香加皮有效部位滴丸的質(zhì)量標準研究*

楊 虹 ，劉 虹 ，王 萌 ，任曉亮 ，朱曉月

（1.天津中醫(yī)藥大學科研處，天津 300193；2.天津中醫(yī)藥大學中醫(yī)藥研究院，教育部方劑學重點實驗室，天津 300193）

香加皮有效部位滴丸的質(zhì)量標準研究*

楊 虹1，劉 虹2，王 萌2，任曉亮2，朱曉月2

（1.天津中醫(yī)藥大學科研處，天津 300193；2.天津中醫(yī)藥大學中醫(yī)藥研究院，教育部方劑學重點實驗室，天津 300193）

[目的]建立香加皮有效部位滴丸的質(zhì)量標準。[方法]建立了高效液相色譜（HPLC）法進行杠柳毒苷含量測定和杠柳毒苷的均勻度檢查；對滴丸劑進行了常溫下的初步穩(wěn)定性考察。[結(jié)果]香加皮有效部位滴丸含量測定方法學考察的指標均符合有關(guān)規(guī)定；滴丸均勻度符合要求。[結(jié)論]建立了有效部位及滴丸的質(zhì)量標準，方法簡便、可靠。滴丸劑質(zhì)量基本穩(wěn)定。

香加皮；有效部位；滴丸；質(zhì)量標準；杠柳毒苷

香加皮（Cortex Periplocae）是蘿藦科植物杠柳（Periploca SepiumBge.）的干燥根皮，其最主要的強心苷成分為杠柳毒苷（periplocin）。本院采用現(xiàn)代工藝對專利技術(shù)香加皮提取物[1]進行精制，富集了其中的強心苷成分，使杠柳毒苷含量達到50%以上，制成香加皮抗心衰有效部位[2]，并用大鼠離體心臟灌流法對其抗心衰活性進行了驗證。因中藥滴丸劑吸收迅速、口服生物利用度高，故將香加皮有效部位制成滴丸，可用于治療急、慢性心衰。課題組進行了香加皮有效部位滴丸的質(zhì)量標準研究，包括杠柳毒苷的含量測定及含量均勻度檢查；另外對有效部位滴丸常溫下的穩(wěn)定性進行了初步考察。

1 儀器與試藥

Waters515高效液相色譜儀。杠柳毒苷對照品（天津中醫(yī)藥大學中醫(yī)藥研究院，純度98%以上）；香加皮有效部位（天津中醫(yī)藥大學中醫(yī)藥研究院，杠柳毒苷含量53%）；聚乙二醇6 000（分析純，天津市北方化玻購銷中心），液體石蠟（分析純，天津市北方天醫(yī)化學試劑廠）；乙腈（色譜純，天津市康科德科技有限公司），超純水（Millipore系統(tǒng)），甲醇（色譜純，天津市康科德科技有限公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 香加皮有效部位滴丸的制備 取40 g聚乙二醇6 000加熱融化，將260mg香加皮有效部位加入上述基質(zhì)中，充分攪拌使其分散均勻，倒入滴丸儲液器中（外壁通80～85℃循環(huán)水），以每分鐘30滴的速度滴入冷卻柱（柱內(nèi)裝液體石蠟，外壁裝涼水加碎冰）。使滴丸完全冷卻后，取出擦干，即得。

2.2 含量測定

2.2.1 色譜條件 色譜柱為依利特HypersilODS-2柱（250mm×4.6mm，5μm），乙腈－水（27:73）為流動相，流速1.0mL/min，柱溫25℃，檢測波長220 nm。

2.2.2 對照品溶液的制備 精密稱取杠柳毒苷對照品適量，用甲醇配成濃度為每1mL含杠柳毒苷0.18mg的對照品儲備液。

2.2.3 供試品溶液的制備 取樣品10粒，研細，精密稱取40mg，置10mL量瓶中，加適量甲醇，超聲提取10min，放冷，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜（0.45 μm）濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.2.4 線性關(guān)系的考察 精密吸取杠柳毒苷對照品儲備液 1、1.5、3、2.5、5mL 分別置 25、25、25、10、10mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，分別取儲備液及系列濃度稀釋液10μL注入色譜儀，測定峰面積。以進樣量（X）為橫坐標，峰面積（Y）為縱坐標，繪制標準曲線。得回歸方程 Y=1.3×106X-1.8×103，r＝0.999 9，線性范圍 0.071 84～1.796μg。

2.2.5 精密度實驗 精密吸取供試品溶液，重復進樣6次，測得杠柳毒苷峰面積相對均數(shù)標準差（RSD）為1.8%，結(jié)果見表1。

2.2.6 供試品穩(wěn)定性實驗 取同一供試品溶液，分別于 0、2、4、6、8 h 進樣，測定杠柳毒苷峰面積變化，8 h內(nèi)峰面積RSD為1.5%，表明供試品溶液在8 h內(nèi)穩(wěn)定。

表1 精密度實驗測定結(jié)果Tab.1 The resultsof precision test

2.2.7 重復性實驗 取同一樣品，按2.2.3分別制備6份供試品溶液，測定杠柳毒苷含量，RSD為2.0%，結(jié)果見表2。

表2 重復性實驗測定結(jié)果Tab.2 The resultsof repeatability test

2.2.8回收率實驗 采用加樣回收法，精密稱取已知含量的有效部位滴丸，分別精密添加一定量的杠柳毒苷對照品，按樣品含量測定項下方法操作，測定，平均回收率100.7%，RSD為1.1%，結(jié)果見表3。

