]艾相平，張百鋒，黨學德.復方參丹片提取工藝的實驗研究[J].中國藥事，2009，23（7）：694－695.

[4]高 革，王福慧.羚羊角口服液的研制[J].時珍國醫國藥，1998，22（4）：357－358.

[5]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（一部）[M].北京：化學工業出版社，2005：52.

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