不同基質制備的吳藿降壓滴丸體外溶出對比研究

胡立志， 李 靜， 張 珮， 桂 卉

(湖南中醫藥大學藥學院，湖南長沙410007)

吳藿降壓滴丸原料藥由淫羊藿提取物和吳茱萸提取物組成，主要用于治療高血壓見有肝寒、濁氣上逆等病證。吳茱萸味苦辛，具有通降之功，能使上逆之氣下行，能夠降肝之濁氣，使肝氣平和而到達血壓自平。淫羊藿為補陽藥，不宜用于陰虛陽亢類型的高血壓病，但對于非陽亢類高血壓，適量的配以本品的提取物，利用提取物中黃酮苷類的降壓作用，與吳茱萸一起相須使用，多個降壓途徑并行，降壓效果更好。經提取精制制成滴丸后，有效的降壓成分得到富集，減少了服用量，同時，又能發揮滴丸在胃腸道中崩解快、無溶解過程、吸收快、生物利用度高的優勢。本試驗選用不同的基質制成滴丸，以淫羊藿苷為溶出指標比較了不同基質制得滴丸的體外溶出度，為選擇合適的滴丸基質提供依據。

1 儀器與試藥

SP-756紫外分光光度計(上海光譜儀器有限公司);島津AUY120型分析天平;ZRS-8G智能溶出度實驗儀(天津大學無線電廠);KQ5200DE型數控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);淫羊藿苷對照品(批號110737-200415)購于中國藥品生物制品檢定所;吳藿降壓滴丸(自制);人工胃液按中國藥典方法配制，實驗所用其他試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 吳藿降壓滴丸的制備［1］吳茱萸經提取純化，再濃縮干燥得到浸膏后，粉碎，過100目篩，得吳茱萸浸膏粉，備用;淫羊藿經40%乙醇提取過濾后，過大孔樹脂純化處理后，同法干燥，粉碎，得到淫羊藿浸膏粉。將兩種干浸膏粉按一定比例混合后分別用泊洛沙姆-188(Poloxamer-188)、聚乙二醇4000(PEG4000)、聚乙二醇6000(PEG6000)作為基質制成滴丸。

2.2 滴丸中淫羊藿苷的定量方法［2-3］

2.2.1 檢測波長的選擇 精密稱取淫羊藿苷、不同基質制備的吳藿降壓滴丸、不同基質制備的空白滴丸適量，用人工胃液稀釋，制成淫羊藿苷對照品溶液、不同基質制備的吳藿降壓滴丸供試品溶液、以及不同基質制備的空白滴丸的陰性對照品溶液。以人工胃液為空白對照，將上述對照品溶液及供試品溶液用0.45 μm的微孔濾膜過濾后，分別在200 nm～400 nm范圍內進行紫外波長掃描，結果對照品溶液和供試品溶液在270 nm處有最大吸收峰，而陰性對照品溶液在此無吸收，且供試品溶液中其他成分對淫羊藿苷的紫外吸收光譜無影響，故選擇270 nm為測定波長。

2.2.2 標準曲線的制備 精密稱取淫羊藿苷對照品10mg于量瓶中，加甲醇溶解并定容，配制成質量濃度為1 mg/mL的貯備液，再精密量取1 mL于100 mL的量瓶中，用人工胃液定容配制成10mg/L的淫羊藿苷對照品溶液，分別精密移取對照品溶液 1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 mL 于 10 mL 的量瓶中，人工胃液定容后，在2.2.1項條件下測定吸光度A值。以質量濃度(C)為橫坐標，吸光度(A)為縱坐標，線性回歸，得回歸方程:A=0.0387C+0.0221，r=0.9995，表明在1.0 ～10.0 μg/L 范圍內線性良好。

2.2.3 精密度及重現性實驗 精密吸取淫羊藿苷對照溶液6份，分別按2.2.1項紫外條件下操作測定，得RSD=1.56%(n=6)。

2.2.4 回收率實驗 分別取2.2.2項下配得的10 mg/L的淫羊藿苷對照品溶液適量，加入不同基質制備的空白滴丸所制成的供試品溶液，分別按2.2.1項紫外條件下操作測定吸光度，代入標準曲線方程求得藥物濃度，計算回收率，結果Poloxamer-188、PEG4000、PEG6000為基質制得的吳藿降壓滴丸的回收率分別為 99.9%、97.2%、95.3%，RSD 分別為1.28%、2.24%、2.14%(n=6)。

2.2.5 穩定性實驗 取淫羊藿苷對照品溶液，分別于0、1、2、4、6、8 h 于 270 nm 處測定吸光度，RSD 為 1.05%(n=6)，表明該溶液在8h內基本穩定。

