血清IL-10與缺血性腦卒中早期進展的關(guān)系

王曉霞 楊巧蓮 黨連生 (包頭市第四醫(yī)院，內(nèi)蒙古 包頭 04030)

進展期缺血性腦卒中在缺血性腦血管病中的發(fā)生率較高，約為25% ～40%〔1〕，與不良預后有關(guān)，可增加病死率和遠期致殘率，尋找與其發(fā)生有關(guān)的早期預測因素和潛在的病理機制，對于探討干預措施有重要的臨床意義。本文探討IL-10在進展期腦卒中發(fā)生、發(fā)展的作用及相互關(guān)系，以期從分子水平對缺血性腦卒中的進展作出預測。

1 資料與方法

1.1 病例選擇 選擇2006年2月至2009年5月我院住院病人，首次發(fā)病24 h內(nèi)的腦卒中患者500例(男273例，女227例)，年齡43～92歲，平均(63.9±12.8)歲。診斷符合以下標準:①符合中華醫(yī)學會第四屆全國腦血管病會議制定的診斷標準〔2〕，②經(jīng)頭顱CT或MRI掃描證實。排除以下情況:①近期有感染(發(fā)病前2 w)。②伴發(fā)嚴重的心、肝、腎疾病。③伴自身免疫性疾病或腫瘤。④腦卒中后出血或腦出血。⑤血液系統(tǒng)疾病。根據(jù)SNOBS對每1例患者進行評估，選出進展期腦卒中60例，男35例，女25例，年齡43～92歲，平均(65.45±10.25)歲。非進展期腦卒中60例，男37例，女23例，年齡45～83歲，平均(61.32±13.69)歲。兩組按年齡、性別、血壓、血糖匹配，無顯著性差異，具有可比性(P＞0.05)。

1.2 對照組 選擇同期無心、肝、腎疾病的非患該病的同期住院患者30例，男19例，女11例，年齡45～78歲，平均(60.60±10.59)歲。

1.3 進展期腦卒中診斷標準 于發(fā)病6 h～7 d臨床癥狀加重，采用臨床表現(xiàn)來自SSS評分系統(tǒng)的SNOBS進行神經(jīng)功能缺損評分。符合下列條件之一:①在意識水平、上下肢運動、眼球運動中任何一種≥2分的加重，②在言語功能中有≥3分的加重，③ SSS評分下降≥9分，④SSS評分較入院時下降18%。排除梗死后出血、其他血管發(fā)生新的梗死，或因嚴重的感染、高熱、心功能不全所致的病情進展即診斷為PIS。

1.4 血液標本的采集和處理 受檢者分別在發(fā)病第1、3、7天清晨空腹采靜脈血4 ml，在室溫下靜置2 h后，置離心機3 000 r/min離心5 min，用加樣器取上清液置于干燥試管內(nèi)，封口放于－30℃低溫冰箱中保存待測。

1.5 試劑 IL-10采用ELISA法測定，檢測試劑盒由晶美生物工程公司提供。

1.6 統(tǒng)計方法 采用SPSS11.0軟件包進行統(tǒng)計處理，各組數(shù)據(jù)用±s表示，進行方差齊性檢驗，所用統(tǒng)計學方法有單因素方差分析，兩樣本t檢驗和線性相關(guān)分析。

2 結(jié)果

進展期腦卒中、非進展期腦卒中組與對照組各時間點血清IL-10水平比較，病程24 h，對照組、進展期腦卒中組、非進展期腦卒中組三組相比，血清 IL-10水平有統(tǒng)計學差異(F=17.936，P＜0.05)。與對照組、非進展期腦卒中組相比，進展性腦卒中組血清IL-10水平升高(P＜0.05)。與正常組比較，非進展期腦卒中組血清IL-10水平有升高趨勢，但沒有統(tǒng)計學意義。

病程3 d，對照組、進展期腦卒中組、非進展進展期腦卒中組三組相比，血清IL-10水平有統(tǒng)計學差異(F=28.983，P＜0.05)。在病程3 d進展期腦卒中組、非進展期腦卒中組與對照組相比血清IL-10濃度升高(P＜0.05)。進展期腦卒中組血清IL-10濃度明顯高于非進展期腦卒中組(P＜0.05)。

