幾種中草藥對(duì)綿羊瘤胃發(fā)酵、抗氧化功能和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響

中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所 喬國(guó)華 周學(xué)輝 王曉力楊 曉 張懷山 李錦華

在中國(guó)，中草藥的使用已經(jīng)有了很長(zhǎng)時(shí)間的歷史。馬得瑩等（2005、2004）報(bào)道，女貞子可降低肉雞脂質(zhì)過(guò)氧化，提高血漿超氧化物歧化酶和谷胱甘肽的含量，提高血清抗體滴度。張慶茹等（2005、2004）報(bào)道，黨參、黃芪、女貞子提取物可提高奶牛的抗氧化功能和乳產(chǎn)量。近些年，很多種植物提取物（絲蘭、大蒜和生姜等），皂甙、單寧和植物精油被用作飼料添加劑來(lái)調(diào)控反芻動(dòng)物瘤胃的發(fā)酵（Benchaar等，2008、2006；Busquet等 2006）。 一些植物提取物可以改變瘤胃發(fā)酵的模式，提高總揮發(fā)性脂肪酸的產(chǎn)量，改變乙酸丙酸比例，降低瘤胃液氨態(tài)氮的濃度（Cardozo等，2006；Lila等，2003）。 植物提取物對(duì)瘤胃發(fā)酵影響的作用機(jī)理目前還不是很清楚。Bosler等（1997）發(fā)現(xiàn)，絲蘭皂甙可以提高綿羊的屠宰體增重。紫花苜蓿的皂甙對(duì)大部分革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌有抗性。本研究旨在研究黨參、黃芪和女貞子及其提取物對(duì)綿羊瘤胃發(fā)酵、抗氧化功能和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物和日糧 試驗(yàn)一，選用16只道賽特和小尾寒羊雜交羊，按照體重相近的原則分成4組，分圈飼養(yǎng)，每組4只羊。飼喂1個(gè)月后屠宰。記錄屠宰體重（去頭、皮、蹄和內(nèi)臟），同時(shí)用涂有肝素鈉的試管收集頸靜脈血。基礎(chǔ)日糧組成見(jiàn)表1。 綿羊每天在 06∶00 和 18∶00 飼喂，自由采食，自由飲水。精料與粗料手工混合。

表1 試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧組成與營(yíng)養(yǎng)水平（干物質(zhì)基礎(chǔ)）

試驗(yàn)二，選擇成年道賽特和小尾寒羊雜交羊，體重和年齡相近，母羊4只，單籠飼養(yǎng)。試驗(yàn)分4期，每一期28 d，前21 d為預(yù)飼期，后7 d為采樣期。綿羊每天在06∶00和18∶00飼喂，基礎(chǔ)日糧見(jiàn)表1，自由采食，自由飲水。精料與粗料手工混合。

1.2 中草藥的制備 女貞子（果實(shí)），黨參，黃芪每個(gè)處理組每天添加中草藥原粉6 g，對(duì)照組不添加。

女貞子提取物的制備 芪（根）購(gòu)自甘肅省黃河中藥材市場(chǎng)。中草藥經(jīng)洗凈，60℃烘干24 h，粉碎過(guò)1 mm篩備用。參照Tava等（1993）的方法，粉碎過(guò)篩后的女貞子置于2 mol/L KOH的30∶70甲醇水中，進(jìn)行水解，含有女貞子提取物的溶液經(jīng)凍干回收，備用。

1.3 瘤胃液樣品和血液樣品的采集 在試驗(yàn)一中，血液樣品在 4°C，2500 g離心 15 min，回收血漿用于測(cè)定超氧化物歧化酶 （SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）和谷胱甘肽還原酶（GR）含量。所有的血液生化指標(biāo)均采用試劑盒進(jìn)行測(cè)定，試劑盒均購(gòu)自南京建成生物公司。

