6種固定液短時(shí)間固定對(duì)冰凍切片制片效果影響

徐云生 倪開志

冰凍切片是一種在低溫條件下使組織快速冷卻到一定硬度，然后進(jìn)行切片的方法。由于其制作過程較石蠟切片快捷、簡便，而多應(yīng)用于手術(shù)中的快速病理診斷。但在冰凍切片制作過程中，影響制片的質(zhì)量因素較多，從而影響手術(shù)中的快速病理診斷。因此，快速制作一張高質(zhì)量的冰凍切片對(duì)于確保病理診斷極其重要。其中固定是冰凍切片制作中關(guān)鍵步驟之一，對(duì)切片的制片質(zhì)量有著重要的影響。本文通過6種不同固定液短時(shí)固定對(duì)冰凍切片制片染色的比較，探討不同固定液對(duì)冰凍切片制片效果的影響。

1 資料與方法

1.1 材料 選自楚雄州人民醫(yī)院病理科手術(shù)切除的新鮮組織標(biāo)本40例，包括有乳腺、甲狀腺、胃、子宮、卵巢等組織。

1.2 固定液 6種固定液分別為：10%福爾馬林;95%酒精;AF固定液;丙酮∶甲醇∶乙醚酒精(乙醚∶酒精1∶1)。

1.3 方法

1.3.1 取材及切片 取材大小為1.5 cm×1.5 cm，厚2～3 mm的新鮮組織，用OCT包埋劑包埋后，放進(jìn)徠卡恒溫冷凍切片機(jī)(溫度-18℃ ～20℃)，1～2 min后，每例標(biāo)本連續(xù)切片各6張，厚度4～5 μm。

1.3.2 固定及染色 切片后立即放進(jìn)上述6種不同的固定液(室溫20～25℃)固定6 s。將固定過的切片用蒸餾水洗30 s，放進(jìn)改良的GILL蘇木素液(預(yù)先放在65°恒溫水域箱加熱)2 min，自來水洗，1%鹽酸酒精分化液分化10 s，溫水(50℃)藍(lán)化30 s，伊紅染色30 s，梯度酒精脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片。

2 結(jié)果

切片制作好后，通過對(duì)6種不同固定液的對(duì)比，在顯微鏡下觀察切片的組織清晰度、細(xì)胞收縮度、細(xì)胞核染色、細(xì)胞漿染色、核漿對(duì)比情況。結(jié)果見表1。

表1 6種不同固定液的對(duì)比