血清IL-10與缺血性腦卒中早期進展的關系

王曉霞 楊巧蓮 黨連生 (包頭市第四醫院，內蒙古 包頭 04030)

進展期缺血性腦卒中在缺血性腦血管病中的發生率較高，約為25% ～40%〔1〕，與不良預后有關，可增加病死率和遠期致殘率，尋找與其發生有關的早期預測因素和潛在的病理機制，對于探討干預措施有重要的臨床意義。本文探討IL-10在進展期腦卒中發生、發展的作用及相互關系，以期從分子水平對缺血性腦卒中的進展作出預測。

1 資料與方法

1.1 病例選擇 選擇2006年2月至2009年5月我院住院病人，首次發病24 h內的腦卒中患者500例(男273例，女227例)，年齡43～92歲，平均(63.9±12.8)歲。診斷符合以下標準:①符合中華醫學會第四屆全國腦血管病會議制定的診斷標準〔2〕，②經頭顱CT或MRI掃描證實。排除以下情況:①近期有感染(發病前2 w)。②伴發嚴重的心、肝、腎疾病。③伴自身免疫性疾病或腫瘤。④腦卒中后出血或腦出血。⑤血液系統疾病。根據SNOBS對每1例患者進行評估，選出進展期腦卒中60例，男35例，女25例，年齡43～92歲，平均(65.45±10.25)歲。非進展期腦卒中60例，男37例，女23例，年齡45～83歲，平均(61.32±13.69)歲。兩組按年齡、性別、血壓、血糖匹配，無顯著性差異，具有可比性(P＞0.05)。

1.2 對照組 選擇同期無心、肝、腎疾病的非患該病的同期住院患者30例，男19例，女11例，年齡45～78歲，平均(60.60±10.59)歲。

1.3 進展期腦卒中診斷標準 于發病6 h～7 d臨床癥狀加重，采用臨床表現來自SSS評分系統的SNOBS進行神經功能缺損評分。符合下列條件之一:①在意識水平、上下肢運動、眼球運動中任何一種≥2分的加重，②在言語功能中有≥3分的加重，③ SSS評分下降≥9分，④SSS評分較入院時下降18%。排除梗死后出血、其他血管發生新的梗死，或因嚴重的感染、高熱、心功能不全所致的病情進展即診斷為PIS。

1.4 血液標本的采集和處理 受檢者分別在發病第1、3、7天清晨空腹采靜脈血4 ml，在室溫下靜置2 h后，置離心機3 000 r/min離心5 min，用加樣器取上清液置于干燥試管內，封口放于－30℃低溫冰箱中保存待測。

1.5 試劑 IL-10采用ELISA法測定，檢測試劑盒由晶美生物工程公司提供。

1.6 統計方法 采用SPSS11.0軟件包進行統計處理，各組數據用±s表示，進行方差齊性檢驗，所用統計學方法有單因素方差分析，兩樣本t檢驗和線性相關分析。

2 結果

進展期腦卒中、非進展期腦卒中組與對照組各時間點血清IL-10水平比較，病程24 h，對照組、進展期腦卒中組、非進展期腦卒中組三組相比，血清 IL-10水平有統計學差異(F=17.936，P＜0.05)。與對照組、非進展期腦卒中組相比，進展性腦卒中組血清IL-10水平升高(P＜0.05)。與正常組比較，非進展期腦卒中組血清IL-10水平有升高趨勢，但沒有統計學意義。

病程3 d，對照組、進展期腦卒中組、非進展進展期腦卒中組三組相比，血清IL-10水平有統計學差異(F=28.983，P＜0.05)。在病程3 d進展期腦卒中組、非進展期腦卒中組與對照組相比血清IL-10濃度升高(P＜0.05)。進展期腦卒中組血清IL-10濃度明顯高于非進展期腦卒中組(P＜0.05)。

病程7 d，對照組、進展期腦卒中組、非進展期腦卒中組三組相比，血清IL-10水平有統計學差異(F=12.534，P＜0.05)。在病程7 d進展期腦卒中組、非進展期腦卒中組與對照組相比，血清IL-10濃度升高(P＜0.05)。病程7 d進展期缺血性腦卒中組血清IL-10濃度高于非進展期缺血性腦卒中組，但無統計學意義(P＞0.05)。見表1。

表1 各組不同時間點血清IL-10水平比較(±s，mmol/L)

表1 各組不同時間點血清IL-10水平比較(±s，mmol/L)

與對照組比較:1)P＜0.05;與非進展期腦卒中組比較:2)P＜0.05

24 h 3 d 7 d進展期腦卒中組 60 126.83±23.561)2) 133.73±22.531)2)125.11±31.631)分組 n非進展期腦卒中組60 108.39±19.26 111.42±19.631)2)122.05±21.961)對照組30 102.29±18.7 102.29±18.77 102.29±18.77

3 討論

缺血性腦損傷的機制除了能量代謝、興奮性氨基酸、離子通道、NO、熱休克蛋白基因表達等因素外，細胞因子在其中也占有重要作用〔3〕。研究發現，急性缺血性腦卒中(ACIS)初期，在炎性細胞反應出現之前出現炎性細胞因子的表達，如白細胞介素、腫瘤因子，可介導缺血損傷時的炎性反應。IL-10是一種多效性的生物因子，具有免疫抑制與免疫刺激的雙重作用。由于最早發現它具有抑制Th1細胞分泌細胞因子的作用，故又稱為細胞因子合成抑制因子。它具有廣泛的生物學活性，是一種與腦缺血損傷、損傷修復過程相關的重要抗炎細胞因子，具有神經保護和神經營養作用〔4〕。