在試驗(yàn)二中，瘤胃液樣品在每個(gè)試驗(yàn)期第26天，晨飼后 0、2、4、6、8 h 通過(guò)口導(dǎo)管采集，瘤胃液用4層醫(yī)療紗布過(guò)濾后分成兩個(gè)部分，一部分立即用pH計(jì)測(cè)定pH值，另一部分4°C，3000 g離心 15 min，加入 6 mol/L HCl，-20 ℃保存，用于測(cè)定氨態(tài)氮濃度和揮發(fā)性脂肪酸濃度。測(cè)定方法參照Qiao等（2010）的方法，同時(shí)用含有肝素鈉的試管在頸靜脈采集血液樣品，測(cè)定尿素氮含量（BUN）。

1.4 飼料和糞樣的收集 在試驗(yàn)期采用全收糞法測(cè)定營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率，取飼料樣品和15%左右的糞樣在65°C烘箱中烘干24 h。測(cè)定指標(biāo)包括飼料樣品和糞樣中的干物質(zhì)、有機(jī)物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維含量。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析 試驗(yàn)一采用單因素隨機(jī)區(qū)組試驗(yàn)設(shè)計(jì)（RCBD），統(tǒng)計(jì)模型為 Yijk=μ+ai+βj+εijk，其中μ為平均值，a為處理效應(yīng)，β為動(dòng)物效應(yīng)，ε為誤差項(xiàng)。采用鄧肯式多重比較。

試驗(yàn)二采用4×4拉丁方試驗(yàn)設(shè)計(jì)（4只羊，4期）。 統(tǒng)計(jì)模型為：Yijk=μ+ai+βj+γk+εijk， 其中μ為平均值，a為處理效應(yīng)，β為行效應(yīng)，γ為列效應(yīng)，ε為誤差項(xiàng)。采用鄧肯式多重比較。

2 結(jié)果

2.1 幾種中草藥對(duì)血液抗氧化功能和屠宰體重的影響 試驗(yàn)一的研究表明（見(jiàn)表2），日糧添加女貞子顯著提高了綿羊血液超氧化物歧化酶和谷胱甘肽還原酶的活性（P＜0.05），同時(shí)降低了丙二醛含量（P＜0.05）。女貞子組顯著提高了綿羊屠宰體重（P＜0.05）。黨參和黃芪對(duì)屠宰體重及抗氧化指標(biāo)無(wú)顯著影響（P ＞ 0.05）。

2.2 女貞子提取物對(duì)綿羊瘤胃發(fā)酵指標(biāo)和血漿尿素氮的影響 表3表明，女貞子提取物對(duì)晨飼后各個(gè)采樣點(diǎn)的瘤胃液pH值無(wú)顯著影響 （P＞0.05）。瘤胃液氨態(tài)氮濃度的峰值出現(xiàn)在晨飼后2 h，隨后下降。在晨飼后 2、4、6 h和 8 h，瘤胃液總揮發(fā)性脂肪酸濃度（VFA）和丙酸的濃度都隨著女貞子提取物添加量的提高而顯著提高（P＜0.05），乙酸濃度在晨飼后各個(gè)采樣點(diǎn)無(wú)顯著變化 （P＞0.05）。瘤胃液氨態(tài)氮濃度和血漿尿素氮濃度隨著女貞子提取物添加量的提高而顯著下降 （P＜0.05）。

表2 幾種中草藥對(duì)綿羊屠宰體重和血液抗氧化指標(biāo)的影響

2.3 女貞子提取物對(duì)日糧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響 見(jiàn)表4。500 mg/kg組顯著提高了日糧干物質(zhì)和有機(jī)物表觀消化率 （P＜0.05），添加300 mg/kg時(shí)顯著提高有機(jī)物的表觀消化率 （P＜0.05），對(duì)中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維、粗蛋白質(zhì)無(wú)顯著影響（P＞0.05）。其他添加劑量對(duì)各個(gè)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率都無(wú)顯著影響（P＞0.05）。

