合體滋養層細胞微粒在子癇前期重度發病中的作用

劉艷慧，黃亞絹

(上海交通大學附屬第六人民醫院，上海200233)

目前，子癇前期的病因學和發病機制尚未明確。近年來，由胎盤表面新陳代謝產生的妊娠期特有的循環微粒合體滋養層細胞微粒(STBM)得到了人們的關注。本研究檢測子癇前期重度患者血漿中STBM的表達水平，并分析硫酸鎂應用前后STBM的變化情況，探討STBM在子癇前期重度發病中的作用。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2010年3～8月在我院住院的子癇前期重度患者20例作為實驗組，年齡(29.9±6.5)歲，孕次(2.4 ±1.0)次，產次(0.3 ±0.47)次，入院孕周(33.2±4.1)周;隨機選取同期相似孕周的門診健康孕婦10例作為對照組，年齡(29.8±5.0)歲，孕次(2.3 ±1.5)次，產次(0.4 ±0.52)次，入院孕周(34.0±3.8)周。子癇前期的診斷依據樂杰主編的《婦產科學》第7版［1］。兩組在年齡、孕次、產次、孕周等方面無統計學差異，且均無煙酒嗜好，無肝腎疾病、原發性高血壓、糖尿病及其他心血管疾病病史。

1.2 檢測方法 抽取所有研究對象肘前靜脈血5 ml，置于無菌肝素抗凝管中，20min內置于4℃、3 000 r/min離心15min，分離血漿后置于－80℃冰箱保存備用。標本收集齊全后，4℃解凍，每份標本取2 ml血漿，用磷酸鹽緩沖液(PBS)稀釋為1∶2，轉移至超速離心管，于4℃、150 000 g離心60min，沉淀血漿微粒。棄去上清液，350 μl的PBS重懸沉淀，置于－80℃冰箱保存待測。利用抗胎盤堿性磷酸酶抗體捕獲STBM，采用ELISA方法檢測孕婦血漿STBM水平［2］。子癇前期重度患者入院后首先予5%葡糖糖100 ml+25%硫酸鎂20 ml沖擊治療，然后予5%葡萄糖500 ml+25%硫酸鎂60 ml，1～2 g/h靜脈滴注，滴注時間依病情而定。本實驗中研究對象硫酸鎂的平均應用時間為3.7 d。

1.3 統計學方法 采用SPSS13.0軟件進行統計學分析，所得結果以±s表示，采用t檢驗。以P≤0.05為有統計學差異。

2 結果

2.1 血漿STBM水平比較 實驗組和對照組STBM水平分別為(79.27 ±22.26)、(36.09 ±16.73)ng/ml，P＜0.01。實驗組應用硫酸鎂治療后血漿STBM水平為(75.19 ±26.29)ng/ml，與治療前無差異(P＞0.05)。

2.2 相關性分析 實驗組血漿STBM水平與白蛋白(r= －0.310、P=0.038)、新生兒出生體質量呈顯著負相關(r= －0.348、P=0.019)，與谷丙轉氨酶(r=0.346、P=0.020)、谷草轉氨酶(r=0.354、P=0.017)、24 h 尿蛋白定量(r=0.388、P=0.008)等呈正相關，與平均動脈壓、血白細胞、血中性粒細胞、乳酸脫氫酶、肌酐、尿酸、凝血酶原、部分凝血活酶時間、纖維蛋白原、D－二聚體、纖維蛋白原降解產物均無相關性(P＞0.05)。

3 討論

子癇前期作為妊娠期特有的并發癥，其病因至今未明。大多數學者認為，胎盤缺血缺氧可能是子癇前期發病的起始病因，而全身炎癥反應和血管內皮損傷是子癇前期發病的最終通路和重要環節。子癇前期母體綜合征是由于母體內皮細胞損害引起的，后者是更廣泛的母體系統炎癥反應應答的一部分。激發炎癥反應的因子被認為是源自于胎盤，早期妊娠子宮螺旋動脈重鑄障礙導致胎盤缺血，缺血再灌注損傷以及氧化應激導致胎盤源性因子過量釋放。子癇前期發病相關的胎盤因子還不清楚，目前發現的有可溶性血管內皮生長因子受體－1(sFlt－1)、過氧化物、類花生酸類物質、細胞因子和STBM［3］。