本研究發現，進展性缺血性腦卒中早期血清IL-10水平在病程24 h即升高，至病程3 d時達高峰，在病程7 d已下降，但仍高于正常對照組(P＜0.05)。非進展期腦卒中與正常組相比，血清IL-10水平在病程24 h即升高，病程7 d時達到高峰(P＜0.05)。這一結果與有些學者們的研究結果不一致。Perini等〔4〕觀察到缺血性腦卒中患者血中IL-10水平較健康人明顯減低，但沒有發現IL-10水平與臨床癥狀之間存在關聯;認為低IL-10水平不是缺血應激導致，而是在發病前就存在的一種狀態，提示血中低水平的IL-10是腦卒中的一個危險因素。Vila等〔5〕認為外周血IL-10水平與急性缺血腦卒中病人早期臨床病情輕重呈負相關。另一些學者研究結果顯示:在急性腦梗死發生后，血中IL-10的含量從發病第1天開始就顯著升高，于第3天達高峰，隨后逐漸下降，但持續到第14天仍顯著高于對照組，呈現一個急速升高又緩慢下降的動態變化過程〔6～8〕，提示IL-10可能參與了腦卒中后的炎癥反應。且發病早期神經損傷越重IL-10水平越高〔6〕。我們的研究結果與后者一致。提示在缺血損傷早期，損傷越重IL-10水平越高。

本研究發現在病程24 h、3、7 d時進展期腦卒中組IL-10水平均高于正常對照組。特別在病程24 h、3 d進展期腦卒中組IL-10水平均明顯高于正常對照組和非進展期腦卒中組(P＜0.05)。這一結果提示，很可能在IL-10血清濃度達到某一臨界狀態后其免疫刺激作用激活。這一過程的激活可能依賴于人體的功能單位-細胞的信號轉導通路。細胞信號轉導通路縱橫交錯，某一條信號通路激活后，這條通路級聯反應的各級產物又是其他通路激活的激酶。迅速大量的炎癥因子與抗炎因子產生造成了損傷和抗損傷的激烈對抗，使機體遭受急性損害，對抗程度越激烈損傷程度越重。

在動物實驗方面，Zhai等〔9〕的研究結果顯示:大鼠MCAO后6 h就可檢測到IL-10 mRNA的表達。陳榮華等〔10〕的研究發現:缺血組腦組織IL-10含量在MCAO后3 h處于較低水平，6 h達最低，與假手術組比較變化顯著，隨后逐漸升高;血清中IL-10含量在MCAO后3 h最低，隨后逐漸升高。臨床患者發病3～6 h住院治療者極少，取得3～6 h病程血標本就更為不易。因此沒有關于急性腦梗死3～6 h血清IL-10水平的相關研究。國外學者Vila等〔3〕研究發現超早期(3～24 h)進展期腦卒中組與非進展期腦卒中組IL-10水平均高于正常組，但進展期腦卒中組IL-10濃度低于非進展期腦卒中組(P＜0.05)。國內有研究報道，向腦缺血后側腦室注射IL-10可明顯縮小梗死灶面積〔11〕。這些研究提示，IL-10是保護性的抗炎因子。結合我們的實驗結果分析，由于IL-10具有免疫的雙向調節作用，而人體是復雜巨系統〔12〕，細胞轉導通路縱橫成網，在腦缺血損傷發生后，有多種多效型活性物質的產生，形成損傷與抗損傷的網絡，置身于其間的IL-10在人體這個復雜系統中所起的作用不同于簡單的體外實驗。這也提示我們，研究人體的科學僅僅運用建立在經典物理學基礎上的實驗室方法是有很大局限性的。建立在現代物理學基礎上的系統自主組織理論，作為新的方法論將深刻地影響人類的思維并指導我們的實踐。

1 Vila N，Castillo J，Davalos A，et al.Proinflammatory cytokines and early neurological worsing in ischemic stroke〔J〕.Stroke，2003;31(10):2325-9.

2 中華醫學會神經科學會.各類腦血管疾病診斷要點〔J〕.中華神經科雜志，1996;29(6):379-38.

3 楊期東.神經病學〔M〕.北京:人民衛生出版社，2004:131.

4 Perini F，Morra M，Alecci M.Temporal profile of serum anti-inflammatory and pro-inflammatory interleukins in acute ischemic stroke patients〔J〕.Neurol Sci，2001;22(2):289-96.

5 Vila N，Castillo J，Davalos A，et al.Levels of anti-inflammatory cytokines and neurological worsening in acute ischemic stroke〔J〕.Stroke，2003;34:671-5.

6 趙海濤，苑司臣，劉青蕊.缺血性腦卒中急性期IL-6、IL-8、IL-10變化的觀察〔J〕.中國實用神經疾病雜志，2008;11(2):35.

7 趙玉玲，馮衛東.急性腦梗死患者血清白細胞介素-10含量的變化及意義〔J〕.中國腦血管病雜志，2005;2(9):414-5.

8 Dziedzic T，Bartus S，Klimkowicz A，et al.Intracerebral hemorrhage triggers interleukin-6 and interleukin-10 release in blood〔J〕.Stroke，2002;33(9):2334-5.

9 Zhai QH，Futrell N，Chen FJ.Gene expression of IL-10 in relationship to TNF-alpha，IL-1 beta and IL-2 in the rat brain following middle cerebral arteryocclusion〔J〕.J Neurol Sci，1997;152(1):119-24.

10 陳榮華，劉 楠，鄭 安，等.局灶性腦缺血大鼠白細胞介索10的變化〔J〕.中國動脈硬化雜志，2003;11:622-4.

11 劉 楠，陳融化，鄭 安，等.白細胞介素-10對大鼠腦缺血的保護作用〔J〕.中國腦血管病雜志，2005;40(13):961-5.

12 錢學森.創建系統學〔M〕.太原:山西科學技術出版社，2001:22-6.