鄧秀玲 劉淑萍 王棟
惡性腫瘤嚴重威脅著人們的生命,它的發生、發展與細胞異常增殖和分化有關,如何抑制腫瘤細胞的無限增殖能力,是腫瘤治療的一個基本問題。本實驗探討蒙藥巴特爾-7對胃癌細胞生長的影響,為抗腫瘤蒙藥的進一步開發提供一些理論依據。
1.1 實驗材料 培養基DMEM為Gibco公司產品,胎牛血清為中國醫學科學院血液學研究所生產,噻唑藍(MTT)和二甲基亞砜(DMSO)均為Sigama公司產品。蒙成藥巴特爾-7(以下簡稱蒙藥)、由內蒙古中蒙醫院制劑室生產,用PBS配成50 mg/ml貯液,0.2 mm濾膜過濾除菌4℃保存,實驗時用培養液稀釋到所需濃度。
1.2 細胞培養 MGC-803細胞由北京腫瘤研究所提供,于含慶大霉素80U/ml、10%滅活胎牛血清的DMEM的培養液中培養,置37℃、5%CO2溫箱中孵育,取對數生長期細胞用于實驗。
1.3 蒙藥對胃癌MGC-803的細胞殺傷作用:采用噻唑藍比色法(MTT法),取對數生長期的MGC-803細胞,經消化液消化后制成單細胞懸液,調整細胞濃度為3×104個/ml接種96孔培養板,吹打均勻,每孔接種細胞懸液100 μl,置37℃、5%CO2溫箱中孵育。24 h后實驗組分別加入不同濃度的蒙藥,終濃度分別為 2.5、1.25、0.63、0.31、0.15 mg/ml。另設陰性對照組(只有細胞,不加藥),空白對照組(只含等量培養基,無細胞和藥)。各處理組設8個復孔。以上各處理組總體積均為200 ul。加藥后繼續培養72 h,每孔加入20 ulMTT(5mg/ml)37℃溫育4 h,離心棄上清后每孔加200 ulDMSO,振蕩10 min。選擇570 nm波長,酶標儀上檢測各復孔吸光度(A值)。進行數據統計時,每組去除一個最大值和最小值,按下列公式計算細胞生長抑制率。
抑制率%=(對照組平均A值-實驗組平……