血栓心脈寧片對(duì)大鼠腸系膜微循環(huán)障礙的改善作用

李 敏 趙學(xué)忠 于 水 (吉林大學(xué)第一醫(yī)院心血管內(nèi)科，吉林 長(zhǎng)春 130021)張曉天 王 放 (吉林大學(xué)白求恩基礎(chǔ)部病原微生物實(shí)驗(yàn)室)

微循環(huán)直接參與組織、細(xì)胞的物質(zhì)、信息、能量傳遞。微循環(huán)障礙表現(xiàn)為血液不暢，微血管痙攣，微血流黏度增高，紅細(xì)胞聚集，血栓形成或有栓塞。血瘀證是血脈瘀滯不暢，氣滯血瘀所致的各種有關(guān)病證。由此可見(jiàn)，微循環(huán)障礙和血瘀證有著相似的病理改變，微循環(huán)觀測(cè)可作為血瘀證診斷的一項(xiàng)重要指標(biāo)〔1〕。血栓心脈寧片用于治療冠心病、腦梗死等缺血性心腦血管疾病取得了一定的療效。本文觀察血栓心脈寧片對(duì)實(shí)驗(yàn)性微循環(huán)障礙的改善作用，進(jìn)一步證明血栓心脈寧片抗血栓、抗凝活性，并探討其機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動(dòng)物 清潔級(jí) Wistar大鼠，體重180～210 g，雌雄各半，由吉林大學(xué)動(dòng)物室提供。動(dòng)物合格證號(hào) SCXK-(吉)-2007-0003。

1.1.2 藥品與試劑 血栓心脈寧片(吉林華康藥業(yè)有限公司，批號(hào):110601)。步長(zhǎng)腦心通:(陜西步長(zhǎng)制藥有限公司，批號(hào):110552)。高分子右旋糖酐(葡聚糖T500，Pharmacia法碼西亞試劑公司，批號(hào):17-0320-01)。臺(tái)式液試劑均為市售。

1.1.3 儀器 HW-ZOOO型恒溫儀，恒溫控制實(shí)驗(yàn)鼠板，BI-2000動(dòng)態(tài)微循環(huán)圖像觀察測(cè)量系統(tǒng)軟件(成都泰盟科技有限公司);OYLMPUS生物顯微鏡 (日本);DELL計(jì)算機(jī)(美國(guó))。

1.2 方法

1.2.1 分組及給藥方法 50只大鼠隨機(jī)分為微循環(huán)障礙模型組(灌胃予蒸餾水)、血栓心脈寧片低劑量組(予血栓心脈寧350 mg/kg體重)、中劑量組(予血栓心脈寧700 mg/kg體重)、高劑量組(予血栓心脈寧1 400 mg/kg體重)，步長(zhǎng)腦心通陽(yáng)性對(duì)照組(予步長(zhǎng)腦心通800 mg/kg體重)，每組10只。各組大鼠每日灌胃給藥1次，0.5 ml/100 g，連續(xù)給藥5 d。實(shí)驗(yàn)前將高分子右旋糖酐(葡聚糖T500)和蒸餾水按照1∶10配成10%的濃度。臺(tái)式液按照 NaCl 8.0 g，KCl 0.2 g，CaCl20.2 g，MgCl20.1 g，NaH2PO40.05 g，NaHCO31.0 g，葡萄糖 1.0 g 的比例加蒸餾水配成1 000 ml液體。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)方法 連續(xù)灌胃給藥第4天晚禁食不禁水，第5天灌胃半小時(shí)后，給予10%水合氯醛3 ml/kg腹腔注射麻醉，背位固定，行腹正中線切口2～3 cm，輕拉回盲部一段小腸系膜，置于充滿37℃臺(tái)式液的有機(jī)玻璃恒溫水浴槽中，并平鋪在浴槽中央的有機(jī)凸型觀察臺(tái)上，壓上固定板，利用恒溫彩色微循環(huán)顯微儀上攝像頭采集顯微鏡下視頻圖像，通過(guò)視頻采集卡輸入微機(jī)，以微循環(huán)觀測(cè)系統(tǒng)對(duì)所采集的鏡下視頻圖像進(jìn)行實(shí)時(shí)分析。固定一個(gè)視野，觀察選定區(qū)域的微血管管徑、微血管流速、紅細(xì)胞流態(tài)等指標(biāo)。待以上參數(shù)穩(wěn)定后，各組均舌下靜脈注射10%高分子右旋糖酐(3 ml/kg)，造成大鼠微循環(huán)障礙，觀察 5、10、15、20、25、30 min 時(shí)上述指標(biāo)的變化情況，并計(jì)算給藥后微循環(huán)管徑、微血管流速變化率。變化率=(給藥前測(cè)定值－給藥后測(cè)定值)/給藥前測(cè)定值×100%。

2 結(jié)果

2.1 血栓心脈寧片對(duì)腸系膜微循環(huán)障礙血管管徑的影響 模型組在給予10%高分子右旋糖酐后，微血管血流速度明顯減慢，微血管管徑變細(xì);紅細(xì)胞流態(tài)可出現(xiàn)粒緩流，粒擺流，甚至血流處于淤滯狀態(tài)無(wú)恢復(fù)，造模成功。

