多發性骨髓瘤患者血清骨橋蛋白及TNF-α檢測的臨床意義

周 健，柳小平

(南通大學附屬東臺醫院，江蘇南通224200)

多發性骨髓瘤(MM)是一種骨髓漿細胞惡性腫瘤，其發病機理尚不十分明確，至今仍無有效的治愈手段。MM臨床特征以患者骨髓中大量漿細胞的克隆性增生最為顯著，并激活破骨細胞引起骨質破壞。研究顯示，MM的病程受多種細胞因子的調控。為此本研究通過檢測MM患者血清骨橋蛋白(OPN)和TNF-α水平，探討OPN和TNF-α在MM的輔助診斷及預后判斷中的作用。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2008年1月～2009年8月南通大學附屬東臺醫院和蘇州大學附屬第一人民醫院收治MM患者33例，其診斷均符合張之南等［1］主編的《血液病診斷及療效標準》。男22例、女11例，年齡39～70(57.78±5.09)歲。33例患者中，初診10例，復發16例，緩解7例。臨床分期Ⅰ期3例、Ⅱa期7例、Ⅱb期8例、Ⅲa期10例、Ⅲb期5例。對照組30例為同期南通大學附屬東臺醫院體檢中心的健康體檢志愿者，男20例、女10例，年齡35～65(54.23±4.22)歲。所有受試者除外嚴重感染、心肝腎臟功能損害、自身免疫性疾病及其他惡性腫瘤。

1.2 方法 所有受試者于清晨空腹抽取靜脈血3 m l，3 000 g離心5 min后分離血清置-70℃冰箱保存待用。血清OPN測定采用ELISA法，用武漢博士德公司的人OPN檢測試劑盒，使用RAD550酶標儀(BIO-RAD公司)在450 nm測定吸光度值。TNF-α檢測采用放射免疫分析法，試劑為科美生物工程公司產品，儀器為中科院上海日環儀器廠的SN-695B放免儀。所有操作由專人嚴格按試劑說明書進行。

1.3 統計學方法 采用SPSS16.0軟件;檢測數據用±s表示，組間比較采用t檢驗。P≤0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不同病程MM患者OPN和TNF-α檢測結果初診和復發MM患者血清OPN水平低于對照組，TNF-α水平高于對照組(P均＜0.05);MM緩解患者OPN和TNF-α水平與對照組相比差異無統計學意義(P ＞0.05)。見表1。

表1 不同病程MM患者OPN和TNF-α檢測結果(±s)

表1 不同病程MM患者OPN和TNF-α檢測結果(±s)

注:與對照組比較，*P ＜0.05

組別 n OPN(pg/m l) TNF-α(ng/ml)MM 組初診 10 132.0 ±56.8* 9.45 ±1.09*復發 16 143.6 ±51.0* 9.12 ±1.12*緩解 7 387.0 ±113.7 1.98 ±0.23對照組30 412.0 ±109.9 2.32 ±0.33

2.2 不同臨床分期MM患者血清OPN和TNF-α水平 Ⅰ～Ⅲ期MM患者血清OPN水平依次降低(P均＜0.05)，Ⅱa和Ⅱb、Ⅲa和Ⅲb之間無統計學差異(P＞0.05)。Ⅰ～Ⅲ期MM患者血清TNF-α水平逐漸升高(P均＜0.05)，Ⅱa和Ⅱb、Ⅲa和Ⅲb之間無差異(P＞0.05)。見表2。

表2 不同臨床分期MM患者血清OPN、TNF-α水平(±s)

表2 不同臨床分期MM患者血清OPN、TNF-α水平(±s)

注:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期間 OPN、TNF-α 水平比較，P ＜0.05

臨床分期 n OPN(pg/m l) TNF-α(ng/ml)3 207.7 ±78.9 4.87 ±0.66Ⅱa 7 120.9 ±56.8 6.01 ±0.78Ⅱb 8 124.7 ±67.3 7.86 ±0.71Ⅲa 10 67.8 ±24.1 9.58 ±1.01ⅢⅠb 5 64.1 ±20.8 9.89 ±1.08

