液基細(xì)胞中p53異常表達(dá)在宮頸鱗癌診斷中的應(yīng)用價(jià)值

王 宇,劉君星,王 琳,周麗艷

(1.佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院檢驗(yàn)科,黑龍江 佳木斯154003;2.佳木斯大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院,黑龍江 佳木斯154007)

宮頸癌的死亡率在全球婦女惡性腫瘤死亡率中居第二位,全球每年50萬(wàn)人宮頸癌新發(fā)病例,我國(guó)每年約有新發(fā)病例13.15萬(wàn),占世界新發(fā)病例的28.8%[1,2]。p53基因作為重要的抑癌基因被發(fā)現(xiàn)其異常表達(dá)可導(dǎo)致多種腫瘤的發(fā)生,有研究發(fā)現(xiàn)其與宮頸鱗癌也存在相關(guān)性[3]。液基細(xì)胞學(xué)檢查因取材方便和無(wú)創(chuàng)可作為篩查宮頸病變的重要手段。液基細(xì)胞標(biāo)本p53在宮頸癌及癌前病變中的應(yīng)用價(jià)值還不確定,本研究對(duì)112例宮頸癌及正常的液基細(xì)胞標(biāo)本進(jìn)行p53免疫細(xì)胞學(xué)化學(xué)檢測(cè),從而分析p53異常表達(dá)對(duì)宮頸鱗癌診斷的價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2009—09～2010—07于佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院就診的41例宮頸鱗癌患者,年齡20～62(40.8±7.8)歲,35例健康體檢者,年齡20～60(41.7±6.2)歲,所有患者均經(jīng)臨床和病理診斷。

1.2 方法

采用免疫細(xì)胞化學(xué)法和免疫組織化學(xué)法檢測(cè)p53在SCC組和NILM組范圍的LCT標(biāo)本和石蠟組織標(biāo)本上的表達(dá),并對(duì)比LCT、LCT聯(lián)合p53在宮頸鱗癌的診斷符合率。

1.3 判斷標(biāo)準(zhǔn)

p53陽(yáng)性細(xì)胞判斷標(biāo)準(zhǔn)[4]:細(xì)胞核棕黃色為染色陽(yáng)性,隨機(jī)選取10個(gè)高倍視野,結(jié)合著色范圍及強(qiáng)度進(jìn)行分級(jí)。著色范圍以陽(yáng)性細(xì)胞百分率判斷:10%為0分,11%～25%為1分,26%～50%為2分,51%～75%為3分,＞75%為4分。著色強(qiáng)度根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞著色深淺判定:無(wú)著色為0分,淺棕黃色為1分,棕黃色為2分,棕褐色為3分,深棕褐色為4分。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所有數(shù)據(jù)采用軟件SPSS14.0進(jìn)行分析,組間采用方差分析。采用spearman等級(jí)相關(guān)分析檢驗(yàn) LCT、LCT中p53免疫細(xì)胞染色的關(guān)系,P＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 LCT中p53異常表達(dá)

p53在NILM和SCC各組中的陽(yáng)性率分別為5.71%(2/35)、58.54%(24/41)。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,證明p53異常表達(dá)在宮頸鱗癌組合宮頸正常組之間存在明顯差異(P＜0.05),結(jié)果如表1。

表1 p53表達(dá)陽(yáng)性率及平均著色強(qiáng)度

2.2 宮頸鱗癌中單純LCT與LCT中p53聯(lián)合檢測(cè)的意義

單純LCT和LCT中p53聯(lián)合檢測(cè)對(duì)宮頸鱗癌有很高的特異性和較好的敏感性,聯(lián)合兩項(xiàng)檢測(cè)能提高敏感度和準(zhǔn)確性。見(jiàn)表2。

表2 宮頸鱗癌中單純LCT與LCT中p53聯(lián)合檢測(cè)的意義

3 討論

宮頸鱗癌是婦科常見(jiàn)的惡性腫瘤,其發(fā)病率僅次于乳腺癌。應(yīng)用LCT篩查可以明顯地降低宮頸癌發(fā)病率和死亡率,與傳統(tǒng)的篩查方法比較能提高宮頸異常細(xì)胞的陽(yáng)性率,但是由于LCT僅依靠主觀的形態(tài)學(xué)手段,與病理學(xué)檢查結(jié)果之間仍存在一定程度的不符合率。近年來(lái),隨著醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)的發(fā)展,腫瘤標(biāo)志物是腫瘤細(xì)胞在癌變過(guò)程中由于癌基因的表達(dá)而生成的抗原和其它生物活性物質(zhì)[4],p53基因異常表達(dá)與宮頸鱗癌的研究成為熱點(diǎn)。國(guó)內(nèi)Wang[5]等研究表明p53基因的陽(yáng)性表達(dá)與宮頸癌密切相關(guān)。p53基因在宮頸鱗癌中有高水平表達(dá),而在正常組織(細(xì)胞)中陽(yáng)性表達(dá)極低。本研究應(yīng)用鼠抗人單克隆抗體Do-7對(duì)NILM組和SCC組進(jìn)行p53蛋白的免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè),結(jié)果顯示,LCT涂片中,在正常宮頸鱗狀上皮細(xì)胞少有p53的陽(yáng)性表達(dá),SCC組的陽(yáng)性表達(dá)為58.54%(24/41),與文獻(xiàn)報(bào)道一致。LCT中p53檢測(cè)在宮頸鱗癌組中的檢出率顯著高于正常宮頸組(P＜0.05),說(shuō)明p53異常表達(dá)與宮頸癌的發(fā)生關(guān)系比密切。p53蛋白可作為子宮頸癌診斷和預(yù)后判斷的一項(xiàng)參考指標(biāo)[6]。單純LCT和LCT中p53聯(lián)合檢測(cè),把敏感度提高到65.85%,準(zhǔn)確性提高到78.95%。因此推測(cè)LCT標(biāo)本中p53檢測(cè)與病理組織相一致,p53作為客觀生物學(xué)標(biāo)記物,可為臨床醫(yī)生評(píng)估病情,估計(jì)病變進(jìn)展,預(yù)測(cè)患者的預(yù)后提供有價(jià)值的輔助指標(biāo)。綜上所述,p53基因異常表達(dá)在宮頸鱗癌的發(fā)生中占有重要地位。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)LCT標(biāo)本中p53免疫細(xì)胞化學(xué)篩查,提高了單純應(yīng)用細(xì)胞學(xué)診斷的陽(yáng)性率,增加了宮頸癌及癌前病變篩查的敏感度和特異性,該方法可減輕患者在病理學(xué)診斷中的痛苦,減低對(duì)病患部位的損傷,降低采樣成本,簡(jiǎn)化采樣程序,這必然被醫(yī)生和患者樂(lè)于接受。LCT聯(lián)合p53因方法簡(jiǎn)便、患者痛苦小且較高的敏感性和特異性等優(yōu)點(diǎn),可用于宮頸癌的輔助診斷。

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