丹參酮對血瘀證乳腺癌 P53基因、mdm2基因表達的影響*

劉永惠 郭少賢 常 靖 李 安 夏欣欣 王 瑞 華 莎

西安交通大學醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院(西安 710061)

乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展、轉移與突變型 P53基因和 mdm2基因關系密切,突變型 P53基因和 mdm2基因是腫瘤的相關基因。現(xiàn)代中醫(yī)研究認為,腫瘤及其轉移存在血瘀證,血瘀證與腫瘤增殖、轉移存在正相關關系[1]。為深入研究血瘀證與活血化瘀藥物抗癌的作用機理,本實驗通過檢測丹參酮干預血瘀證裸鼠 P53、mdm2的表達,探討其抗腫瘤增殖、轉移的作用機理。

1 材料與方法 1.1 實驗動物與細胞系 雌性裸鼠 40只,5周齡,體重 (20± 1)g,來自上海斯萊克實驗動物有限責任公司 ,許可證號碼 SCXK(滬 2007-0005),實驗和飼養(yǎng)均在 SPF條件下進行。乳腺癌細胞株 MDA-M B-231s購自北京康為世紀生物科技有限公司。

1.2 實驗藥物 丹參酮注射液購自西安交通大學醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院 (批號 90527CY)。腎上腺素購自上海禾豐制藥有限公司(批號 H31021062)。

1.3 主要儀器與試劑 SCW-BCM生物超凈工作臺購自蘇州市長春電子儀器廠,MDF-U72V超低溫冰箱購自日本三洋公司,臺式多功能離心機購自長沙市鑫奧儀器儀表有限公司,普通光學顯微鏡購自日本 Olympus公司,電熱恒溫水浴箱DR-HW-2購自北京西城區(qū)醫(yī)療器械廠,CO2細胞培養(yǎng)箱購自上海控菱科技有限公司,旋渦混合器購自上海第三分析儀器廠,胎牛血清購自杭州四季青生物工程材料有限公司,P53 Elisa試劑盒購自 Groundwork Biotechnology Diagnosticate分裝,MdM 2 Elisa試劑盒購自 Groundwork Biotechnology Diagnosticate分裝。

1.4 方 法 1.4.1 細胞培養(yǎng):人乳腺癌細胞系 MDAM B-231s在 10%胎牛血清的培養(yǎng)基中,5%CO2、37℃條件下培養(yǎng),待細胞長至瓶底 80～90%,用 0.25%胰蛋白酶消化,3～5d傳代一次。……