病程7 d，對照組、進展期腦卒中組、非進展期腦卒中組三組相比，血清IL-10水平有統(tǒng)計學差異(F=12.534，P＜0.05)。在病程7 d進展期腦卒中組、非進展期腦卒中組與對照組相比，血清IL-10濃度升高(P＜0.05)。病程7 d進展期缺血性腦卒中組血清IL-10濃度高于非進展期缺血性腦卒中組，但無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。見表1。

表1 各組不同時間點血清IL-10水平比較(±s，mmol/L)

表1 各組不同時間點血清IL-10水平比較(±s，mmol/L)

與對照組比較:1)P＜0.05;與非進展期腦卒中組比較:2)P＜0.05

24 h 3 d 7 d進展期腦卒中組 60 126.83±23.561)2) 133.73±22.531)2)125.11±31.631)分組 n非進展期腦卒中組60 108.39±19.26 111.42±19.631)2)122.05±21.961)對照組30 102.29±18.7 102.29±18.77 102.29±18.77

3 討論

缺血性腦損傷的機制除了能量代謝、興奮性氨基酸、離子通道、NO、熱休克蛋白基因表達等因素外，細胞因子在其中也占有重要作用〔3〕。研究發(fā)現(xiàn)，急性缺血性腦卒中(ACIS)初期，在炎性細胞反應出現(xiàn)之前出現(xiàn)炎性細胞因子的表達，如白細胞介素、腫瘤因子，可介導缺血損傷時的炎性反應。IL-10是一種多效性的生物因子，具有免疫抑制與免疫刺激的雙重作用。由于最早發(fā)現(xiàn)它具有抑制Th1細胞分泌細胞因子的作用，故又稱為細胞因子合成抑制因子。它具有廣泛的生物學活性，是一種與腦缺血損傷、損傷修復過程相關(guān)的重要抗炎細胞因子，具有神經(jīng)保護和神經(jīng)營養(yǎng)作用〔4〕。

本研究發(fā)現(xiàn)，進展性缺血性腦卒中早期血清IL-10水平在病程24 h即升高，至病程3 d時達高峰，在病程7 d已下降，但仍高于正常對照組(P＜0.05)。非進展期腦卒中與正常組相比，血清IL-10水平在病程24 h即升高，病程7 d時達到高峰(P＜0.05)。這一結(jié)果與有些學者們的研究結(jié)果不一致。Perini等〔4〕觀察到缺血性腦卒中患者血中IL-10水平較健康人明顯減低，但沒有發(fā)現(xiàn)IL-10水平與臨床癥狀之間存在關(guān)聯(lián);認為低IL-10水平不是缺血應激導致，而是在發(fā)病前就存在的一種狀態(tài)，提示血中低水平的IL-10是腦卒中的一個危險因素。Vila等〔5〕認為外周血IL-10水平與急性缺血腦卒中病人早期臨床病情輕重呈負相關(guān)。另一些學者研究結(jié)果顯示:在急性腦梗死發(fā)生后，血中IL-10的含量從發(fā)病第1天開始就顯著升高，于第3天達高峰，隨后逐漸下降，但持續(xù)到第14天仍顯著高于對照組，呈現(xiàn)一個急速升高又緩慢下降的動態(tài)變化過程〔6～8〕，提示IL-10可能參與了腦卒中后的炎癥反應。且發(fā)病早期神經(jīng)損傷越重IL-10水平越高〔6〕。我們的研究結(jié)果與后者一致。提示在缺血損傷早期，損傷越重IL-10水平越高。

本研究發(fā)現(xiàn)在病程24 h、3、7 d時進展期腦卒中組IL-10水平均高于正常對照組。特別在病程24 h、3 d進展期腦卒中組IL-10水平均明顯高于正常對照組和非進展期腦卒中組(P＜0.05)。這一結(jié)果提示，很可能在IL-10血清濃度達到某一臨界狀態(tài)后其免疫刺激作用激活。這一過程的激活可能依賴于人體的功能單位-細胞的信號轉(zhuǎn)導通路。細胞信號轉(zhuǎn)導通路縱橫交錯，某一條信號通路激活后，這條通路級聯(lián)反應的各級產(chǎn)物又是其他通路激活的激酶。迅速大量的炎癥因子與抗炎因子產(chǎn)生造成了損傷和抗損傷的激烈對抗，使機體遭受急性損害，對抗程度越激烈損傷程度越重。

