養腎補血顆粒薄層色譜定性鑒別研究

許 梅，郭 敏

(重慶市江北區中醫院，重慶 400020)

養腎補血顆粒由人參、三七、制何首烏、淫羊藿、五味子、靈芝、女貞子、熟地黃[1]等10味中藥組方，是我院使用多年的醫院協定處方制劑，具有養腎補血、益氣的功效，對元氣虧損、精血不足所致的眩暈耳鳴、失眠健忘、性欲減退、腰膝痿軟、神倦乏力等癥具有較好的治療作用。該制劑原無質量標準，為了確保產品質量，筆者采用薄層色譜法對制劑中的人參、三七、制何首烏、淫羊藿進行了定性鑒別研究，現報道如下。

1 儀器與試藥

ZF－1型三用紫外分析儀(上海市顧村電光儀器廠);定量毛細管(美國Drummond公司);939薄層制板器(重慶南岸貝爾德儀器技術廠);ZFQ－85A型旋轉蒸發器(上海醫械專機廠);CQ－100型超聲波清洗機(上海躍進醫用光學器械廠);硅膠G(青島海洋化工有限公司)。羧甲基纖維素納(上海化學試劑采購站);人參皂苷Rg1對照品(批號為0703－200016)，人參皂苷 Rb1對照品(批號為0704－200013)，三七皂苷 R1對照品(批號為110745－200312)，淫羊藿苷對照品(批號為0703－200111)，何首烏對照藥材(批號為0934－9704)，均由中國藥品生物制品檢定所提供;養腎補血顆粒(本院制劑室生產);其他化學試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 人參[2]、三七[3]薄層色譜鑒別

取本品內容物10 g，研細，加三氯甲烷50 mL，置水浴上加熱回流30 min，棄去三氯甲烷液，藥渣揮干溶劑，加甲醇50 mL，置水浴上加熱回流2 h，濾過，濾液置水溶上蒸干，殘渣加水10 mL使溶解，用水飽合的正丁醇振搖提取3次(20，20，10 mL)，合并正丁醇液，用水洗滌2次，每次50 mL，分取正丁醇液置水浴上蒸干，殘渣加甲醇2 mL使溶解，取上清液作為供試品溶液。取不含人參、三七的陰性樣品，同法制備陰性對照品溶液。取人參皂苷Rb1、人參皂苷Rg1、三七皂苷R1對照品，加甲醇制成每1 mL各含2 mg的混合溶液，作為對照品溶液。照2005年版《中國藥典(一部)》附錄ⅥB薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液和陰性對照品溶液各10 μL、對照品溶液5 μL，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲烷－乙酸乙酯－甲醇－水(15∶40∶25∶10)10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃下加熱至斑點顯色清晰。供試品溶液色譜中，在與對照品溶液色譜相應位置上顯相同的3個紫紅色斑點，陰性對照品溶液色譜中則無此斑點(圖1 A)。

2.2 淫羊藿[4]薄層色譜鑒別

取本品內容物10 g，研細，加乙醇40 mL，超聲處理30 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇2 mL使溶解，作為供試品溶液。取不含淫羊藿的陰性樣品，同法制備陰性對照品溶液。取淫羊藿苷對照品適量，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對照品溶液。照2005年版《中國藥典(一部)》附錄ⅥB薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液和陰性對照品溶液各10 μL、對照藥品溶液2 μL，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯－丁酮－甲酸－水(10∶1∶1∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以三氯化鋁試液，在105℃加熱約2～5 min，置紫外光燈(365 nm)下檢視。供試品溶液色譜中，在與對照品溶液色譜相應位置上顯相同顏色的熒光斑點，陰性對照品溶液色譜中則無此斑點(圖 1 B)。

2.3 制何首烏[5]薄層色譜鑒別

取本品內容物8 g，研細，加甲醇30 mL，超聲處理30 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加稀鹽酸10 mL使溶解，置水浴上加熱30 min，放冷，用乙醚振搖提取3次，每次15 mL，合并乙醚液，揮干，殘渣加乙醚1 mL使溶解，作為供試品溶液。取不含制何首烏的陰性樣品，同法制備陰性對照品溶液。取何首烏對照藥材1 g，同法制成對照藥材溶液。照2005年版《中華人民共和國藥典(一部)》附錄ⅥB薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液和陰性對照品溶液各10 μL、對照藥材溶液5 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(30～60℃)－甲酸乙酯－甲酸(15∶5∶1)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干。在105℃加熱約5 min，置紫外光燈(365 nm)下檢視。供試品溶液色譜中，在與對照藥材溶液色譜相應位置上顯相同顏色的熒光斑點，陰性對照品溶液色譜中則無此斑點(圖1 C)。

圖1 薄層色譜圖

3 討論

本品組方較復雜，干擾因素較多。筆者經反復試驗，選用多種展開系統和純化方法，以及樣品的不同取樣量，摸索出處方中人參、三七、制何首烏、淫羊藿4味藥材的薄層色譜定性鑒別方法。方法分離度高、重現性好、專屬性強，可有效控制養腎補血顆粒的質量。

筆者對方中五味子、女貞子和靈芝藥材成分也進行了薄層色譜定性鑒別研究。五味子[6]中主要成分為五味子甲素、五味子乙素和五味子醇甲，樣品經提取分離、薄層展開后，層析斑點不清晰、顏色較淺。女貞子[7]中主要成分為齊墩果酸，樣品經提取分離后，點于硅膠G薄層板上，斑點顏色較淺，且拖尾現象較嚴重。靈芝[8]主要成分為多糖類，以靈芝藥材作為對照，經點樣展開后，在365 nm紫外光燈下觀察，陰性對照品溶液色譜中含有相同的熒光斑點，因此沒有將上述方法列入質量標準中。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[M].北京:化學工業出版社，2005:7，10，31，44，123，229，83，130.

[2]王隸書，程東巖，朱 杰.薄層掃描法測定仙靈雙保膠囊中人參皂苷Rg1及人參皂苷 Rb1之和的含量[J].中國藥師，2003，6(3):155－156.

[3]潘翠華.用TLC法對愈傷靈膠囊中三七進行鑒別[J].中國醫學雜志，2007，5(3):123－124.

[4]阮桂平.仙珍骨寶膠囊中淫羊藿苷薄層色譜鑒別方法的篩選[J].時珍國醫國藥，2006，17(6):557.

[5]陳志娟，高 靜，趙 楊，等.降脂沖劑中何首烏與決明子的薄層鑒別[J]. 天津中醫藥，2008，25(2):159 －160.

[6]于忠興，范正達，唐風雷.反相高效液相色譜法測定金虎膠囊中五味子甲素的含量[J].傳染病藥學，2002，12(2):10－11.

[7]羅朵生，郭 姣，何 偉，等.高效液相色譜法與薄層掃描法測定女貞子中齊墩果酸含量的比較[J].時珍國醫國藥，2008，19(6):15－16.

[8]尹松鶴，趙玉梅，劉權友.靈芝顆粒的薄層色譜鑒別[J].中華實用醫藥雜志，2006，6(2):13.