鹽酸法舒地爾對蛛網膜下腔出血后血管痙攣療效觀察

楊福義,譚福生,谷志龍

(佳木斯大學附屬第一醫院神經外科,黑龍江佳木斯 154003)

蛛網膜出血后的血管痙攣是致死、致殘的一個主要原因[1]。SAH患者約有1/3～2/3會出現 CVS,而導致遲發型缺血性神經功能損害。作為一種新型的擴血管藥物,法舒地爾能夠擴張腦部血[2],增加局部腦血流量。

1 材料與方法

1.1 主要儀器和試劑

4%多聚甲醛、10%水合三氯乙醛,奧林巴斯生物顯微鏡(BHS型,日本),轉輪式組織切片機(301-268型,德國Leica公司),病理組織漂烘處理儀(PHY-III型,國產),病理組織包埋機(BMZ-III型,國產)。

1.2 動物實驗及分組

①SAH組Wistar大鼠通過腹腔麻醉后,在操作臺上備皮消毒。大鼠斷尾取血0.3mL,切開皮膚,通過環枕膜,將大鼠血緩慢注入枕大池,注意進針深度約2.5mm,速度在0.1mL以內,切口縫合,消毒。尼莫地平組和法舒地爾組做相同的處理。模型建立后1h候尼莫地平組按3mg/kg的劑量腹腔注射尼莫地平,法舒地爾組同樣處置,計量為3mg/kg以后每12小時按同樣劑量給藥,給藥總時間為24h,之后不再給藥。

②將各組大鼠隨機分成2次處理,第一次為A組,第二次為B組。A組1d后斷髓法處死各組大鼠,在頸部取出含有腦干的基底動脈,放置在多聚甲醛中固定1d。經過固定、脫蠟、包埋,每組各標本均切 4張,厚度是 7μ m,進行 HE染色。B組為3天后處理大鼠,操作方法與A組相同。

1.3 統計學分析

2 結果

經過HE染色后的大鼠基底動脈發現:第1天處死大鼠中正常對照組、尼莫地平組和法舒地爾組可見內皮細胞排列緊密,動脈內膜完整;模型組出現平滑肌細胞肥大,內皮細胞褶皺、變性,可見炎性細胞浸潤,并且管腔直徑明顯小于其他組。第3天處死大鼠的對照組和法舒地爾組基底動脈幾乎沒變化,而模型組和尼莫地平組大鼠基底動脈痙攣達高峰內皮細胞變化明顯,可見大量炎性細胞浸潤。經過各組別之間基底動脈管徑測量,得出管徑大小,以均數±標準差表示,見表1。

表1 對照組、模型組、尼莫地平組及法舒地爾組大鼠基底動脈管徑數據分析結果(± s,n=5)

表1 對照組、模型組、尼莫地平組及法舒地爾組大鼠基底動脈管徑數據分析結果(± s,n=5)

1)A組中,尼莫地平組和法舒地爾組比較,P＞0.05;;2)B組中,尼莫地平組和法舒地爾組比較,P＜0.05。

對照組 模型組 尼莫地平組 法舒地爾組A 組 1.625±0.034 0.836±0.0846 1.597±0.047 1.608±0.042______B組_________________________1.617±0.041________________________________________________________________________________________0.629±0.0937_0.986±0.084_1.374±0.075

3 討論

SAH后的腦血管痙攣(CVS)是腦底大動脈延遲出現的狹窄,受累血管遠端分布區經常伴有灌注減少[3]。SAH最嚴重的并發癥之一是CVS,能夠引起彌漫性腦水腫和遲發性缺血性神經損傷,導致SAH致死和致殘的重要原因。研究表明,SAH后CVS的發病機制中發揮重要作用是血液及紅細胞崩解產物氧合血紅蛋白(oxyhemoglobin,OxyHb)。OxyH是血紅蛋白的二價鐵形式,大量實驗證據表明OxyHb是血管痙攣的介質[4]。離體的腦動脈再注射OxyHb后可持續收縮,腦池內注射OxyHb可致CVS[5]。SAH的腦脊液中的OxyHb與CVS的范圍、程度[6]具有相關性。血管平滑肌收縮而引起CVS,且持續一定時間。收縮是細胞內Ca2+的增加所介導的,依賴Ca2+的肌球蛋白輕鏈激酶(myosin light chain kinase,M LCK)被激活。M LCK使肌球蛋白輕鏈(M LC)磷酸化進而使肌動蛋白與磷酸化的MLC相互作用,肌球蛋白ATP酶激活,隨后引起平滑肌收縮[7]。單體G蛋白Rho及下游靶點Rho激酶可是腦血管痙攣持續存在。在Rho激酶在高血壓和腦血管痙攣這種血管平滑肌相關的疾病中起主要作用。最近實驗數據顯示:實驗性SAH后M LCP磷酸化增加,并且這種增加和Rho激酶激活呈正相關[8]。研究結果顯示Rho/Rho激酶途徑在SAH后的CVS發病機制中起主要作用。傳統藥物尼莫地平通過影響細胞膜上的受體和或Ca2+通道來調控進入細胞的Ca2+,進而引起血管舒張。Rho激酶存于細胞內,它可以直接作用于肌球蛋白鏈,作用更直接。Rho激酶抑制劑法舒地爾具有雙重抑制磷酸化的作用,變現以下幾個方面作用:(1)抑制Rho激酶,增加eNOS的表達,增加了NO生成,從而發揮對組織損傷的保護作用(2)阻斷Rho激酶對MLCP的抑制,進而抑制鈣敏化的效應,介導平滑肌舒張,使血管擴張;(3)拮抗Rho激酶可有效抑制炎性細胞的遷徙及浸潤,減少炎癥介質的生成,減輕炎癥反應,抑制蛋白水解和細胞凋亡。本研究實驗結果表明,法舒地爾和尼莫地平,對CVS的預防均是有效的,但是法舒地爾作用作用途徑直接,且雙重抑制磷酸化的作用是血管舒張更加持久穩定,不易反彈。

[1]Weir B,M acDonald L.Cerebral vasospasm[M].Clin Neurosurg,1993

[2]卓大宏.中國康復醫學[M].第2版.北京:華夏出版社,2003,720

[3]Mayberg M R.Cerebral vasospasm[J].Neurosurg Clin N Am,1998,9(3):615-627

[4]Macdonald RL,Weir BKA.A review of hemoglobin and the pathogenesis of cerebral vasospasm[J].Stroke,1991,22:971-982

[5]M acdonald RL,Weir BKA,Runzer TD,et al.Etiology of cerebral vasospasm in primates[J].J Neurosurg,1991,75:415-424

[6]Mayberg M R,Okada T,Bark DH.The role of hemoglobin in arterial narrowing after subarachnoid hemorrhage[J].J Neurosurg,1990,22:634-640

[7]Somlyo AP,Somlyo AV.Signal transduction by G proteins,Rho kinase and protein phosphatase to smooth muscle and non-muscle my osin II[J].J Physiol,2000,522:177-185

[8]Sato M,Tani E,Fujikawa H,et al.Involvement of Rho-kinase mediated phosphory lation of my osin light chain in enhancement of cerebral vasospasm[J].Circ Res,2000,87:195-200