2.2.6 吳藿降壓滴丸中淫羊藿苷量分析 精密稱取不同基質制備的吳藿降壓滴丸各20粒，計算平均質量，研細，稱取與平均質量相應的滴丸分別置于1000 mL量瓶中，加入人工胃液，超聲1h，冷卻至室溫后，人工胃液定容，按2.2.1項下操作，測定吸光度，重復 6次，結果 Poloxamer-188、PEG4000、PEG6000為基質制得的吳藿降壓滴丸的平均吸光度值分別為 0.211、0.252、0.264，RSD 為 0.67%、1.33%、1.37%(n=6)。此結果可分別作為不同基質制得吳藿降壓滴丸的100%溶出度A值。

2.3 滴丸的的體外溶出度測定

2.3.1溶出度測定方法 參照2010年版《中國藥典》規定，選用漿法［4］進行測定，1000 mL的人工胃液作為溶出介質，溫度(37±0.5)℃，轉速100 r/min。分別精密稱取不同基質制得的吳藿降壓滴丸，投入溶出杯中后，于 1、3、5、10、15、20、30、45、60 min分別抽取溶出介質10 mL(同時加補10 mL的空白介質)，0.45 μm 的微孔濾膜濾過，取續濾液按 2.2.1 項紫外條件下操作測定吸光度A值，重復測定6粒，分別與100%溶出度測定值A作比較，求出各時間下的絕對累積溶出度［5-6］。實驗結果見表1 ～3。

表1 Poloxamer-188為基質的滴丸絕對累積溶出度結果 (n=6)

表2 PEG4000為基質的滴丸絕對累積溶出度結果 (n=6)

表3 PEG6000為基質的滴丸絕對累積溶出度結果 (n=6)

2.3.2 溶出度測定結果 以表1，表2，表3中的平均累積溶 出度數值(±s)為縱坐標，時間t(min)為橫坐標，繪制溶出度曲線圖，結果見圖1。

圖1 不同基質制得滴丸的溶出曲線圖

2.3.3 溶出曲線的擬合 將表1，表2，表3中的數據按威爾布公式在 Excel中計算處理［7］，分別求得溶出參數 T0.5、Td、m，結果見表4。

3 討論

3.1 經預試實驗發現，在不同的溶出介質中，不同基質制得的滴丸的溶出量不同(結果見表5)，而以在人工胃液中的滴丸的溶出量最大，故本實驗選用人工胃液作為溶出基質。

3.2 從溶出曲線圖中可以看出，以Poloxamer-188為基質，滴丸的溶出量最大，可達(99.03 ±1.26)%，而以PEG4000與PEG6000為基質，滴丸的溶出量僅為(95.75±1.29)%和(91.77±2.38)%，表明以 Poloxamer-188為基質制得的滴丸的溶出效果較好。

表4 不同基質制得的滴丸溶出度參數計算結果 (n=6)

表5 不同溶出介質中滴丸的溶出量結果

3.3 通過對表4中的溶出參數T0.5、Td數據比較分析，結果表明以Poloxamer-188為基質制得滴丸的T0.5與以PEG4000、PEG6000為基質制得滴丸的T0.5相比，有顯著性差異;而以Poloxamer-188為基質制得滴丸的 Td與以PEG4000、PEG6000為基質制得滴丸的Td相比，沒有顯著性差異，說明以PEG類為基質的滴丸，其溶出速度在T0.5時間段快于以Poloxamer-188為基質的滴丸，而在Td時間段的溶出速度沒有差異。

3.4 淫羊藿苷的水溶性較差，但實驗結果表明，其在各類溶出介質中能夠很好的溶出，這可能是由于本實驗中所用的基質為表面活性劑，能夠增強淫羊藿苷在水溶性介質中的溶出效果所致。

［1］胡立志，文雅萍，桂 卉.吳藿降壓滴丸的成型工藝研究［J］.中成藥，2011，33(3):527-529.

［2］桂 卉，李 靜，胡立志.吳藿降壓滴丸與片劑的體外溶出比較研究［J］.湖南中醫藥大學學報，2010，30(9):99-101.

［3］梁漢明，郭曉玲，馮毅凡，等.淫羊藿總黃酮分散片溶出度測定方法的研究［J］.中成藥，2007，29(3):365-367.

［4］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典:2005年版一部［S］.北京:化學工業出版社，2005:附錄73.

［5］何 群，周景來，謝宗明.兩種轉速下測定麻杏石甘滴丸體外溶出度的研究［J］.中草藥，1998，21(7):455.

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［7］胡祥珍，董 藎.Excel在測定藥物制劑溶出度參數數據處理中的應用［J］.解放軍藥學學報，2003，19(1):74-76.

［8］劉明芝，周仁郁.中醫藥統計學與軟件應用［M］.北京:中國中醫藥出版社，2006:8.