降喘固本丸的鑒別研究

王 靜，趙 興，陶福芳，陳 萍，力 荔

(1.陜西中醫學院，陜西 咸陽 712046; 2.陜西省新藥審評中心，陜西 西安 710065; 3.陜西省中醫藥研究院，陜西 西安 710003)

降喘固本丸是陜西省中醫醫院的院內制劑，由黨參、黃芪、枳殼、五味子、紫蘇子、浙貝母等中藥配制而成，具有補肺益腎、健脾化痰、降氣平喘功效，用于慢性阻塞型肺疾病的治療。為了有效控制本品的質量，筆者采用薄層色譜法對方中黨參、黃芪、枳殼進行定性鑒別研究，并對方中的紫蘇子、五味子、浙貝母進行了顯微鑒別研究。

1 儀器與試藥

KQ－250DE型數控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);PB1502－S型電子天平(美國梅特勒－托利多公司);ZF－C型三用紫外分析儀(上?？岛坦怆妰x器有限公司);電熱板(德國labtech公司);leica牌DM750型電子顯微鏡(西安中顯光電科技有限公司)。黨參對照藥材(批號為20080710)、黃芪甲苷對照品(批號為0781－9908)、柚皮苷對照品(批號為110722－200309)均由中國藥品生物制品檢定所提供。硅膠G(青島海洋化工有限公司);中性氧化鋁(國藥集團化學股份有限公司);甲醇、石油醚、乙酸乙酯等試劑均為分析純。降喘固本丸(由陜西省中醫醫院制劑中心提供，批號為 20100326，20100612，20100614)。

2 質量控制

2.1 性狀

本品為褐色水丸，味微苦。

2.2 顯微鑒別[1－3]

將本品粉碎成細粉，按[2010年版《中國藥典(一部)》附錄ⅡC]的顯微鑒別法項下要求切片。結果顯微特征依次為南五味子、浙貝母和紫蘇子。種皮內層石細胞呈淡黃色或淡黃棕色，表面觀呈多角形，壁較厚，胞腔含深棕色物。淀粉粒卵圓形，直徑35～48 μm，臍點點狀、八字狀或馬蹄狀，位于較小端，層紋細密。內果皮(異型)石細胞成片，黃色或棕黃色;頂面觀多角形，界限不分明，胞腔呈心狀;表面觀類橢圓形，壁具細致的雕花鉤紋狀增厚。石細胞分枝狀，壁厚，層紋明顯(見圖1)。

2.3 薄層色譜鑒別

2.3.1 黃芪

取本品20 g，研細，加甲醇80 mL，加熱回流1 h，濾過，蒸干甲醇，殘渣加水40 mL使溶解，用水飽和的正丁醇萃取2次，每次20 mL，合并正丁醇溶液，再用氨試液洗2次，每次20 mL，分取正丁醇溶液，加于中性氧化鋁柱(100～120目，5 g，內徑10～15 mm)上，用40%甲醇100 mL洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇1 mL使溶解，作為供試品溶液。取缺黃芪陰性樣品，同法制成陰性對照品溶液。另取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法[2010年版《中國藥典(一部)》ⅥB]試驗，分別吸取上述3種溶液各5 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿－甲醇－水(13∶7∶2)的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品溶液色譜中，在與對照品溶液色譜相應的位置上，日光下顯相同的棕褐色斑點，紫外燈(365 nm)下顯相同的橙黃色熒光斑點，且陰性無干擾。見圖2。

圖1 降喘固本丸的顯微鑒別圖

圖2 黃芪的薄層色譜圖

2.3.2 黨參

取本品粉末4 g，加甲醇50 mL，超聲處理30 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加水15 mL使溶解，通過D101型大孔樹脂柱(內徑為1.5 cm，柱高為 10 cm，4 g)，加水 20 mL 洗脫，棄去水液，再用 50%乙醇50 mL洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇1 mL使溶解，作為供試品溶液。按處方比例，取不含黨參的藥材，照本品制備工藝和供試品溶液的制備方法制成陰性對照品溶液。取黨參對照藥材0.5 g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法[2010年版《中國藥典(一部)》ⅥB]試驗，分別吸取上述3種溶液各5 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇－冰醋酸－水(7∶1∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在80℃加熱至斑點顯色清晰，分別置日光和紫外燈(365 nm)下檢視。供試品溶液色譜中，在與對照品溶液色譜相應位置上顯相同顏色的斑點或熒光斑點，且陰性無干擾。見圖3。

2.3.3 枳殼[4－5]

取本品粉末4 g，加石油醚(30～60℃)50 mL回流提取1 h，棄去石油醚(脫酯除雜)，藥渣揮干，加甲醇50 mL，再加熱回流2 h，濾過，提取液蒸干，殘渣加70%乙醇(調pH至8)4 mL使溶解，作為供試品溶液。取缺枳殼陰性樣品2 g，同法制成陰性對照品溶液。另取柚皮苷對照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法[2010年版《中國藥典(一部)》ⅥB]試驗，分別吸取上述3種溶液各5 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿－甲醇－水(13∶6∶2)的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1%三氯化鋁乙醇溶液，置紫外燈(365 nm)下檢視。供試品溶液色譜中，在與對照品溶液色譜相應位置上顯相同顏色的熒光斑點，且雙陰性無干擾。見圖4。

2.3.4 白術

取本品粉末4 g，加正己烷30 mL，超聲處理30 min，濾過，濾液濃縮至2 mL作為供試品溶液。按處方比例，取不含白術的藥材，照本品制備工藝和供試品溶液的制備方法制成陰性對照品溶液。另取白術對照藥材0.5 g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法[2010年版《中國藥典(一部)》附錄ⅥB]試驗，分別吸取上述3種溶液各10μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(60～90℃)－乙酸乙酯(50∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，加熱至斑點顯色清晰。結果供試品溶液色譜中，在與對照藥材溶液色譜相應位置上顯相同顏色的斑點，但陰性對照有干擾，故不列入標準正文中。見圖5。

圖3 黨參的薄層色譜圖

圖4 枳殼的薄層色譜圖

圖5 白術的薄層色譜圖

3 討論

方中因有部分藥材以生藥原粉入藥，故可采用顯微鑒別方法，選擇專屬性強、易于觀察的藥材顯微鑒別點作為質量控制標準。

在黃芪薄層色譜鑒別的供試品處理中，未用氨試液萃取時，雜質多，斑點分離不清晰;加用氨試液萃取后，斑點分離清晰，方法靈敏度高。薄層色譜法鑒別本品中黨參、黃芪、枳殼的結果表明，供試品與對照品(對照藥材)所顯斑點一致，陰性均無干擾，該法專屬性強，且多次重復效果較好，可作為該制劑的質量控制方法。

本制劑為醫院制劑，由于經費有限和時間有限，暫時沒有做含量測定項目，還有待進一步研究。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[M].北京:化學工業出版社，2010:264－265，283－284，355－356，229－230.

[2]徐國鈞.中藥材粉末顯微鑒定[M].北京:人民衛生出版社，1986:282，486，420.

[3]張貴君.常用中藥鑒定大全[M].哈爾濱:黑龍江科學技術出版社，1995:442，825.

[4]宋小妹，唐志書.中藥化學成分提取分離與制備[M].北京:人民衛生出版社，2004:412－413，444－448.

[5]周嘉琳，王永山.中藥配方顆粒薄層色譜彩色圖集[M].南京:江蘇科學技術出版社，2004:120，134－135.