3 討論

3.1 幾種中草藥對(duì)血液抗氧化功能和屠宰體重的影響 本研究表明，女貞子能夠提高血液抗氧化的功能。這個(gè)研究結(jié)果與馬得瑩等（2005、2004）、張慶茹等（2005、2004）報(bào)道一致。 據(jù)報(bào)道，機(jī)體處于低抗氧化功能狀態(tài)下，生產(chǎn)性能會(huì)受到負(fù)面影響，皂甙有提高機(jī)體抗氧化功能的作用，女貞子中含有皂甙的成分，可以提高機(jī)體抗氧化功能，進(jìn)而促進(jìn)機(jī)體的生產(chǎn)能力，這與胡明等（2006）報(bào)道相一致。

3.2 女貞子提取物對(duì)干物質(zhì)采食量和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響 植物提取物對(duì)綿羊干物質(zhì)采食量影響的體內(nèi)研究報(bào)道較少。Oh等（1968）報(bào)道，植物提取物因其有特殊的氣味，降低了鹿的干物質(zhì)采食量。一些屬于植物精油的植物提取物（桂皮醛，檸檬烯和派烯等）降低了肉牛的干物質(zhì)采食量 （Benchaar等，2006；Busquet等，2006）。 但是，在試驗(yàn)二中，女貞子提取物（皂甙）沒(méi)有降低綿羊的干物質(zhì)采食量，說(shuō)明其對(duì)日糧的適口性沒(méi)有影響。

表3 女貞子提取物對(duì)綿羊瘤胃發(fā)酵指標(biāo)和血漿尿素氮濃度的影響

表4 女貞子提取物對(duì)綿羊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響

一些研究結(jié)果證明，植物提取物（瑞香草酚、大蒜素、辣椒拉素）有提高日糧中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維表觀消化率的作用 （Benchaar等，2008；Ross等，2001），但是本試驗(yàn)中，女貞子提取物并沒(méi)有改變這兩種日糧纖維的表觀消化率。這可能是由于女貞子提取物對(duì)瘤胃主要的纖維降解菌沒(méi)有刺激作用，需要進(jìn)一步的試驗(yàn)來(lái)研究添加女貞子提取物后主要纖維降解菌的數(shù)量變化。

女貞子提取物對(duì)日糧粗蛋白質(zhì)消化率沒(méi)有影響，這與 Benchaar 等（2006）、Ruppert等（2003）的研究結(jié)果一致。女貞子提取物提高了日糧有機(jī)物質(zhì)消化率，說(shuō)明女貞子提取物能夠刺激瘤胃降解非結(jié)構(gòu)性碳水化合物。

3.3 女貞子提取物對(duì)瘤胃發(fā)酵指標(biāo)的影響 Busquet等（2006）報(bào)道，絲蘭皂甙顯著降低了瘤胃液氨態(tài)氮的濃度。女貞子提取物有很大一部分是皂甙的成分。本試驗(yàn)結(jié)果表明，女貞子提取物的添加劑量為 500 mg/kg，顯著降低了晨飼后 2、4、6、8 h的瘤胃液氨態(tài)氮濃度。同時(shí)血漿尿素氮的濃度也顯著降低。這說(shuō)明皂甙可以改善瘤胃發(fā)酵模式，降低氨態(tài)氮損失。總揮發(fā)性脂肪酸濃度提高，說(shuō)明女貞子提取物可以提高瘤胃整體發(fā)酵能力。從日糧養(yǎng)分消化率數(shù)據(jù)看，女貞子提取物提高了有機(jī)物質(zhì)消化率，瘤胃液丙酸濃度的升高很可能是由于日糧非結(jié)構(gòu)性碳水化合物在瘤胃中的降解程度提高。

4 結(jié)論

女貞子可以改善綿羊血液抗氧化功能，提高綿羊的屠宰體重。女貞子提取物可以提高瘤胃發(fā)酵能力，改善瘤胃發(fā)酵模式（提高丙酸濃度，降低氨態(tài)氮濃度），提高日糧的干物質(zhì)和有機(jī)物質(zhì)消化率，300 mg/kg和500 mg/kg添加效果較佳。

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