表3 滴丸中杠柳毒苷的回收率測定結(jié)果Tab.3 The resultsof average recovery of periplocin in drop pills

2.2.9 樣品含量測定 取3批香加皮有效部位滴丸，分別按2.2.3制備供試品溶液。精密吸取對照品溶液10μL，供試品溶液15μL，分別注入液相色譜儀，記錄峰面積，外標法計算含量，測定結(jié)果見表4。色譜圖見圖1。

表4 三批香加皮有效部位滴丸測定結(jié)果（n=3）Tab.4 The determ ination resultsof3 batchsof effective fraction drop pills in Cortex Periplocae

2.3 溶散時限 取香加皮有效部位6粒，按照崩解時限檢查法（中國藥典2005版一部附錄IK）滴丸劑項下檢查，結(jié)果見表5。

表5 香加皮有效部位滴丸溶散時限考察Tab.5 The dissolve latitudeofeffective fraction drop pills in Cortex Periplocae

結(jié)果表明：3批滴丸溶散時限均在30 min以內(nèi)，符合中國藥典2005版一部附錄滴丸劑項下的有關(guān)規(guī)定。

2.4 含量均勻度 取香加皮有效部位滴丸10粒，照含量均勻度檢查法（中國藥典2005版二部附錄XE）檢查，結(jié)果分別見表6。

表6 香加皮有效部位滴丸含量均勻度考察Tab.6 The contentuniform ity of effective fraction drop pills in Cortex Perip locae

結(jié)果表明：按照含量均勻度檢查法（中國藥典2005版二部附錄XE）檢查，滴丸的含量均勻度均符合規(guī)定。

2.5 常溫下滴丸的穩(wěn)定性初步考察 將香加皮有效部位滴丸于常溫避光下密封保存，于不同時間取樣，按2.2測定杠柳毒苷的含量，測定結(jié)果見表7。按2.3測定溶散時限，按2.4測定均勻度，結(jié)果均符合規(guī)定。

結(jié)果表明，香加皮有效部位滴丸在室溫避光下保存6個月，質(zhì)量基本穩(wěn)定。

3 討論

3.1 研究建立了香加皮有效部位滴丸的質(zhì)量標準。研究建立了該滴丸中杠柳毒苷的含量測定方法，該方法簡便、準確、可靠。對該滴丸進行了溶散時限及含量均勻度檢查，均符合藥典規(guī)定。

3.2 《中國藥典》（2005版）一部附錄IK對中藥滴丸劑只要求做重量差異、溶散時限的檢查[3]，考慮本滴丸劑主藥和基質(zhì)比例相差較大，而且強心苷類成分有一定毒性，參考中國藥典2005版二部附錄XE含量均勻度項下的規(guī)定[4]：每個標示量小于2mg的滴丸劑應(yīng)檢查含量均勻度，故將本滴丸重量差異檢查改為含量均勻度檢查更為合理。

表7 香加皮有效部位滴丸穩(wěn)定性結(jié)果Tab.7 The stability ofeffective fraction drop pills in Cortex Perip locae

3.3 中藥有效部位中有效成分含量較高，將有效部位制備成滴丸劑，既可滿足臨床需要，又可減少服用量，增加患者順應(yīng)性，實現(xiàn)了中藥“三小、三效、三便”的現(xiàn)代化需求[5-6]。

[1]張伯禮，劉 虹，高秀梅，等.香加皮強心作用有效提取物、制備方法及用途[P].中國：專利號：ZL200410019975.5.

[2]劉 虹，高秀梅，張伯禮，等.香加皮強心作用有效部位的制備方法及含它們的藥物制劑和醫(yī)療用途 [P].中國：專利號：200510013382.2.

[3]國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典(一部)[S].北京:化學工業(yè)出版社，2005：附錄IK.

[4]國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典(二部)[S].北京:化學工業(yè)出版社，2005：附錄XE.

[5]劉 虹，楊 虹，王 萌，等.大孔樹脂純化香加皮提取物的工藝考察[J].天津中醫(yī)藥大學學報，2006，25（3）：188-190.

[6]劉 虹，孫 巍，王 萌，等.正交實驗優(yōu)化香加皮藥材的提取工藝[J].天津中醫(yī)藥大學學報，2006，25（1）：38-39.

Study on quality standard ofeffective fraction drop pills in Cortex Periplocae

YANGHong,LIUHong,WANGMeng,etal
(1.Managementoffice ofscientific research of Tianjin University of TraditionalChineseMedicine,Tianjin 300193,China；2.Research institute of Tianjin University of TraditionalChineseMedicine,Tianjin 300193,China)

[Objective]To establish quality standard ofeffective fraction drop pills foranti-heart failure in Cortex Periplocae.[Methods]HPLCmethod was adopted for content determination of periplocin and contentuniformity in drop pills.The primary study wasmade on the stability ofdrop pillsunder the room temperature.[Results]Themethodology of contentdetermination for the drop pillsand the uniformity complied with rules.[Conclusion]The quality standard of the effective fraction drop pills foranti-heart failure in Cortex Periplocaewas setup and themethod was convenientand reproducible.The drop pillswere relatively stable.

Cortex Periplocae;effective fraction;drop pills;quality standard;periplocin

R284.2

A

1672-1519(2011)04-0332-03

國家科技支撐計劃“重大新藥創(chuàng)制”重大專項（2009ZX09103－372）。

楊 虹（1981－），女，研究實習員，研究方向為中藥新藥研發(fā)。

劉 虹。

2011-04-25）