STBM是胎盤表面新陳代謝、凋亡和(或)壞死的合體滋養層細胞受調控地釋放亞細胞微粒，脫落至母體血液循環形成。它存在于正常妊娠婦女的血漿中，并且與孕周之間有線性關系［2］。體外實驗發現，用正常胎盤制備的STBM灌注皮下小動脈，可改變乙酰膽堿引起的血管舒張［4］。STBM還能刺激單核細胞產生過多的炎性細胞因子 TNF－α、IL－12、IL－18、IFN－γ［5］，刺激中性粒細胞產生超氧自由基導致氧化應激，產生大量過氧化物，破壞內皮細胞的結構和功能，造成血管內皮細胞損傷［6］。本研究結果發現，STBM在正常妊娠婦女以及子癇前期重度患者的血漿中均有表達，但在后者表達水平更高。由此推測，子癇前期患者循環中持續的血管抵抗影響了絨毛間隙正常的血液動力學，進而導致STBM的產生增多，從而導致子癇前期患者特征性的內皮細胞損傷和固有免疫細胞的激活，表明STBM參與子癇前期的發病過程，可能是子癇前期發病的中心環節。本研究還發現，STBM水平與反應組織缺氧程度的實驗室指標血清谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶呈顯著正相關，故STBM可在一定程度上反映子癇前期疾病的嚴重程度，進一步證明了STBM與子癇前期的發病及母體綜合征的發生過程密切相關。

鎂離子可以抑制運動神經末梢釋放乙酰膽堿，阻斷神經肌肉接頭間的信息傳導，使骨骼肌松弛;可以刺激血管內皮細胞合成前列環素，抑制內皮素合成，降低機體對血管緊張素Ⅱ的反應，從而緩解血管痙攣狀態;可以使平滑肌細胞內鈣離子水平下降，從而解除血管痙攣，減少血管內皮損傷。基于鎂離子的以上作用，子癇前期患者解痙首選硫酸鎂。本研究結果表明，硫酸鎂的應用(平均應用時間為3.7 d)并不能改善STBM在重度子癇前期患者血漿中的表達水平，說明子癇前期作為一種胎盤性疾病，由于胎盤缺血缺氧而造成的STBM水平增高，并不能通過應用硫酸鎂而真正逆轉。至于子癇前期患者血漿中STBM水平能否通過其他藥物來改善，有待于找到STBM影響子癇前期內皮細胞功能損害的具體途徑，進而研究出有效減少STBM水平的藥物，從而阻斷子癇前期的發生發展。

［1］樂杰.婦產科學［M］.7 版.北京:人民衛生出版社，2008:94－95.

［2］Goswami D，Tannetta DS，Magee LA，et al.Excess syncytiotrophoblast microparticle shedding is a feature of early－onset pre－eclampsia，but not normotensive intrauterine growth restriction［J］.Placenta，2006，27(1):56－61.

［3］Poston L.Endothelial dysfunction in pre－eclampsia［J］.Pharmacol Rep，2006，58 Suppl:69－74.

［4］Cockell AP，Learmont JG，Smarason AK，et al.Human placental syncytiotrophoblast microvillous membranes impair maternal vascular endothelial function ［J］.Br J Obstet Gynaecol，1997，104(2):235－240.

［5］Redman CW，Sargent IL.Microparticles and immunomodulation in pregnancy and pre－eclampsia［J］.J Reprod Immunol，2007，76(1－2):61－67.

［6］Aly AS，Khandelwal M，Zhao J，et al.Neutrophils are stimulated by syncytiotrophoblast microvillous membranes to generate superoxide radicals in women with preeclampsia ［J］.Am J Obstet Gynecol，2004，190(1):252－258.