在動物實驗方面，Zhai等〔9〕的研究結(jié)果顯示:大鼠MCAO后6 h就可檢測到IL-10 mRNA的表達。陳榮華等〔10〕的研究發(fā)現(xiàn):缺血組腦組織IL-10含量在MCAO后3 h處于較低水平，6 h達最低，與假手術(shù)組比較變化顯著，隨后逐漸升高;血清中IL-10含量在MCAO后3 h最低，隨后逐漸升高。臨床患者發(fā)病3～6 h住院治療者極少，取得3～6 h病程血標本就更為不易。因此沒有關(guān)于急性腦梗死3～6 h血清IL-10水平的相關(guān)研究。國外學者Vila等〔3〕研究發(fā)現(xiàn)超早期(3～24 h)進展期腦卒中組與非進展期腦卒中組IL-10水平均高于正常組，但進展期腦卒中組IL-10濃度低于非進展期腦卒中組(P＜0.05)。國內(nèi)有研究報道，向腦缺血后側(cè)腦室注射IL-10可明顯縮小梗死灶面積〔11〕。這些研究提示，IL-10是保護性的抗炎因子。結(jié)合我們的實驗結(jié)果分析，由于IL-10具有免疫的雙向調(diào)節(jié)作用，而人體是復雜巨系統(tǒng)〔12〕，細胞轉(zhuǎn)導通路縱橫成網(wǎng)，在腦缺血損傷發(fā)生后，有多種多效型活性物質(zhì)的產(chǎn)生，形成損傷與抗損傷的網(wǎng)絡，置身于其間的IL-10在人體這個復雜系統(tǒng)中所起的作用不同于簡單的體外實驗。這也提示我們，研究人體的科學僅僅運用建立在經(jīng)典物理學基礎上的實驗室方法是有很大局限性的。建立在現(xiàn)代物理學基礎上的系統(tǒng)自主組織理論，作為新的方法論將深刻地影響人類的思維并指導我們的實踐。

1 Vila N，Castillo J，Davalos A，et al.Proinflammatory cytokines and early neurological worsing in ischemic stroke〔J〕.Stroke，2003;31(10):2325-9.

2 中華醫(yī)學會神經(jīng)科學會.各類腦血管疾病診斷要點〔J〕.中華神經(jīng)科雜志，1996;29(6):379-38.

3 楊期東.神經(jīng)病學〔M〕.北京:人民衛(wèi)生出版社，2004:131.

4 Perini F，Morra M，Alecci M.Temporal profile of serum anti-inflammatory and pro-inflammatory interleukins in acute ischemic stroke patients〔J〕.Neurol Sci，2001;22(2):289-96.

5 Vila N，Castillo J，Davalos A，et al.Levels of anti-inflammatory cytokines and neurological worsening in acute ischemic stroke〔J〕.Stroke，2003;34:671-5.

6 趙海濤，苑司臣，劉青蕊.缺血性腦卒中急性期IL-6、IL-8、IL-10變化的觀察〔J〕.中國實用神經(jīng)疾病雜志，2008;11(2):35.

7 趙玉玲，馮衛(wèi)東.急性腦梗死患者血清白細胞介素-10含量的變化及意義〔J〕.中國腦血管病雜志，2005;2(9):414-5.

8 Dziedzic T，Bartus S，Klimkowicz A，et al.Intracerebral hemorrhage triggers interleukin-6 and interleukin-10 release in blood〔J〕.Stroke，2002;33(9):2334-5.

9 Zhai QH，F(xiàn)utrell N，Chen FJ.Gene expression of IL-10 in relationship to TNF-alpha，IL-1 beta and IL-2 in the rat brain following middle cerebral arteryocclusion〔J〕.J Neurol Sci，1997;152(1):119-24.

10 陳榮華，劉 楠，鄭 安，等.局灶性腦缺血大鼠白細胞介索10的變化〔J〕.中國動脈硬化雜志，2003;11:622-4.

11 劉 楠，陳融化，鄭 安，等.白細胞介素-10對大鼠腦缺血的保護作用〔J〕.中國腦血管病雜志，2005;40(13):961-5.

12 錢學森.創(chuàng)建系統(tǒng)學〔M〕.太原:山西科學技術(shù)出版社，2001:22-6.