血栓心脈寧片中劑量組和陽(yáng)性對(duì)照組微血管管徑在給予10%右旋糖酐后15 min即開(kāi)始恢復(fù)，并在30 min內(nèi)逐漸恢復(fù)到給藥前，給藥后不同時(shí)間段微動(dòng)、靜脈管徑的變化率與模型組相比具有顯著差異(P＜0.01)。高劑量組和低劑量組給予10%右旋糖酐后20 min和25 min管徑開(kāi)始恢復(fù)并逐漸增加，但在30 min內(nèi)尚未恢復(fù)到給藥前管徑大小，其血管管徑變化率與模型組相比有顯著差異(P＜0.05，P＜0.01)。表明血栓心脈寧片對(duì)微循環(huán)有改善作用，以中劑量組最明顯。見(jiàn)表1。

2.2 血栓心脈寧片對(duì)腸系膜微循環(huán)障礙血管血流速度的影響中劑量組和陽(yáng)性對(duì)照組微動(dòng)脈血流速度在給予10%右旋糖酐15 min后開(kāi)始恢復(fù)，在30 min流速大致恢復(fù)到給藥前，給藥后與模型組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)。低、高劑量組給予高分子右旋糖酐后20～25 min起流速開(kāi)始恢復(fù)，不同時(shí)間段流速變化率與模型組比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05，P＜0.01)。見(jiàn)表2。

表1 血栓心脈寧片對(duì)腸系膜微循環(huán)障礙血管管徑的影響(n=10，x ± s，%)

表2 血栓心脈寧片對(duì)給予高分子右旋糖酐后血流速度變化率的影響(n=10，x ± s，%)

3 討論

冠心病在祖國(guó)醫(yī)學(xué)中屬于“胸痹、心痛”范疇，主要是由于多種病理產(chǎn)物導(dǎo)致血行不暢，心血痹阻，脈絡(luò)不通。研究表明，冠心病血瘀證是最常見(jiàn)的基本證型〔2〕。現(xiàn)已證實(shí)血瘀即為血液循環(huán)障礙，尤其微循環(huán)障礙〔3〕。由此可見(jiàn)改善微循環(huán)對(duì)于治療冠心病有重要意義。

研究發(fā)現(xiàn)，活血化瘀療法多有改善微循環(huán)的功能〔1〕。血栓心脈寧片是道地取材，包含兩味國(guó)家一類(lèi)新藥(牛黃、麝香)，是我國(guó)第一個(gè)針對(duì)二級(jí)預(yù)防進(jìn)行二次研究開(kāi)發(fā)的現(xiàn)代中藥。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)大鼠腸系膜微循環(huán)障礙活體標(biāo)本的觀察，驗(yàn)證血栓心脈寧片可以促進(jìn)微循環(huán)障礙的微血管動(dòng)、靜脈管徑恢復(fù)，縮短微血管管徑變化率;促使微循環(huán)障礙的血流暢通和血流速度加快;使紅細(xì)胞聚集減少，減少血栓形成，降低血液黏度，從而使微循環(huán)障礙得以緩解。同時(shí)也證明了該藥具有良好的活血化瘀作用。

前期藥理實(shí)驗(yàn)表明，血栓心脈寧片能抑制腦缺血時(shí)自由基的氧化損傷，改善血小板黏附及聚集功能，減少腦組織MDA的生成〔4〕;降低缺血性心肌組織MDA的濃度，提高心肌組織中一氧化氮(NO)水平〔5〕;降低血液中TXA2含量，增加PGI2含量，抑制血小板聚集活性，并可以使急性血瘀模型大鼠全血黏度、血漿黏度降低，抑制血小板聚集〔6〕。血栓心脈寧片改善微循環(huán)的作用可能與上述作用機(jī)制相關(guān)。

1 田 牛.血瘀證的微循環(huán)研究〔J〕.中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志，2001;21(4):248.

2 曠惠桃，潘遠(yuǎn)根.冠心病心絞痛臨床證型分類(lèi)探討〔J〕.中醫(yī)雜志，1997;38(12):742-3.

3 劉 偉，胡曉晨，金慧心，等.心血淤阻型冠心病微循環(huán)變化〔J〕.中醫(yī)藥信息，1996;3:39.

4 劉建偉，曲紹春，于曉風(fēng)，等.血栓心脈寧片對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性腦缺血的保護(hù)作用〔J〕.中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2011;9(3):333-4.

5 郭清軍.血栓心脈寧片對(duì)急性心肌梗死患者再灌注后心肌和微血管的保護(hù)性研究〔J〕.中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2008;6(9):1019-20.

6 王 宏，曲紹春，于曉風(fēng)，等.血栓心脈寧片對(duì)急性血瘀模型大鼠血小板功能和血液流變學(xué)的影響〔J〕.中國(guó)老年學(xué)雜志，2010;30(11):3335-7.