3 討論

MM是一種常見的惡性血液系統腫瘤，以產生M蛋白單克隆漿細胞惡性增生為特點，骨髓中克隆性增生的漿細胞浸潤骨骼和軟組織引起骨骼破壞、貧血、腎功能損害等表現，目前仍是一種不能治愈的疾病［2］。MM發病機制十分復雜，其臨床特點之一就是進行性骨質破壞而導致的MM骨病。MM患者分化得到的B細胞和漿細胞浸潤骨髓，分泌破骨細胞活性因子，從而導致骨損傷。骨髓微環境作為一個具有多重功能、復雜的網絡結構，由基質細胞及其他復雜的細胞外基質分泌的細胞因子對骨髓瘤細胞增殖和分化起到一定的調控作用［3］。

OPN是一種由多種細胞(成骨細胞、淋巴細胞、巨噬細胞等)分泌的細胞外基質蛋白，OPN能調節骨骼的礦物化，參與腫瘤細胞的浸潤和轉移，影響細胞間的信號傳遞。有研究認為，OPN能阻止RANKL與RANK結合，抑制破骨細胞活性，減少破骨細胞數量［4］。Lipton等發現，與霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤患者OPN水平升高相比，MM患者OPN水平反而降低［2］。本研究結果也顯示，MM初診和復發的患者血清OPN水平顯著低于對照組，而緩解組患者OPN水平和對照組比較無差異。本研究還發現，OPN與MM病程進展也有著密切的關系。Ⅰ期患者的OPN水平明顯高于Ⅱ、Ⅲ期患者，但Ⅱa和Ⅱb、Ⅲa和Ⅲb之間無差異;說明隨著患者腎功能損害、骨損害病程的進展，OPN水平會進一步下降。國外文獻也報道，沒有骨損害患者血清OPN水平高于有骨損害患者，OPN血清水平降低與骨病嚴重程度密切相關［5］。因此，我們認為OPN可作為MM預后診斷的一個重要的指標。

TNF-α是由骨髓基質細胞分泌的一種細胞因子，屬腫瘤壞死因子超家族成員，具有廣泛的生物學活性。細胞因子的分泌異常會影響B細胞的激活、發育及分化。有文獻［6］報道，TNF-α通過直接刺激骨髓瘤前體細胞分化、發生，促使B細胞增殖分化，在MM患者溶骨性損害中發揮重要作用。本研究結果顯示，MM初診和復發的患者血清TNF-α顯著高于緩解組和對照組，Ⅰ～Ⅲ期MM患者血清TNF-α水平逐漸升高，與國外報道相似［7］。說明TNF-α與MM的發生和發展均有著密切的關系。

［1］張之南，沈娣.血液病診斷及療效標準［M］.2版.北京:科學出版社，1998:168-373.

［2］Lipton A，Alis M，Leitze K，et al.Serum osteoprotegerin levels in healthy controls and cancer patients［J］.Clin Cancer Res，2002，8(12):2306-2310.

［3］Preston SL，Alison MR，Forbes SJ，etal.The new stem cellbiology something for everyone［J］.JClin Pathol Molpathol，2003，56(9):86.

［4］SimonetWS，Lacey DL，Dunstancr，et al.Osteoprotegerin:a novel secreted protein involved in the regulation of bone density［J］.Cell，1997，89(2):309-319.

［5］Seidel C，H jertner Y，AbildgaardN，et al.Suerum osteoprotegerin levels are reduced in patientswith multiple myeloma with lytic bone disease［J］.Blood，2001，98(6):2269-2271.

［6］Balaille R.Ncw insight in theclinical biology ofmultiple myeloma［J］.Semin Haematol，1997，34(Suppl1):23.

［7］Singhal S，Mehta J，Desikan R，etal.Antitumor activity of thalidomide in refractorymultiple myeloma［J］.New End JMed，1999，341(21):1565.