遠志提取物對小鼠腦內多巴胺含量的影響

張淑萍,王昆祥,辛 華

(佳木斯大學附屬第一醫院,黑龍江 佳木斯 154003)

遠志 Radix Polygalae為遠志科植物遠志 Polygala tenuifolia Willd.或卵葉遠志 Polygala L.的干燥根,具有安神益智之功效。用于心腎不交引起的失眠多夢、健忘驚悸、神志恍惚、咳痰不爽等癥的治療[1]。遠志主要含有遠志皂苷元(tenuigenin)A、B、 細 葉 遠 志 素 (tenuifolin)、 遠 志 皂 苷(onjisaponin)A-G、遠志糖苷 (tenuifolisde)A-E、遠志寡糖(tenuifoliose)A-P[2]。多巴胺 (DA)是腦內的一種神經遞質,近些年來科學家們研究推測腦內多巴胺含量增加可能造成帕金森氏綜合征。歷代醫書記載遠志有益智功效,臨床常用于預防和治療老年癡呆癥。本研究對遠志提取物對小鼠腦內多巴胺含量的影響進行研究,為遠志的進一步開發及臨床應用提供科學依據。

1 實驗材料

地西泮注射液購于藥都制藥集團股份有限公司。遠志提取物購于陜西冠宇醫藥科技有限公司。實驗用昆明種小鼠購于佳木斯大學實驗動物中心(黑動字:99101001)。

2 實驗方法

2.1 動物分組及給藥

昆明種小鼠40只,雌雄各半,隨機分為4組:空白對照組,陽性對照組 ,樣品低劑量組,樣品高劑量組,每組 10只。適應性喂養 3d,第4天開始給藥,每天1次,連續 7d。空白對照組:灌服蒸餾水0.4mL;陽性對照組:灌服地西泮 lmg˙kg-1;樣品低劑量組:遠志提取物9g˙kg-1;樣品高劑量組:遠志提取物18g ˙kg-1。

2.2 樣品處理

2.2.1 組織樣品處理

于末次給藥后 lh,處死小鼠,取出小腦,用冷生理鹽水沖洗,濾紙拭干,精密稱重后置于含冰的酸化正丁醇中,置于帶塞刻度離心管中,勻漿,用酸化正丁醇補足到4mL,振蕩5min,離心5min(3000r˙min-1),取上清液 2.5mL置于另一帶塞離心管內,加5mL正庚烷和 0.1N鹽酸 1.2mL振蕩5min,離心5min,溶液分為二層。取水相0.5mL,加入0.067M pH7.2磷酸鹽緩沖液1.5mL,碘試劑0.1mL,靜置2min,加堿性亞硫酸鈉 0.5mL,靜置2min,加 6N醋酸 0.6mL,沸水浴20min,冷卻,加 45%磷酸0.lmL,沸水浴 20min,在 Ex:310nm,Em:370nm時測定 DA熒光強度。

2.2.2 標準品溶液處理

取標準液0.2mL置于帶塞刻度離心管中,按“2.2.1項下”方法進行操作。

2.2.3 空白溶液處理

取重蒸餾水0.2mL,置于帶塞刻度離心管中,按“2.2.1項下”方法進行操作。

2.2.4 計算公式

2.3 統計學處理

數據統計采用兩樣本 t檢驗,所有數據以均數±標準差± s)表示,P ＜0.05表示有顯著性差異。

3 實驗結果

對測定 DA結果與空白對照組比較,陽性對照組與樣品高劑量組均能顯著降低小鼠腦組織內 DA含量 (P＜0.05)。

表1 樣品含量測定結果(±s,n=10)

表1 樣品含量測定結果(±s,n=10)

組 別 DA平均含量(g˙kg-1)空白對照組 1.48±0.096陽性對照組 0.62±0.036低劑量組 1.27±0.070高劑量組 0.63±0.086*

4 討論

遠志中可以提取到一種多巴胺受體的配基-四氫非洲防已胺。此化合物在體外可抑制 [3H]SCH23390和 [3H]螺哌隆與大鼠紋狀體膜的結合 ,它還能抑制 [3H]哌唑嗪和大鼠腦皮質細胞膜結合 ,但不能改變 [3H]QNB及 [3H]Muscimol對膜的結合,研究顯示此抑制作用是通過競爭與非競爭混合機制而實現的。多巴胺是 NA的前體物質,是下丘腦和腦垂體腺中的一種關鍵神經遞質,中樞神經系統中多巴胺的濃度受精神因素的影響,神經末梢的 GnRH和多巴胺間存在著軸突聯系并相互作用。遠志(Radix Polygalae)為常用中藥,最早記載于《神農本草經》,列為上品,具有安神益智之功效。本研究發現遠志提取物能夠降低小鼠腦內多巴胺的含量,這可能與其發揮抑制安神作用有一定的關系,作用機理還有待于進一步研究。

[1] 張耀春,王立偉.遠志提取物對小鼠學習記憶的影響 [J].中國新藥雜志,2006,15(15):1254-1257

[2] 彭汶鐸.遠志皂苷的降壓作用及機制 [J].中國藥理學報,1995,17(5):29-642

[3] 張淑蘭.失眠藥物治療研究進展 [J].中華中西醫學雜志,2005,3(12):51-52

[4] 張敏.常見的幾種睡眠障礙 [J].中國農村醫學雜志,2008,6(5):12-13

[5] Inoue O,Ogihara Y,Yamasaki K.Application of13C nuclear magnetic resonance spectroscopy to the elucidation of the structure of a minor dammarane saponin from the seeds of Zizyphus jujuba[J].J Chem Res,1978,144-149